Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Клиническая микробиология.docx
Скачиваний:
243
Добавлен:
22.05.2015
Размер:
733.45 Кб
Скачать

Ботулизм - тяжелое нейропаралитическое заболевание человека и животных, кото­рое вызывается одним из 7 типов нейротоксинов, продуцируемых Clostridiumbotulinum. Ботулизм относится к пищевым токсикоинфекциям.

Этиология. Возбудитель -Clostridiumbotulinum. Грамположительные палочки, об­разуют субтерминально расположенную овальную спору, напоминая теннисную ракетку. Облигатные анаэробы. Дифференцируются на 7 сероваров по антигенной специфичности экзотоксинов (A,B,C,fl,E,F,G). Наиболее распространены серовары возбудителя ботулиз­ма А, В, С, Е.

Эпидемиология. Сапроноз. Источник инфекции - почва, вода. Факторы передачи - пищевые продукты (консервы домашнего приготовления). Путь передачи - пищевой. Восприимчивость высокая. Болезнь возникает, как правило, в результате употребления пищевых продуктов, содержащих токсиныClostridiumbotulinum.

Патогенез.Пищевая токсикоинфекция. Фактор патогенности - термостабильный экзотоксин нейрогенного действия: блокирует передачу нервного импульса в пе­риферических синапсах. Развиваются параличи вследствие поражения бульбарных цен­тров (расстройство аккомодации, двоение в глазах, нарушение глотания, афония).

Лабораторная диагностика.

Первый принцип диагностики - обнаружение токсина и определения его серовара. Используют реакцию нейтрализации токсина на белых мышах, чувствительность которой составляет 10 пг/мл (пикограмм/мл), а также ПЦР для выявления гена ботулинического нейротоксина.

Иммунитет. Антитоксический, типоспецифический, ненапряженный.

Терапия. Специфическая - противоботулинические сыворотки против токсинов А, В, Е (наиболее распространенных).

Профилактика.Специфическая - ботулинический полианатоксин (по эпидпоказа- ниям), смесь моновалентных противоботулинических сывороток (экстренная профилакти­ка).

Псевдомембранозный колит

Этиология.Возбудитель- Clostridiumdifficile. Грамположительные, спорообразу­ющие палочки. Облигатные анаэробы.

Эпидемиология.Часто развивается по типу внутрибольничной инфекции. Источ­ник инфекции - бактерионосители. Путь передачи - контактно-бытовой. Восприимчи­вость высокая у лиц с иммунодефицитом.

Патогенез.Условно-патогенный вид. Основные факторы патогенности: энтероток­син, цитотоксин. Развивается геморрагический некроз толстой кишки, как следствие дис­бактериоза.

Лабораторная диагностика.Основные методы 1-ого принципа: бактериологиче­ский, биологический (реакция нейтрализации токсина антитоксином на мышах).

Иммунитет. Ненапряженный, антибактериальный, антитоксический.

Терапия- антибиотики.

Профилактика.Рациональное применение антибиотиков, соблюдение санитарно- гигиенического и противоэпидемического режима в стационаре.

Неспорообразующие (неклостридиальные) анаэробные инфек- ции

Неклостридиальные анаэробы составляют обширную группу облигатных анаэро­бов, включающих различные таксономические категории. Неспорообразующие анаэробы (бактероиды, фузобактерии, превотеллы и др) являются составной частью нормальной микрофлоры человека. Они обитают на слизистой оболочке ротовой полости, желудочно- кишечного тракта, мочеполовых путей человека. При определенных условиях, снижаю­щих уровень кислорода и окислительно-восстановительного потенциала в тканях, неспо­

20

рообразующие анаэробы вызывают гнойно-воспалительные заболевания различной лока­лизации. В этиологии воспалительных заболеваний ротовой полости важная роль принад­лежит анаэробным грамположительным бактериям родов PrevotellaиPorphyromonas; брюшной полости, органов малого таза и мочеполовой системы - представителям родаBacteroides; кишечника - бактероидам и пептострептококкам. Бактероидная инфекция - это чаще эндогенная инфекция, связанная с повреждением слизистых оболочек, где веге­тируют представители семействаBacteriodaceae. Моноинфекцию вызывают чаще В.fra-gilis, остальные встречаются в ассоциациях между собой и другими бактериями. В лабо­раторной диагностике используют бактериологический метод с выделением чистой куль­туры в строго анаэробных условиях.

Экспресс-индикация гнойно-воспалительных заболеваний, вызываемых неспоро­образующими, анаэробами проводится газожидкостной хроматографией для выявления микробных метаболитов - летучих жирных кислот (уксусная, пропионовая, масляная, ка­проновая и др.), а также ароматических производных (фенилпропионовая, фенилуксусная кислоты), метаболитов фенола, индола, пирола и др.

