
- •Часть I
- •§ I. А) Оборудование рабочего места.
- •§ 7. Метод люминесцентной микроскопии.
- •§ I. Устройство электронного микроскопа.
- •§2. Методы электронно-микроскопического препарирования.
- •§3. Методы получения ультратонких срезов
- •§ 4. Демонстрация ультратонких срезов бактериальных клеток в электронном микроскопе.
- •§ 5. Описание метода микроскопии в темном поле см. В методических указаниях к 4 практическому занятию.
- •§ 2. Посмотреть под микроскопом препарат-мазок из культуры бактерий, имеющих жгутики, и зарисовать. Препарат окрашен по методу Бениньетти.
- •§ 3. Окраска по Граму (в модификации Синева) производят следующим образом. Из исследуемого материала готовят тонкий препарат-мазок, высушивают его на воздухе и фиксируют на пламени спиртовки.
- •§ 4. Окраска зерен волютина по Нейссеру.
- •§ 5. Окраска капсул по методу Бурри-Гинса.
- •§ 3. Метод микроскопии в темном поле.
- •§ 6. В препарате-мазке, окрашенном метиленовым синим, обратить внимание на форму дрожжевых клеток, наличие почковидных выпячиваний, а также на внутреннее строение клеток.
- •3Анятие 5
- •§ 9. Сделать посев отпечатков пальцев руки на пластинки мпа и среды Эндо.
- •§ 4. Результаты посева на среды пестрого ряда зарегистрировать в таблице.
- •§ 5. Приготовить взвесь почвы в Физиологическом растворе. С помощью пастеровской пипетки засеять 1-2 капли взвеси на среду Тароцци.
- •§ 4. А) Определение дифтерийного экзотоксина реакцией преципитации в агаре.
- •§ 7. Демонстрация различных методов заражения экспериментальных животных:
- •§ I. Макроскопическое изучение культур стафилококков на кровяном мпа. Зарисовать картину гемолиза.
- •§ 2. Демонстрация инструментария, посуды, разбор правил пересылки материала для исследования в бактериологические лаборатории.
- •§ 5. Опыт действия лизоцима на Micrococcus lysodeikticus.
- •§ I. Определение ld50 по методу Рида и Менча. Ld50 - количество микроорганизмов (бактерий, вирусов), вызывающих гибель 50 % зараженных животных.
- •§ 3. Приготовить корпускулярные антигены из культур водного вибриона и кишечной палочки. Для этого:
- •§ 4. Методы иммунизации животных и получения иммунных сывороток:
- •§ 5. Реакция агглютинации:
- •§ I. Разбор методов приготовления 0- и н-антигенов.
- •§ 5. Определение титра агглютинирующей сыворотки. Для опыта необходимо иметь:
- •§ I. Учесть окончательный результат реакции агглютинации и определить титр испытуемой агглютинирующей сыворотки. Результаты опыта отметить в таблице, схема которой дана ниже.
- •§ 5. Для постановки реакции преципитации необходимо иметь:
- •§ 6.Реакция преципитации в агаре.
- •§2. Реакция лизиса.
- •§ 4. Реакция фагоцитоза. Постановка опсоно-фагоцитарной реакции.
- •§5. А)Прямой иммунофлуоресцентный метод.
- •§ I. А). Опыт трансдукции.
- •Часть II. Вирусология
- •§ I. Зарисовать феномен бактериофагии на плотной питательной среде.
- •§ 2. Для титрования бактериофага используются различные методы. Наиболее точным является метод агаровых слоев, предложенный Графа. Сущность этого метода состоит в следующем.
- •§ 3. А). Элементарные тельца (вирионы) вируса оспы (тельца Пашена) в препаратах, окрашенных по Морозову, выглядят в виде мелких точек круглой или удлиненной формы, темно-коричневого цвета.
- •§ 4. Методы заражения животных разнообразны: внутрибрюшинный, внутривенный, внутримышечный, интраназальный, заражение в мозг и другие.
- •§ 6. С помощью камеры Горяева подсчитают количество клеток в 1 мл. Клетки считают по всей камере под малым увеличением микроскопа . Количество клеток в 1 мл вычисляют по формуле:
- •3. Методы микробиологической диагностики вирусных заболеваний
- •3Анятие 3
- •1. Вирусологические:
- •2. Эпидемиологические:
- •§ 3. Для диагностики вирусных гепатитов могут быть использованы методы:
- •Часть III
- •§1.Зарегистрировать в таблице результаты реакции Райта. Сформулировать и записать вывод: указывают ли результаты реакции на наличие заболевания бруцеллезом у данного больного?
