AVEKM 2011

Актуальные вопросы экспериментальной и клинической медицины – 2011

В.А. Нещадина, Д.К. Щербакова ВАРИАТИВНОСТЬ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ БАКТЕРИЙ РОДА STREPTOCOCCUS

(научный руководитель – к.м.н., доц. М.В. Бадлеева)

Бурятский государственный университет Улан-Удэ, Россия

Введение. Стрептококки относятся к роду Streptococcus. В этот род входят более 20 видов, среди которых есть представители нормальной микрофлоры человека и возбудители тяжелых заболеваний. Стрептококковые инфекции – группа преимущественно антропонозных заболеваний, вызываемых стрептококками различных серогрупп, характеризуется поражением верхних дыхательных путей, кожных покровов и развитием различных осложнений. Поэтому для врача важно знать влияние условий культивирования на морфологические свойства бактерий рода Streptococcus.

Цель. Выяснить влияние питательной среды на морфологические свойства бактерий рода Streptococcus. Материал и методы. У 28 пациентов были взяты мазки из носоглотки. Далее диагностический материал был

посеян на жидкую питательную среду – 5% сахарный бульон. После инкубации посевов из жидкой среды готовили мазки, микроскопировали в иммерсионной системе, при обнаружении стрептококков в мазке проводили пересев из жидкой на плотные питательные среды. Через 18-20 часов посевы просматривали на наличие роста колоний, готовили мазки, микроскопировали.

Результаты. В ходе проведения исследования морфологических свойств рода S. Pyogenes нами были выявлены различие морфологических свойств у клинических штаммов при посеве на жидкие и плотные питательные среды. Исследованные клинические штаммы проявляют разные морфологические свойства. Так, Streptococcus pyogenes представляет собой цепочки круглых или овальных кокков, спор и жгутиков не образуют, имеют капсулу, Грамм положительные. На плотных питательных средах S. Pyogenes образуют короткие цепочки, размеры бактерий сравнительно больше, чем у стрептококков из клинического материала и жидкой среды.

Выводы. На основании вышеизложенного следует, что в условиях изменения условий культивирования Streptococcus проявляют разную адаптационную активность, что сказывается на морфологии бактерий.

Р.С. Аракельян, А.Ю. Кузина ПОРАЖЕНИЯ ГЕПАТОБИЛИАРНОЙ СИСТЕМЫ У ДЕТЕЙ, ВЫЗВАННЫЕ

ГЕЛЬМИНТАМИ И ПАТОГЕННЫМИ ПРОСТЕЙШИМИ

Астраханская государственная медицинская академия Астрахань, Россия

Введение. Паразитами, поражающими гепатобилиарную систему являютя: лямблиоз, эхинококкоз и описторхоз.

Цель. Рассмотреть паразитарные поражения гепатобилиарной системы у детей.

Материалы и методы. Исследования проводились в 2000–2010 гг.. Использованы методы: паразитологический, эпидемиологический и статистический.

Результаты. В Астраханской области за 2000–2010 гг. зарегистрировано 5569 случаев лямблиоза (11,1% от общего числа паразитарных болезней), из них 4183 случая (75%) – дети до 17 лет. Проанализированы эпидкарты детей в возрасте 3-14 лет. Диагноз лямблиозного холецистита и холангиохолецистита выставлен у 87 детей в возрасте от 3-х до 14 лет и подтверждён: обнаружением цист лямблий в кале (98,8%); определением антител в сыворотке крови методом ИФА (90,8%). Постоянными симптомами лямблиоза являлись: стойкая обложенность языка – 48%; вздутие живота, метеоризм и урчание в кишечнике по 4%; болезненность живота при пальпации в правом подреберье и выше пупка – 34%; увеличение печени – 6%. Диагноз во всех случаях был установлен на основании анамнеза и обнаружения цист лямблий в кале.

За 2000-2010 гг. зарегистрировано 41 случай эхинококкоза и 17 случаев описторхоза у детей до 17 лет. 17 сл. описторхоза.

