- •Часть I. Общая медицинская микробиология, вирусология и иммунология
- •Часть I
- •Глава 1
- •Глава 2
- •Тема 2.1. Изучение морфологии бактерий и их тинкториальных свойств. Простые методы окраски
- •Тема 2.3. Морфологические особенности
- •Глава 3
- •Тема 3.2. Идентификация бактерий
- •Глава 4
- •Глава 5
- •Тема 5.1. Морфология и структура вирусов. Вирусоскопические методы исследования
- •Тема 5.2. Культивирование вирусов и других облигатньгх внутриклеточных паразитов (риккетсий, хламидий)
- •Тема 6.1. Модификационная изменчивость, мутации, рекомбинация и перенос генов между бактериями
- •Глава 7 методы стерилизации.
- •Тема 7.1. Методы оценки антимикробного действия химических и физических факторов
- •Тема 7.2. Методы оценки эффективности действия антимикробных препаратов
- •Глава 8
- •Тема 8.1. Микрофлора воды, воздуха и почвы. Методы санитарно-бактериологического исследования воды, воздуха и почвы
- •Тема 8.3. Микрофлора организма человека
- •Глава 10
- •Тема 10.2. Методы количественного определения специфических антител (серодиагностика)
- •Тема 10.3. Методы оценки иммунного статуса организма человека
- •Тема 10.4. Методы оценки клеточного и гуморального иммунного ответа. Вакцины. Иммунные сыворотки и иммуноглобулины
- •Часть II
- •Глава 11
- •Тема 11.1. Методы клинико-диагностических микробиологических исследований и оценка полученных результатов
- •Глава 12
- •Тема 12.1. Аэробные бактерии -возбудители гнойно-воспалительных заболеваний и раневых инфекций
- •Тема 12.2. Анаэробные бактерии - возбудители гнойно-воспалительных и раневых инфекций
- •Глава 13
- •Тема 13.2. Возбудители брюшного тифа, паратифов и иерсиниозов. Дисбактериоз
- •Тема 13.3. Возбудители пищевых
- •Глава 14
- •Тема 14.2. Возбудители менингококковой инфекции, коклюша и дифтерии
- •Тема 14.3. Возбудители туберкулеза, проказы и актиномикоза
- •Тема 15.1. Возбудители сифилиса и мягкого шанкра
- •Тема 15.2. Возбудители гонореи, урогенитального хламидиоза, микоплазмоза и уреаплазмоза
- •Глава 16
- •Тема 16.1. Возбудители чумы, туляремии, бруцеллеза, сибирской язвы, лептоспироза и других зоонозных инфекций
- •Глава 17
- •Глава 18
- •Глава 19
- •Тема 20.1. Микробиологическая диагностика кишечных вирусных инфекций и вирусных гепатитов
- •Глава 21
- •Тема 21.1. Микробиологическая диагностика вирусных поражений кожи, слизистых оболочек, лимфоидной и железистых тканей
- •Глава 22
- •Тема 22.1. Микробиологическая диагностика инфекций, вызванных онкогенными вирусами человека и вирусами иммунодефицита человека
- •Глава 23
- •Глава 24
- •Тема 24.1. Микробиологическая диагностика протозойных инфекций
Глава 4
МОРФОЛОГИЯ И ФИЗИОЛОГИЯ ГРИБОВ
Введение. Грибы представляют собой многочисленную группу микроорганизмов, относящихся к доминиону Eukarya, царству Mycota. Классификация внутри царства основана на морфологии, характере и способах размножения, физиологических особенностях и других признаках. Клетка гриба имеет ультраструктуру, типичную для эукариот. Все грибы способны к бесполому размножению, совершенные грибы могут также размножаться половым путем. Представители одного вида в половой (телеоморфной) и бесполой (анаморфной) фазах развития могут существенно различаться по морфологии, экологии и в случае патогенных видов способности вызывать заболевания. Грибы подразделяются на две основные морфологические группы: плесени (нитевидные грибы) и дрожжи.
Морфология плесневых грибов. Вегетативное тело плесневого гриба — гифа — имеет нитевидную форму. Толщина гиф обычно превышает 2 мкм, что позволяет отличить их от актиноми-цетов, толщина клеток которых не превышает 1 мкм. Длина гиф у свободно живущих видов может достигать нескольких метров. У высших грибов гифа разделена мембранными перегородками — септами, у низших септы отсутствуют. Гифы в процессе развития ветвятся и образуют анастомозы, за счет чего формируется переплетенная структура — мицелий. Различают субстратные гифы (мицелий), погруженные в питательный субстрат, и воздушные, растущие над его поверхностью.