- •§5.Рассмотреть невооруженным глазом и под малым увеличением микроскопа колонии сибиреязвенных палочек (вакцинный штамм сти).
- •§ 2,3. Поставить реакцию агглютинации с монорецепторными 0- и н-сыворотками, принимая во внимание биохимические свойства выделенной культуры. Результаты зарегистрировать в тетрадь.
- •§ 1. Произвести макро- и микроскопическое исследование подозрительных колоний (бесцветные, прозрачные). Посеять подозрительную колонию на скошенный мпа и среды "пестрого ряда".
- •§ 1. Поставить реакцию агглютинации на стекле выделенной культуры кишечной палочки с поливалентными ок-сыворотками:
- •§1. Демонстрация роста анаэробов на средах Виллиса-Хоббс, Тароцци, Вильсон-Блера, Цейсслера, на молоке.
- •§1. Промикроскопировать готовые препараты-мазки из культуры коклюшной палочки с окраской по Граму и зарисовать.
- •§2. Разбор методов микробиологической диагностики коклюша: бактериологического и серологического. Дифференциация коклюшной и паракоклюшной палочек.
- •§2. Промикроскопировать готовые препараты-мазки туберкулезных бактерий, окрашенных по Цилю-Нильсену. Препараты зарисовать.
- •§3. Демонстрация роста туберкулезных бактерий на глицериновом бульоне, яичной среде Петраньяни и других средах.
- •§7. Ознакомление с составом и назначением следующих иммунопрепаратов: туберкулин Коха, очищенный туберкулин ррd-l, вакцина бжп.
- •§1. Произвести учет результатов определения биохимической активности коринебактерий и пробы на токсигенность.
- •§1. Промикроскопировать и зарисовать готовые препараты-мазки риккетсий. По Романовскому-Гимза риккетсии окрашены в красный цвет.
- •§2. Разбор и демонстрация реакции агглютинации с риккетсиозным антигеном (взвесь убитых формалином риккетсий). Результаты реакции зарегистрировать.
§ 6. В препарате-мазке, окрашенном метиленовым синим, обратить внимание на форму дрожжевых клеток, наличие почковидных выпячиваний, а также на внутреннее строение клеток.
§ 7. Дрожжеподобные грибы рода кандида являются одноклеточными микроорганизмами. Диаметр клеток варьирует в пределах 2-15 микронов. Клетки дрожжёподобных грибов одеты отчетливо заметной оболочкой, имеют цитоплазму, компактное ядро, вакуоли и разнообразные включения. Почкование является единственной формой размножения этих грибов. Форма почек округлая или слегка грушевидная.
Наружных спор, типа конидий, и внутренних типа аскоспор, дрожжеподобные грибы не образуют, чем и отличаются от истинных дрожжей, аскомицетов и конидиальных организмов. Некоторые виды кандида образуют хламидоспоры, диаметр их достигает 10-20 микронов, форма округлая, оболочка толстая, двуконтурная. Хламидоспоры возникают на концах псевдомицелия из укрупненных клеток, называемых протохламидоспорами.
Настоящего мицелия дрожжеподобные грибы также не имеют. Образование нитей (филаментация) происходит за счет удлинения клеток и расположения их в длинные цепочки. Такие нити называются псевдомицелием и отличаются от истинного мицелия тем, что не имеют общей оболочки и перегородок, а состоят из длинных клеток, образующихся путем последовательного бокового или концевого почкования.
§ 9. В препаратах из крови больных трехдневной малярией найти различные стадии развития малярийного плазмодия: молодые шизонты кольцевидной формы с вакуолью в центре; зрелые шизонты неправильной амебовидной формы без вакуоли; делящиеся шизонты - в стадии меруляции; макфо- и микрогаметоциты правильной овальной формы. Обратить внимание на форму и размеры эритроцитов. Препараты зарисовать.
§ 10. Токсоплазмы имеют форму полумесяца или напоминают дольки апельсина. Один конец токсоплазмы заострен, а другой - закруглен. Размеры их следующие: длина 4-7 микронов, ширина - 2-4 микрона. При окраске по методу Романовского цитоплазма токсоплазм окрашивается в голубой цвет; ядро, имеющее вид скопления гранул и сети, - в рубиново-красный цвет. Ядро располагается, как правило, в центре паразита, занимая около 1/4 части его тела.
Контрольные вопросы
Какое место занимают спирохеты в системе микроорганизмов?