Выводы. Поражения гепатобилиарной системы у детей связана с возбудителями паразитарных болезней (лямблиоз, эхинококкоз, описторхоз).

Чаще всего причиной поражения гепатобилиарной системы являются лямблии, эхинококк и описторх.

131

Микробиология, вирусология, микология

Р.С. Аракельян, А.С. Стулова ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОСТАВА РЕАКТИВОВ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ КРОВЕПАРАЗИТОВ

Астраханская государственная медицинская академия Астрахань Россия

Введение. Диагностика дирофиляриоза обычно базируется на обнаружении и идентификации микрофилярий в крови различными методами.

Цель. Определить состав реактивов для выявления кровепаразитов животных.

Материалы и методы. Исследования проводились на базе УФСИН. Наблюдались 150 служебных собак, инвазированных дирофиляриями.

Результаты. При смешивании крови и дистиллированной воды при приготовлении тонкого мазка в 100% случаев мы не обнаруживали возбудителя. При взаимодействии водного раствора формалина в 5,3% случаев обнаруживался возбудитель. При взаимодействии раствора цитрата натрия с кровью в 92,7% отмечались изменения структуры самого возбудителя. При получении смеси: физиологический раствор – кровь животного, в 85,3% отмечалось разрушение личинки паразита. Используя ацетилсалициловую кислоту в качестве химического реагента при исследовании крови животных на кровепаразиты в 11,3% наблюдали изменения структуры паразита.

При взаимодействии водного раствора уксусной кислоты и свежеотобранной крови в 98,7% при микроскопировании паразит не изменял своей структуры, не нарушалась его целостность, и удавалось провести его видовую идентификацию.

Нами было определено, что при использовании pH воды от 7,0 до 7,2 в 100% случаев при микроскопировании нам удавалось определить возбудителя до его видовой принадлежности. Наружная оболочка личинки паразита и его внутреннее содержимое оставались неизмененными, а сам паразит окрашивался в голубой цвет.

Выводы.

Наиболее благоприятным химическим реагентом является 5% водный раствор уксусной кислоты, при использовании которого не происходит деформация паразита и определяется возможность его видовой идентификации.

При использовании дистиллированной воды с pH 7,0 – 7,2 в 100% случаев возбудитель окрашивался в голубой цвет, и определялась возможность определения его внутреннего содержимого.

Р.С. Аракельян, Л.П. Михальчук, В.В. Мацакова, С.А. Малакутова ЗAБОЛЕВАЕМОСТЬ ДЕТЕЙ ДОШКОЛЬНОГО ВОЗРАСТА ГЕЛЬМИНТОЗАМИ И ПАТОГЕННЫМИ КИШЕЧНЫМИ ПРОТОЗООЗАМИ ЗА 2000 - 2010 годы

Астраханская государственная медицинская академия Астрахань, Россия

Введение. По оценкам специалистов, ежегодно число заболевающих паразитарными болезнями в России превышает 20 млн. и имеет тенденцию к увеличению.

Цель. Изучить заболеваемость детей дошкольного возраста гельминтозами и патогенными кишечными протозоозами за 2000 - 2010 годы.

Материалы и методы. За анализируемый период зарегистрировано 58735 случаев паразитарных заболеваний, в т.ч. гельминтозов – 52432 сл. (89,3%) и протозоозов – 6303 сл. (10,7%).

Результаты. Заболеваемость детей в возрасте от 0 до 17 лет составила 50288 сл. (85,6%), в т.ч. заболеваемость детей дошкольного возраста от 0 до 7 лет составила 6910 сл (13,7% от общего числа заболевших детей в возрасте до 17 лет) и 11,8% от всего числа больных паразитарными болезнями.

По возрастам заболеваемость распределялась следующим образом: дети в возрасте до 1 года – 71 сл. (0,1% от общего числа заболевших детей), в возрасте от 1 до 2 лет – 837 сл. (1,7%), в возрасте от 2 до 6 лет – 6002 сл. (11,9%), в возрасте от 6 до 14 лет – 8448 сл. (16,8%) и в возрасте от 14 до 17 лет – 34930 сл. (69,5%).

