Нативные препараты крови микроскопируют в темном поле, наблюдая подвижность боррелий (рис. 45А).
А
Б
Рис. . Боррелии возвратного тифа:
А — B. burgdorferi в гемолимфе клеща при ТПМ;
Б — B. recurrentis в тонком мазке крови больного возвратным тифом
Фиксированные препараты окрашивают по Романовскому-Гимзе или фуксином. Боррелии при окраске по Романовскому-Гимзе —фиолетовые, фуксином — розовые (рис. 45б).
Световая микроскопия мазков, импрегнированных серебром.
Электронная микроскопия.
Боррелий обнаруживают в крови животных и гемолимфе клещей (микроскопируют раздавленного клеща либо ставят РИФ). Выявление инфицированных клещей, снятых с укушенных людей, имеет очень важное значение, так как позволяет проводить превентивную антибиотикотерапию Лайм-боррелиоза.
Лептоспиры
Представители лепоспир и их роль в патологии. Единственный патогенный для человека вид лептоспир — L. interrogans (известно около 200 сероваров) — возбудитель острого природно-очагового зоонозного заболевания — лептоспироза. Больной человек выделяет возбудителя, но эпидемического значения не имеет. Широкое распространение лептоспир и заболевания, вызываемые ими, регистрируются во многих странах мира.
Резервуаром лептоспир в природе являются животные 4 классов позвоночных (млекопитающие, земноводные, пресмыкающиеся и птицы). Чаще это грызуны, крупный рогатый скот, свиньи, собаки. Животные переносят заболевание в бессимптомной форме и длительное время с мочой выделяют лептоспиры. Попав в воду, почву, лептоспиры сохраняют жизнеспособность в течение 2–3 нед. В пищевых продуктах (молоко, масло, хлеб) выживают несколько дней.
Заражение человека в природных очагах происходит главным образом алиментарным путем (через контаминированные воду или пищевые продукты), а также контактно-бытовым (при купании в контаминированных водоемах, уходе за инфицированными животными, контакте с растительностью). В прошлом связь заболевания с водой была настолько очевидна, что болезнь называли «водная лихорадка».
Лептоспиры обладают высокой инвазивной способностью, они могут проникать через неповрежденную кожу и слизистые оболочки ротовой полости, носа, глаза, ЖКТ. На месте внедрения возбудителя первичного аффекта не возникает. Затем лептоспиры проникают в кровь и разносятся в различные ткани и органы. Там происходит их размножение и поражение мышц, особенно икроножных, почек, печени, нервной системы. Различают тяжелые желтушные формы лептоспироза, ассоциированные с гепатитом и гломерулонефритом (болезнь Васильева-Вейля) и субклинические безжелтушные формы. Тяжесть заболевания зависти от реактивности макроорганизма. После перенесенного заболевания развивается длительная невосприимчивость к данному серовару лептоспир. Однако иммунитет типоспецифический, поэтому возможно повторное заражение другим сероваром лептоспир.
Методы изучения морфологии лептоспир.
Темнопольная микрокопия. Лептоспиры плохо окрашиваются анилиновыми красителями, потому их изучают обычно в живом состоянии при микроскопии нативных препаратов в темном поле зрения (рис. 46).
Рис.46 . Лептоспиры при темнопольной микроскопии
Однако при микроскопии исследуемого материала (крови, мочи, ликвора, растертых органов трупов) иногда увидеть лептоспиры в темном поле не удается. Поэтому лучше исследовать надосадочную жидкость центрифугатов исследуемого материала.
2. Лептоспиры анилиновыми красителями окрашиваются плохо, при окраске по Романовскому-Гимзе — розовые.