Дайте классификацию спирохет.
Какое строение имеют спирохеты?
Какие метода микроскопии применяются для изучения морфологии спирохет?
Какой принцип микроскопии в темном поле?
Какое место занимают актиномицеты в системе микроорганизмов?
Как устроена друза актиномицета?
Каковы особенности морфологии актиномицетов?
Что такое спорангий, гифы, мицелий, конидии?
чем отличаются мицелий и органы плодоношения мукоровых, аспергилловых и пеницилловых плесеней?
Чем отличаются споры грибов от спор бактерий?
Каковы строение и способы размножения дрожжей?
Каковы морфологические отличия дрожжеподобных грибов от дрожжей?
Что такое аски?
Почему дрожжеподобные грибы относятся к категории несовершенных грибов?
Какие грибы используются как продуценты антибиотиков?
Какова роль дрожжевых и дрожжеподобных грибов в медицине и промышленности?
Что такое хламидоспоры? Псевдомицелий?
У каких грибов имеет место их образование?
Дайте классификацию простейших.
Назовите патогенных представителей из каждого класса простейших. .
Какое строение имеют трипаносомы?
Что такое блефаробласт, ундулирующая мембрана?
Какое строение имеют лейшманин?
Чем отличается лептомонадная форма лейшманий от лейшманиальной?
Какова классификация возбудителей малярии?
Какие отличительные признаки имеет комар - переносчик возбудители малярии?
Какие циклы развития имеет малярийный плазмодий?
Как и где протекает спорогония?
Как и где протекает шизогония?
Какова морфологии молодых и зрелых шизонтов, микро- и макро-гаметоцитов и стадии меруляции у возбудителя 3-х дневной малярии?
Каковы отличительные особенности возбудителей 4-дневной и тропической малярии?
Как изменяются эритроциты при различных формах малярии?
Какое строение имеет токсоплазма?
Рис.1 Боррелия возвратного тифа (мазок крови, окраска по Романовскому)
Рис.2 Бледная спирохета (мазок из чистой культуры, окраска по Романовскому)
Рис.3 Лептоспира (темное поле)
Рис.4 Актиномицет
Рис.5 Друза актиномицета
Рис.6 Нитчатый гриб мукор
Рис.7 Нитчатый гриб аспергилл
Рис.8 Нитчатый гриб пеницилл
Рис.9 Дрожжи
Рис.10 Дрожжеподобные грибы кандида
Рис.11 Трипаносома (мазок крови, окраска по Романовскому)
Рис.12 Лейшмании в чистой культуре (лептомонадная форма, окраска по Романовскому).
Рис.13 Лейшмании в организме больного (лейшманиальная форма, окраска по Романовскому)
Рис.14 Токсоплазма
Рис.15 Амеба
Рис.16 Малярийные плазмодии (окраска по Романовскому) Молодой шизонт (3-дневная; тропическая)
Рис.17 Малярийные плазмодии (окраска по Романовскому) Зрелый шизонт (3-дневная; 4-дневная)
Рис.18 Стадия меруляции (4-дневная; тропическая)
Рис.19 Гаметоцит (3-дневная; 4-дневная)
Рис. 20 Гаметоцит возбудителя тропической малярии
Приложение к занятию № 4
Для дифференциации малярийных плазмодиев необходимо учитывать следующие признаки:
1. Размеры, форма и количество молодых шизонтов;
2. Размеры и форма зрелого шизонта;
3. Количество мерозоитов на стадии меруляции;
4. Размеры поражённых эритроцитов;
5. Морфология половых клеток - гаметоцитов.
При всех формах малярии молодой шизонт имеет форму "голубого перстня с рубиновым камнем". При тропической малярии в одном эритроците может быть иногда 2-3 молодых шизонта одновременно, при остальных формах - только один.
При 3-дневной и тропической малярии зрелый шизонт имеет амебовидную форму с зернистостью, при 4-дневной - лентовидную форму с узким ядром в виде рубиновой полосы сбоку.
На стадии меруляции при 3-дневной малярии в пораженном эритроците 16-20 мерозоитов, при 4-дневной - 6-8, при тропической – до 30.
Пораженный эритроцит увеличен в диаметре в 1,5-2 раза по сравнению с нормальным только при 3-дневной малярии.
Гаметоциты при 3-х и 4-дневной малярии крупные, занимают почти всю площадь эритроцита, у макрогамет ядро крупнее, у микрогамет -мельче. При тропической малярии гаметоциты имеют серповидную форму.