Плесневые грибы размножаются преимущественно путем образования вегетативных (бесполых) спор, которые у предста-Род Мицелий Вегетативные споры вегетатив- репродук- тип расположение ный тивный Мисог Несепти- Несепти- Эндо- В спорангии рованный рованный споры споран-гиеносец Asper- Септиро- Несепти- Экзо- Свободное на В виде gillus ванный рованный споры концах ответ- "лейки" конидие- (кони- влений репро-носец дии) дуктивных гиф Penicil- To же Септиро- То же В виде Пит ванный "кисто-конидие- чек" носец |
параты раздавленная" капля из чистых культур грибов родов Penicillium, Aspergillus, Mucor.
Питательные среды для культивирования грибов.
Рост и типы филаментации дрожжеподобных грибов рода Candida на картофельном агаре.
Изучение биохимических признаков чистой культуры грибов рода Candida ("пестрый ряд").
Задание студентам
Микроскопировать и зарисовать мазки, предложенные для демонстрации.
Ознакомиться с таблицами.
Описать характер роста грибов рода Candida на глюкозокартофельном агаре. Указать тип филаментации (по данным таблицы "Бластоспоры и филаментация дрожжеподобных грибов").
Проанализировать "пестрый ряд" чистой культуры грибов рода Candida, сверяя полученные результаты с данными таблицы "Таксономические признаки дрожжеподобных грибов рода Candida", и сделать заключение о видовой принадлежности.
а Методические указания
Морфологию грибов изучают в нативных и фиксированных препаратах. Для приготовления нативного препарата "раздавленная капля" для изучения морфологии плесневых грибов отделяют препаровальными иглами небольшой участок мицелия с плодоносящими гифами и прилегающим к нему тонким слоем питательной среды. Материал помещают в каплю воды на предметном стекле, иглой расправляют мицелий, придавливают покровным стеклом и микроскопируют при опущенном конденсоре. Препарат просматривают с объективом 8х, а затем — 40х. Предварительно колонии или культуры грибов микроскопируют непосредственно на чашках или в пробирках под малым увеличением.
Методы культивирования грибов аналогичны бактериологическим. Грибы выращивают на специальных сложных питательных средах (среда Сабуро, сусло-агар, картофельные, морковные среды и др.), включающих углеводы в качестве источника энергии и углерода и различные факторы роста. Для приготовления таких сред обычно используют натуральные добавки: дрожжевой экстракт, пивное сусло, овощные экстракты и др. Для задержки роста бактерий добавляют антибиотики и/или молочную кислоту.
Среда Сабуро состоит из дрожжевой воды с добавлением 1 % пептона, 2 % агара и 4 % мальтозы (или глюкозы). Питательную среду разливают в пробирки и стерилизуют при 0,5 атм в течение 20 мин. В жидкие среды агар не добавляют.
Этапы выделения чистых культур грибов (из организма больного или объектов внешней среды) те же, что и при выделении бактерий. Исследуемый материал засевают на специальные жидкие обогатительные (для накопления в случае малой концентрации микроорганизмов) или плотные питательные среды для получения изолированных колоний и инкубируют в термостате при температуре 37е и 28—30 'С в течение нескольких дней. Рост грибов наблюдается на 3—5-е сутки. На плотных средах формируются разнообразные колонии: плоские, выпуклые, гладкие, морщинистые, мучнистые, слизистые, пушистые и др., часто пигментированные. Так, дрожжеподоб-ные грибы рода Candida на 2—3-й день после посева образуют мелкие выпуклые пигментированные колонии с гладкой блестящей поверхностью, которые нередко сливаются и врастают в питательную среду. Делают пересев колоний, выделяют чистую культуру и проводят идентификацию с определением родовой и видовой принадлежности на основании морфологических, культуральных, биохимических и других признаков. Методы идентификации грибов аналогичны методам идентификации бактерий. Особое значение для определения видовой принадлежности чистой культуры плесневых грибов имеет изучение их морфологии. Для определения культуральных признаков колонии грибов микроскопируют непосредственно на чашках или в пробирках под малым увеличением. Биохимические свойства можно определить с помощью "пестрого ряда" или другими методами (см. тему 3.2).