Этиология. Основные виды возбудителей:Bacteroidesfragilis,Porphyromonasgingi-valis,Fusobacteriumnucleatum,Prevotellamelaninogenicus,Leptotrichiabuccalis,Bilophilawadswozthia. Полиморфные грамотрицательные палочки. Облигатные анаэробы.

Эпидемиология.Эндогенная инфекция в условиях иммунодефицита. Внутриболь­ничная, оппортунистическая инфекция.

Патогенез. Условно-патогенные виды. Представители нормальной микрофлоры че­ловека: толстой кишки, полости рта, половых путей, верхних дыхательных путей. Факто­ры патогенности: капсула, пили, ферменты агрессии, эндотоксин, экзотоксин (лейкоци- дин). Формы поражения: гнойно-воспалительные заболевания разной локализации, ангина Венсана (фузобактерии в ассоциации со спирохетой ротовой полости).

Лабораторная диагностика. Основной метод - бактериологический в условиях анаэробиоза.

Иммунитет. Ненапряженный, антибактериальный.

Терапия- антибиотики.

Профилактика.Санитарно-гигиенические и противоэпидемические мероприятия в стационаре.

21

Схема лабораторной диагностики газовой гангрены, столбняка

Экспресс-метод

22

Схема лабораторной диагностики ботулизма

Экспресс-метод

23

Схема лабораторной диагностики заболеваний, вызванных неспорообразующими

анаэробными бактериями

Экспресс-метод

Транспортные среды: 10% лизи- рованная кровь в глицерине, 10% лизированная кровь в фи­зиологическом растворе, пеп- тонно-дрожжевой бульон с глю­козой и др.

Анаэробный гемагар, анаэробный гемагар с канамицнном (неомицином, гентамици­ном, налидиксовой кислотой), питатель­ная среда для контроля стерильности и др.

Анаэробный

гемагар

24

ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ:

  1. Своеобразие условий заражения возбудителями столбняка, ботулизма, газовой гангре­ны.

  2. Патогенез столбняка, ботулизма, газовой гангрены. Факторы вирулентности возбуди­телей.

  3. Методы лабораторной диагностики клостридиозов.

  4. Особенности иммунитета при столбняке, ботулизме, газовой гангрене.

  5. Специфическая профилактика и лечение столбняка, ботулизма, газовой гангрены.

  6. Значение неспорообразующих анаэробов в патологии человека.

  7. Методы лабораторной диагностики и терапии неклостридиальных анаэробных инфек­ций.

ПЛАН САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ:

  1. Изучить схемы лабораторной диагностики ботулизма, столбняка, газовой гангрены и неклостридиальных анаэробных инфекций.

  2. Выполнить практические работы:

  • «Использование экспресс метода для обнаружения экзотоксинов возбудителей газо­вой гангрены в исследуемом материале»

  • «Бактериологический метод диагностики неклостридиальной анаэробной инфекции» Работа 1

Цель: Ознакомиться с экспрессным методом обнаружения экзотоксинов возбуди­телей газовой гангрены в исследуемом материале.

Задача. В хирургическом отделении у больного развилось осложнение послеопе­рационной раны. Клинически была заподозрена газовая гангрена. При микроскопии ране­вого экссудата обнаружены крупные грамположительные палочки с закругленными кон­цами. С учетом быстрого прогрессирования анаэробной инфекции была проведена экс­пресс-диагностика для обнаружения экзотоксинов в крови больного. Для этого поставлена РПГА. Изучите микропрепарат из раневого отделяемого. Учтите результат РПГА, дайте диагностическую оценку.

Методика. Жидкие эритроцитарные антительные диагностикумы представляют собой1% взвесь формалинизированных и сенсибилизированных антитоксинами эритро­цитов барана. В полистероловых пластинах готовят двукратные разведения исследуемой сыворотки в 0,9 %-ном растворе хлорида натрия в объеме 0,5 мл. В каждую из лунок с разведениями сыворотки прибавляют 0,25 мл антительного диагностикума т.е. эритроци­тов с адсорбированными антитоксинами к экзотоксинам соответствующих видов возбуди­телей газовой гангрены. Обязательными контролями являются: 1. Контроль на отсутствие спонтанной агглютинации диагностикума. Для его постановки в лунки с 0,5 мл физрас­твора добавляют 0,25 мл диагностикума. 2. Контроль на отсутствие в испытуемой сыво­ротке агглютининов к эритроцитам барана. Для этого к 0,5 мл исследуемой сыворотки до­бавляют в разведении1:100взвесь несенсибилизированных формалинизированных эрит­роцитов барана. 3. Контроль с положительной сывороткой для РПГА. Реакция учитывает­ся по наличию агглютинированных эритроцитов, покрывающих дно лунки в виде «зонти­ка». Отрицательный результат учитывается в случае оседания неагглютинированных эритроцитов в виде маленького «колечка» в центре лунки.