Структура паразитарной заболеваемости у детей дошкольного возраста представлена 10 нозологическими формами, в т.ч. протозоозами – 3 нозоформами – 814 сл. (11,8%) и гельминтозами – 7 нозоформами – 6096 сл. (88,2%).

Выводы.

Проблема гельминтозов у детей дошкольного возраста до сих пор остается актуальнейшей проблемой не только инфекционистов, но и педиатров.

Заболеванию подвержены дети всех возрастных групп.

Отсутствие необходимых знаний в области диагностики, клиники, лечения и профилактики паразитарных болезней, полная неинформированность населения о реальной опасности этой патологии и мерах личной профилактики не позволяют сделать благоприятный прогноз.

132

Актуальные вопросы экспериментальной и клинической медицины – 2011

М.П. Водопьянова, О.Ю. Бубнова, Р.С. Аракельян ДИРОФИЛЯРИОЗ ОРГАНОВ ЗРЕНИЯ ЧЕЛОВЕКА

Астраханская государственная медицинская академия Астрахань, Россия.

Введение. Дирофиляриоз– заболевание, вызываемое паразитированием нематоды Dirofilaria repens в подкожной клетчатке различных частей тела, слизистых и конъюнктиве органа зрения, в половых органах, молочных железах, внутренних оболочках тканей и органов брюшной полости человека.

Цель. Осветить проблему глазного дирофиляриоза у жителей Астраханской области. В настоящее время в Астраханской области зарегистрировано 76 случаев дирофиляриоза человека, из них 38,2% приходится на поражения органов зрения.

Материалы и методы. Всего за анализируемый период в г.Астрахани зарегистрировано 24 случая (82,9%) глазного дирофиляриоза. Возраст больных колебался от 13 до 61 лет. Максимальное число случаев заболевания зарегистрировано у лиц в возрасте от 30 до 39 лет. Гельминт локализовался в области век–55,2%, в области орбиты–44,8%. Размеры извлеченных гельминтов колебались от 50 до 170 мм (93,1%). В 6,9% в паразитологическую службу доставлялись фрагменты гельминта, идентифицированные как самка нематоды

Dirofilaria repens.

Результаты. В большинстве случаев больные за помощью обращались к врачам различных специальностей, где выставлялись неправильные диагнозы: атерома – 27,8%, новообразование и липома –10,3% и т.д. В 3,4% больной за помощью не обращался – паразит выделился самостоятельно. И только в 24,2% специалистами был выставлен правильный диагноз «Дирофиляриоз».

Выводы. Проблема дирофиляриоза обусловлена широкой циркуляцией возбудителя в природной среде и отсутствием надлежащих мер по выявлению и дегельминтизации зараженных животных. Сложность раннего выявления заражения людей связана с трудностью дифференциальной диагностики и низкой осведомленностью врачей об этой разновидности гельминтоза.

Т.В. Кириенко, Р.С. Аракельян КЛИНИКО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ДИРОФИЛЯРИОЗА

ЧЕЛОВЕКА В ЮЖНОМ ФЕДЕРАЛЬНОМ ОКРУГЕ НА ПРИМЕРЕ АСТРАХАНСКОЙ ОБЛАСТИ

Астраханская государственная медицинская академия Астрахань, Россия

Введение. Проблема дирофиляриоза, вызываемого нематодами Dirofilaria repens и Dirofilaria immitis, в нашей стране изучена недостаточно.

Цель. Рассмотреть клинико-эпидемиологические особенности дирофиляриоза человека в Южном Федеральном округе на примере Астраханской области.

Материалы и методы. Исследования проводились в Астраханской области. Использовались следующие методы: эпидемиологический, паразитологический, статистический.

Результаты. С 1915 по 2008 гг. на территории РФ зарегистрировано 564 случая дирофиляриоза человека. В Астраханской области зарагистрировано 76 случаев заболевания.

Гельминт локализовался: в области век – 28,6%, в области глаз и в области лба – по 17,1%, в области волосистой части головы – 11,4%, в области верхних конечностей – 8,7%. Единичные случаи локализации отмечались в области лица, груди и нижних конечностей – по 5,7%. 44% больных отмечались миграцию гельминта.

Размеры извлеченных гельминтов колебались от 40 до 150 мм.

Было обследовано 1870 собак. Дирофиляриоз верифицировался в 107 случаях. Пораженность составила 5,7%. Заболевание регистрировалось у собак разных пород и возрастов.

Исследовано 334 комара (из них 90 комаров рода Aedes, 157 рода Culex и 87 рода Anopheles), зараженными оказалось 20 особей (5,9%), в т.ч. Aedes – 6,7%, Culex – 7,0% и Anopheles – 3,4%.

Выводы. За последние годы отмечается рост числа случаев дирофиляриоза не только среди людей, но и среди потенциальных источников инвазии (собаки).

Увеличение числа социально неблагополучных факторов, низкое качество профилактических исследований, потепление климата способствуют повышению риска заражения и увеличению числа случаев местной передачи возбудителя дирофиляриоза.

133

Микробиология, вирусология, микология

А.С. Стулова, Р.С. Аракельян РАЗРАБОТКА ОПТИМАЛЬНОЙ ТЕХНИКИ ЗАБОРА КРОВИ У ЖИВОТНЫХ

Астраханская государственная медицинская академия Астрахань Россия

Введение. По данным мировой литературы забор крови у обследуемых животных производится из правой передней лапы либо из мочки уха.

Цель. разработать оптимальную технику забора крови у животных.

Материалы и методы. Свои исследования мы проводили на служебных собаках УФСИН. Было обследовано 200 собак. Дирофиляриоз верифицировался в 36 случаях. Пораженность составила 18%.

Результаты. Производился забор крови из разных лап обследуемых животных, в результате чего пришли к выводу, что он не зависит от выбора лапы. В данном случае возбудитель выявлялся в 94,4% случаях

Вслучаях, когда мы проводили забор крови у животных из мочки уха, то только в 27,8% случаев нам удавалось в крови обследуемых животных обнаружить возбудителя.

Нами было определено, что при заборе крови из венозной крови в 100% обнаруживались паразиты. В результате исследований из венозной системы наших исследований, обнаружено, что при отборе проб крови из передней плечевой вены передней лапы у обследуемых животных, в 80,6% случаев обнаруживались личинки кровепаразитов. В тоже самое время, при отборе проб крови из мелких вен мочки уха обследуемого животного, в 19,4% нам удавалось обнаружить паразита и определить его видовую принадлежность.

Мы также проводили забор крови из капиллярной сети лап и мочки уха обследуемого животного. В результате определено, что при заборе крови из мелких капилляров передней лапы обследуемого животного, в 13,9% обнаруживались личинки кровепаразитов. При отборе проб крови из капиллярной сети мочки уха животного, в 8,3% были обнаружены личинки кровепаразитов.

Востальных 77,8% при исследовании капиллярной крови инвазированных дирофиляриями животных, не удавалось ничего обнаружить.

Вывод. Оптимальной техникой забора крови от животных на кровепаразиты является отбор проб крови из передней плечевой вены правой передней лапы животного.

А.С. Стулова, Р.С. Аракельян УСЛОВИЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ КРОВЕПАРАЗИТОВ

Астраханская государственная медицинская академия Астрахань Россия

Введение. В отечественной и зарубежной литературе нет данных, которые бы опровергали утверждение об условиях забора материала от животных на кровепаразиты.

Цель. разработать условия приготовления препаратов для выявления кровепаразитов.

Материалы и методы. Исследования проводились летом 2011 г. на базе ООО НПП «Центр паразитологии». Результаты. Мы готовили раствор непосредственно перед выездом на отбор проб крови. Хранили мы

полученный реагент в течении 21 дня в холодильнике и без него.