25

Микроскопический метод

РПГА

Иссле­

дуемый

матери­

ал

Микроскопия исследу­емого материала(рису­нок)

Диагностикумы

антительные

эритроцитарные

Разведение сыворотки больного

цельная

1/2

1/4

1/8

1/16

К

Perfringens

Novyi

Histolyticum

Septicum

Вывод:

1. Подтверждается ли диагноз? Если да, то каким методом и почему?

  1. Является ли данная инфекция моно- или полимикробной? Ответ объясните, используя данные микроскопии и РПГА.

  1. Какими экспресс-методами можно обнаружить экзотоксины в клиническом материале?

Работа 2

Цель: Изучить бактериологический метод диагностики не-клостридиальной анаэ­робной инфекции

Задача. Больной поступил в хирургическое отделение по поводу проникающего ранения брюшной полости. После операции на 2-е сутки развились симптомы перитонита Для установления этиологии перитонита проведено микроскопическое и бактериологиче­ское исследование перитонеального экссудата путем посева на питательные среды (Эндо, желточно-солевой агар, МПА) В микропрепарате из перитонеального экссудата были об­наружены грамотрицательные палочки. Роста микрофлоры на питательных средах не вы­явлено. Учитывая наличие клинических симптомов, характерных для неклостридиальных анаэробов, проведено повторное бактериологическое исследование экссудата для обнару­жения анаэробной флоры. Учтите результат бактериологического исследования. Устано­вите этиологию перитонита. Оформите протокол.

Методика. Исследуемый материал засевают на питательные среды для транспор­тировки анаэробов. Затем делают посев на специальную питательную среду, например

26

Исследуемый

материал

Микроскопия ис­следуемого мате­риала

Среда для

Метод

создания

анаэроб­

ных

условий

Характеристика

колоний

Микроско­

пия

колоний

Микроско­

пия

чистой куль­туры

II этап. Идентификация чистой культуры анаэробов

Рост на среде с желчью

Рост на среде с канамицином

Проба на аэротолерант­ность

Биохимические свойства по анаэротесту

Вид микро­организма

ряд

1

2

3

4

5

6

7

8

Вывод:

  1. Назовите этиологический фактор перитонита.

27

2. Чем объясняется отсутствие роста микрофлоры на питательных средах: МПА, Эндо, ЖСА?

  1. Укажите возможные пути проникновения в брюшную полость возбудителя, вызвавшего перитонит у данного больного

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ

ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ ВО ВНЕУЧЕБНОЕ ВРЕМЯ АНАЭРОБНЫЕ ИНФЕКЦИИ (КЛОСТРИДИОЗЫ)

Основные физиологические

свойства спорообразующих возбудителей

анаэробных

инфекций

Морфология спорообразующих клостридий Морфологические признаки клостридий

Природный резервуар клостридий

Заболевания, причиной которых являются клостридии

СТОЛБНЯК

Вид возбудителя (латынь)

Расположение споры у клостридии столб­няка

Механизмы заражения столбняком

Входные ворота при столбняке новорож­денных

Входные ворота при столбняке

Строго анаэробный тип дыхания, выделение экзотоксина, размножение в мертвых тканях, способность превращаться в споры

Крупные (10 мкм) грамположительные спо­рообразующие палочки клостридии

Диаметр споры превышает диаметр попе­речного размера Бактерии

Почва

Столбняк, газовая инфекция, ботулизм, псевдомембранозный колит

Clostridiumtetani

Терминальное, в виде "барабанной палочки" Раневой, артифициальный '

Пупочный канатик

Слизистая оболочка матки рожениц

Основной фактор вирулентности возбуди­теля столбняка

Экзотоксин

28

Цель использования биологической пробы при диагностике столбняка

Цель бактериологического метода в диа­гностике столбняка

Препарат, используемый для создания ак­тивного иммунитета против столбняка

Контингент для плановой вакцинации

Контингент для экстренной вакцинации против столбняка

Препарат для создания пассивного иммуни­тета против столбняка

Показания для использования противо­столбнячной сыворотки

Метод введения противостолбнячной ло­шадиной сыворотки

ГАЗОВАЯ ИНФЕКЦИЯ

Вид основного возбудителя (латынь)