Так, при хранении приготовленного 5% водного раствора уксусной кислоты в течение недели при комнатной температуре ниже 24°С, раствор не изменял своего химического состава и мог быть пригодным для дальнейшего использования.

При транспортировке 5% водного раствора уксусной кислоты в сумке-холодильнике, в 100% нам удавалось доставить реактив в неизмененном виде в надлежащее нам учреждение. Одновременно мы проводили исследования по доставке химреактива без соответствующих условий. Так, при транспортировке реактива без сумки-холодильника при температуре +25°С в 100% случаев 5% водный раствор уксусной кислоты не изменял своего состава и был пригодным к дальнейшему его использованию. При температуре воздуха от 26°С до 30°С, в половине случаев мы наблюдали появление белых едва различимых хлопьев в самом реактиве (появление хлопьев в любом химическом реактиве свидетельствует о непригодности соединения к его дальнейшему использованию).

Вывод. Хранить приготовленный 5% водный раствор уксусной кислоты необходимо в условиях холодильника.

Наиболее оптимальной температурой хранения 5% водного раствора уксусной кислоты является температура окружающей среды ниже 25°С.

134

Актуальные вопросы экспериментальной и клинической медицины – 2011

А.С. Стулова, Р.С. Аракельян СПОРАДИЧЕСКИЕ СЛУЧАИ МИКСТ-ИНВАЗИИ У ЧЕЛОВЕКА В АСТРАХАНСКОЙ ОБЛАСТИ

Астраханская государственная медицинская академия Астрахань, Россия

Введение. Цистицеркоз – биогельминтоз, который вызывается паразитированием в тканях и органах человека личиночной стадии T. solium – цистицерка (Cysticercus cellulosae). Болезнь проявляется разнообразными симптомами в зависимости от локализации цистицерков. Промежуточными хозяевами служат домашняя свинья, дикий кабан, медведь, верблюд, реже – собака, кошка, кролик, заяц и др.

Человек заражается цистицеркозом в результате аутосуперинвазии или заглатывании яиц (онкосфер) T.solium (свиной цепень). При аутосуперинвазии из кишечника человека зрелые членики забрасываются в желудок, где онкосферы внедряются в капилляры и с током крови заносятся в различные органы и ткани. В настоящее время на территории России отмечаются лишь спорадические случаи заболеваний.

Цель. Определить вид микст-инвазии.

Результаты. Впервые за 10 лет в 2010 г. в Астраханской области зарегистрирован случай цистицеркоза человека у пациента, проживающего в Приволжском районе. По результатам гистологического исследования препарата паразитарной кисты из полости левого желудочка сердца подтвержден цистицеркоз.

Материалы и методы. При обследовании выявлены МР-признаки многоочагового мультикистозного поражения полушарий головного мозга паразитарного характера, селезенки и правой почки. Серологически методом ИФА выявлены антитела к эхинококку титром 1:100, что не является диагностическим показателем эхинококкоза.

Вывод: наличие таких данных дает возможность предполагать, что у больного микст-инвазия, как эхинококком, так и цистицерком.

135

Молекулярная биология и медицина: генетика, иммунология, протеомика, нейробиология, бионанотехнологии

137

Молекулярная биология и медицина

Е.С. Ефременко ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА ФАКТОРА НЕКРОЗА ОПУХОЛИ - АЛЬФА У БОЛЬНЫХ АЛКОГОЛИЗМОМ

(научный руководитель – д.м.н., проф. В.Е. Высокогорский)

Омская государственная медицинская академия Омск, Россия

Введение. Увеличение продукции фактора некроза опухоли - альфа у больных алкоголизмом сопряжено с поражением клеток печени. В значительной степени определяющим уровень синтеза фактора некроза опухоли – альфа является полиморфизм G -308 A промоторного участка гена данного фактора. Считается, что наличие аллеля А сопровождается гиперпродукцией фактора некроза опухоли – альфа. Его избыточная секреция ведет к нарушению функции митохондрий, отеку гепатоцитов, индукции апоптоза.

Цель. Исследование генотипов полиморфного локуса G -308 A гена фактора некроза опухоли – альфа у больных алкоголизмом

Материалы и методы. Анализ полиморфных локусов указанного гена у больных алкоголизмом осуществлялся с помощью метода полимеразной цепной реакции в стандартных условиях на амплификаторе «Терцик» («ДНК-Технология», г. Москва). Контрольную группу составили 89 условно здоровых лиц аналогичной возрастной категории. Сила ассоциации оценивалась в значениях показателей отношения шансов (OR).

Результаты. Значения OR для генотипов G/G, G/A, A/A составили 0,98, 2,71, 0,28, соответственно.

Выводы. Данные свидетельствуют о положительной ассоциации генотипа G/A c наличием диагноза у группы обследуемых и позволяют расценивать выявленные изменения в качестве «фактора риска» развития поражения структур клеток внутренних органов при алкогольной интоксикации.

Г.В. Безнин, А.Г. Пшеничная, А.Г. Кусов МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ НАРУШЕНИЯ В МОЗГЕ КРЫС, ПЕРЕНЕСШИХ ПСИХИЧЕСКУЮ ТРАВМУ

(научный руководитель — д.м.н., проф. С.Г. Цикунов)

Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины СЗО РАМН Санкт-Петербург, Россия

Введение. Длительные стрессовые переживания могут приводить к функциональным и структурным нарушениям в мозге. Острая психическая травма приводит к длительно сохраняющимся нарушениям поведения животных по типу посттравматического стрессового расстройства (ПТСР), дисбалансу в метаболизме липидов и нейромедиаторной передаче (Цикунов и др., 2006).

Цель. Характеризовать морфологические и функциональные изменения в мозге крыс, переживших острую психическую травму.

Материалы и методы. Эксперименты проводились на крысах Спраг Доули. Животные однократно переживали ситуацию гибели партнера по клетке от действий питона. Через 25 дней крыс умерщвляли, мозг извлекали и фиксировали. Для анализа использовали маркеры PCNA, NeuN и окраску по Нисслю.

Результаты. В мозге крыс при окраске по Нисслю в отличие от контроля были обнаружены сморщенные и гиперхромные клетки. Наибольшее количество сморщенных клеток выявлено в гиппокампе. Также сморщенные клетки имелись в коре больших полушарий. Большая плотность сморщенных клеток отмечена в супраоптическом ядре. При окраске на PCNA в зубчатой извилине гиппокампа выявлено подавление пролиферации и, напротив, ее усиление в негерминативных областях мозга. При окраске на NeuN наблюдался недостаток синтеза этого белка в пирамидных клетках отдельных областей гиппокампа.

Выводы. Последствия острой психической травмы проявляются гибелью нервных клеток и нарушением процессов нейрогенеза в мозге.

138

Актуальные вопросы экспериментальной и клинической медицины – 2011

М.С. Василенко

ТИРОЗИНГИДРОКСИЛАЗА И НЕЙРОМЕЛАНИН В SUBSTANTIA NIGRA У КРЫС И ЧЕЛОВЕКА

( научный руководитель – д.м.н.. Д.Э. Коржевский)

Научно исследовательский институт экспериментальной медицины СЗО РАМН Санкт-Петербург, Россия

Введение. Изучение S.nigra необходимо, прежде всего, для поиска способов лечения болезни Паркинсона, поскольку уменьшение числа нейронов, содержащих дофамин, именно в данной структуре критично для течения и возникновения симптомов заболевания.

Цель. В данном исследовании рассматривалось содержание и характеристика расположения клеток, содержащих тирозингидроксилазу (ТГ), и клеток, содержащих нейромеланин.

Материалы и методы. Использовался метод непрямой иммуногистохимии. Материалом были препараты мозга человека и крыс двух линий: окрашенных и альбиносов (Wistar).