Расположение спор у возбудителей газовой инфекции

Факторы патогенности возбудителей газо­вой инфекции

Факторы, способствующие развитию газо­вой инфекции

Особенность патогенеза газовой инфекции

Причина быстрого развития отека, некроза ткани при газовой инфекции

Основные методы диагностики газовой инфекции

Препараты, используемые для специфиче-

Обнаружение экзотоксина в исследуемом материале

Проверка стерильности перевязочного, шов­ного материала, препаратов для паренте­рального введения, степени загрязнения окружающей среды (почва, воздух), реже для подтверждения клинического диагноза

Столбнячный анатоксин

Дети с 3-х месяцев Люди, получившие травмы

Противостолбнячная сыворотка

Вводится больным столбняком, больным с травмами, ожогами и т.д

Дробно, по Безредко

ClostridiumperfringensСубтерминально или в центре

Экзотоксины, ферменты

Характер раны (анаэробные условия, мерт­вая ткань); состояние макроорганизма (шок, кровопотеря); ассоциация с аэробными мик­роорганизмами (кокковая флора и т.д.)

Бурное развитие воспалительной реакции, некроз ткани в месте входных ворот, симп­томы общей

интоксикации организма .

Высокая ферментативная активность и ток- сигенность возбудителей газовой инфекции

Бактериологический и биологическая проба

Сыворотки антитоксические противогангре-

29

ского лечения и экстренной профилактики газовой инфекции

Специфическая активная профилактика га­зовой инфекции

БОТУЛИЗМ

Вид возбудителя ботулизма (латынь) Расположение споры

Основной фактор вирулентности

Наиболее опасны для человека токсины ти­пов

Основной путь заражения ботулизмом

Отличие экзотоксина палочки ботулизма от экзотоксинов других пищевых инфекций

Методы лабораторной диагностики боту­лизма

Реакция, используемая для обнаружения и дифферецирования типа ботулотоксина

Препараты для активной специфи ческой профилактики ботулизма

Препарат для экстренной профи лактики у людей, употреблявших продукты, явившие­ся источником ботулизма, но еще не забо­левших

нозные поливалентные

Противогангренозные анатоксины

Clostridiumbotulinum

Субтерминальное, в виде «теннисной ракет­ки»

Экзотоксины

сероваров А, В, С, D, Е,F,GА, В, Е

Пищевой

Сильнейшее нейротропное действие и сла­бое энтеротропное действие

Бактериологический и биологическая проба

Реакция нейтрализации на мышах с исполь­зованием антитоксических сывороток

1. Трианатоксин. Содержит смесь ботулинических анатоксинов А, В, Е

  1. Тетраанатоксин. Содержит

анатоксины ботулинические типов А, В, Е и столбнячный анатоксин

Смесь моновалентных противоботулиниче- ских сывороток против токсинов А, В, Е

Специфическое лечение ботулизма Противоботулинические сыворотки против

токсинов А, В, Е

ДРУГИЕ ВОЗБУДИТЕЛИ КЛОСТРИДИАЛЬНОЙ АНАЭРОБНОЙ ИНФЕКЦИИ

Вид возбудителя, вызывающего псевдо- Clostridiumdifficileмембранозный колит (латынь)

Основные факторы патогенности С. difficileЭнтеротоксин, цитотоксин

Условия, способствующие развитию псев- домембранозного колита

Нерациональная длительная антибиотикоте- рапия и терапия цитостатиками

30

пп

Вопросы

Ответы

1.

Мог ли развиться столбняк у данного больного в результате автокатастрофы?

2.

Основные клинические симптомы, поз­воляющие поставить диагноз «столбняк»

3.

Возможная причина развития столбняка у данного больного?

4.

Укажите врачебные ошибки, которые могли способствовать развитию заболе­вания

5.

Какой препарат используется для созда­ния активного иммунитета против столбняка, какой иммунитет по направ­ленности он создает и на какой срок

31

п/п

Название препарата

Состав

Показания к применению

Характер действия в организме

Единица изме­рения силы ан­титоксических сывороток

1

Противоботулиническая

антитоксическая

сыворотка

(диагностическая)

2

Противостолбнячная антитоксическая сыво­ротка

(диагностическая)

3

Противогангренозная антитоксическая сыво­ротка

(диагностическая)

4

Анатоксин столбняч­ный адсорбированный (АС- анатоксин)

5

Секста(пента-, тетра-, три-)-анатоксин

6

Противостолбнячная лошадиная сыворотка (ПСС)

7

Иммуноглобулин чело­веческий противо­столбнячный (ПСЧИ)

32

8

Сыворотки противобо­тулинические типов А, В, Е лошадиные очи­щенные

9

Противогангренозная поливалентная лошади­ная сыворотка

*