Результаты. Исследование показало, что в S.nigra существуют клетки, где присутствуют оба белка, но в то же время выявились клетки, где есть только один белок - либо нейромеланин, либо ТГ. В пределах pars compacta практически все нейроны содержат ТГ. Почему в некоторых нейронах белок не определяется, остается непонятным. При окрашивании нейроны выявляются полностью, включая отростки, что означает, что ТГ распределена по всему объемуклетки. Что именно происходит и в каких участках - синтез или транспорт фермента

– с помощью данных методов определить невозможно.

Известно, что содержание нейромеланина не зависит от наличия альбинизма. Однако, у имеющих окраску животных и у крыс-альбиносов, клетки, содержащие нейромеланин в S.nigra не наблюдаются. У человека часть нейронов, содержащих нейромеланин, дают интенсивную реакцию на ТГ.

Выводы. Таким образом, дофаминергические нейроны S.nigra характеризуются морфологической гетерогенностью по признакам наличия нейромеланина и ТГ, что вероятно свидетельствует об их различном функциональном состоянии.

М.А. Гнеушева, М.З. Гонгорова ГЕНОТИПИРОВАНИЕ ШТАММОВ МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЕЗА

(научный руководитель – к.м.н., доц. М.В. Бадлеева)

Бурятский государственный университет Улан-Удэ, Россия

Введение. Туберкулез является одной из глобальных проблем современного здравоохранения. Ежегодно почти у 8 миллионов человек развивается активный процесс, и около 3 миллионов человек умирает от этой болезни. Среди причин такой ситуации ведущую роль играет молекулярно-генетическая характеристика штаммов микобактерий туберкулеза (МБТ), формирование лекарственно-устойчивых форм.

Рядом исследований, проведенных в различных регионах мира, в том числе и на некоторых территориях России, показано распространение

возбудителя «пекинского» генотипа, который существенно отличается от других штаммов МБТ более выраженной патогенностью. Выявлена способность МБТ Bеijing семейства вызывать диссеминацию и генерализацию процесса, что приводит к утяжелению течения заболевания, частым случаям внелегочных форм туберкулеза, усилению лихорадочного синдрома в ответ на лекарственную терапию. Пекинский генотип МВТ обладает также высоким уровнем антибиотикорезистентности к основным противотуберкулезным препаратам.

Цель. Идентификация микобактерий туберкулеза, циркулирующей на территории Республики Бурятия, молекулярно-генетическими методами.

Материалы и методы. на базе Института эпидемиологии и микробиологии Научного центра проблем здоровья семьи и репродукции человека СО РАМН у 30 штаммов микобактерий, выделенных у больных туберкулезом Республики Бурятия, были выделены ДНК и проведено MIRU-VNTR типирование. Принадлежность исследованных MIRU-VNTR паттернов к известным семействам туберкулезных штаммов определяли по алгоритмам предложенным S. Ferdinand и др. (2004) и S.Y. Коvа1еv и др. (2005) для выделения уральского генотипа.

Результаты. Предварительные результаты свидетельствуют о доминировании Bеijing семейства среди исследуемых культур (41,3±0,03%). Второй по значимости определялся Латино-Американский генотип (15,9±0,03%). Остальные представители семейств с незначительным колебанием распределись между семействами Наагlеm, Т, X и Uгаl.

Выводы. Для более детальных выводов и разработки эффективных мер по контролю заболеваемости туберкулезом требуются дальнейшие перспективные исследования в данном направлении.

139

Молекулярная биология и медицина

Е.С. Иващенко, Е.С. Глинская, М.А. Худякова, Н.Н. Трубникова, О.Е. Полулях, Р.А. Джоджуа ЧАСТОТА МИКРОХИМЕРИЗМА ПРИ НЕКОТОРЫХ СИСТЕМНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ

СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ

(научный руководитель − д.м.н., проф. А.М. Гнилорыбов)

Национальный медицинский университет им. М. Горького Донецк, Украина

Введение. «Микрохимеризм» − наличие небольшого количества (около 1:106) генетически чужеродных клеток в организме хозяина, способных к дифференцировке и персистенции. Предполагается, что микрохимеризм − важная причина системных аутоиммунных заболеваний.

Цель. изучить частоту феномена микрохимеризма и его влияние на клиническое течение некоторых системных заболеваний.

Материал и методы. Исследование проведено у 90 больных женщин (36 − с ревматоидным артритом (РА), 24 − системной красной волчанкой (СКВ), 9 − системной склеродермией, 11 − дермато-/полимиозитом (ДМ/ПМ), 10 − серонегативным спондилитом). Контроль составили 35 женщин. Микрохимеризм выявляли обнаружением Y- хромосомы в мононуклеарах методом ПЦР.

Результаты. Микрохимеризм выявлен при ДМ/ПМ и СКВ. Частота микрохимеризма в крови была выше при ДМ/ПМ, чем при СКВ (18,2% против 8,3%). Однако при СКВ с микрохимеризмом аутоиммунные феномены были более выражены. При СКВ уровень химерных клеток составил 0,075 нг/мкл, при ДМ/ПМ − 0,006 нг/мкл. Установлена связь микрохимеризма с системностью поражения и гиперпродукцией фактора некроза опухолиальфа (ФНО)(1653 нг/мл против 989 нг/мл у больных без выявленного микрохимеризма, p<0,01).

Выводы. При ДМ/ПМ и СКВ у пациенток установлено наличие микрохимеризма и продемонстрирована его связь с системностью поражения. Показано возможное значение гиперпродукции ФНО в развитии микрохимеризма.

А.М. Колебцев1, О.А. Каткова-Жукоцкая2 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДА ПРИЖИЗНЕННОЙ КОМПЬЮТЕРНОЙ

МОРФОДЕНСИТОМЕТРИИ В ОБЪЕКТИВИЗАЦИИ ОЦЕНКИ ВОЗДЕЙСТВИЯ НАНОМАТЕРИАЛОВ НА КЛЕТКИ КРОВИ

(научный руководитель - д.м.н., проф. А.В. Жукоцкий)

1Российская медицинская академия последипломного образования , 2Федеральный научно-клинический центр детской гематологии, онкологии и иммунологии Москва, Россия

Введение. На сегодня выполнены лишь крайне ограниченные исследования, устанавливающие взаимосвязь таких свойств наночастиц (НЧ) как размер, форма и доза воздействия на биологические объекты. Отсутствие необходимых экспериментальных данных не позволяет установить единую совокупность параметров, определяющих токсикологические свойства различных НЧ, что затрудняет своевременную оценку их потенциального риска для здоровья населения.

Материалы и методы. Изучались эритроциты периферической крови здоровых людей, полученные стандартным методом. Нами на основе метода компьютерной морфоденситометрии (Жукоцкий А.В., 1992, Патент на изобретение № 2295297 «Способ исследования и диагностики состояния биологического объекта». Автор: Жукоцкий А.В., 2003) разработан экспресс-метод прижизненной оценки токсичности наноматериалов. Данная биотехнология позволяет проводить экспресс-анализ живых клеток и субклеточных структур (ядро, биологическая мембрана, митохондрии in vitro). Характеристические особенности технологии: экспресс-оценка воздействия НЧ, работа в режиме «living cells’», неинвазивность, стандартизированность, использование штатных в клинической лабораторной диагностике реактивов и оборудования.

Результаты. Показано снижение информативных параметров морфо-функционального состояния живых клеток крови (эритроцитов периферической крови) при воздействии НЧ по сравнению с контролем (p<0,01), выявлен ярко выраженный биологический размерный эффект (эффект снижения информативных параметров при воздействии частиц вольфрама меньшего (15 нм) размера выражен сильнее (p<0,05), чем вызванный частицами большего размера (60 нм и 1200 нм)).

Выводы. На основе метод цитофизиологической компьютерной морфоденситометрии возможно проведение экспресс-оценки токсичности НЧ.

.

140