
Применяемые для биосинтеза пит
.docxСамым достойным источником углерода явл глюкоза. В сухом веществе должно быть не менее 97,5% редуцирующих веществ. К другим источникам углерода относится сахароза (свекловичный или тростниковый сахар содержит не менее 99% сахарозы). Лактоза получается из молочной сыворотки. Содержит......% .......... и около 3% белка. Крахмал картофельный или кукурузный, он под действием ферментов гидролизуется до глюкозы. Гидрол- отход кукурузно-паточного производства, представляет собой густой темный сироп с запахом, содерж до 50% сахаров. Меласса- отход производства сахара, содерж 40-50% сахарозы, а также аминокислоты и витамины гр В. Кукурузная мука- 67-70% крахмала, фосфор, калий, магний. Пшеничные отруби- отход мукомольного производства, содерж 16-20% крахмала, 10-12% белков, ........ Свекловичный жом- отход сахарного производства, содерж пектины, белки. Гидролизаты древесины, Торф, метиловый, этиловый спирт, жиры, масла. На биосинтез существенно влияет наличие в среде фосфора. Используют одно/двузамещенные фосфаты натрия и калия. ..........…… Кроме того фосфор позволяет посредством его изменения концентрации в среде, регулировать активность ферментных систем. Оптимальная концентрация в среде фосфора является......... и зависит от состава сред и условий культивирования. При подборе компонентов пит среды учитывают не только минеральные соединения фосфора, но и органические соединения в кукурузном экстракте, соевой муке и др. Пит среды обязательно должны содержать макро-/микроэлементы, которые входят в состав активных центров ферментов, обеспечивающих обмен веществ микроорганизмов, активирующих процессы дыхания, окислительно восстановительные р-ции и др. Наибольшее влияние оказывают ионы железа, марганца, кобальта. Повышение их концентрации может оказывать ингибирующее действие. Поэтому микроорганизмы нуждаются в микродозах. В качестве источников используют сульфат магния, с. цинка, с. калия, с. магния, хлорид калия и натрия. При биосинтезе в ферментаторе образуется значительное количество пены. Она не желательна, тк может явиться источником посторонней микрофлоры. Для ее устранения используют различные жиры и масла(соевое, льняное, подсолнечное, пальмовое, а так же лярд). Оптимальная пит среда для каждого микроорганизма подбирается путем длительного многостадийного эксперимента. В промышленных условиях пит среды готовят в отдельных цехах. Их готовят в емкостях снабженных мешалками. Компоненты пит сред загрязняют предварительно путем растворения сахаров и солей и тщательного суспензирования нерастворимых компонентов. При необходимости компоненты подвергаются дополнительной обработке. Крахмал подвергают кристаллизации, кукурузный экстракт кипятят с .......... для нейтрализации, содержащихся в нем неорг и органических кислот. Муку предварительно заваривают и тщательно перемешивают - без комков. Растворы из сахаров рекомендуется готовить и стерилизовать отдельно и смешивать с основной средой только в ферментаторе. Для ускорения этих процессов их проводят в отдельных небольших аппаратах, а затем раствор смешивают в реакторе с паровым барботером. Для завершения ................... и суспензирования ........... концентрат среды не нагревают острым паром темпер 70-80С. При такой температуре не начинается разложение термолобильных компонентов среды.
Тщательное гомогенезация твердых компонентов, необходимое условие успешной стерилизации пит среды. В твердых комочках, медленно прогревающихся, длительность выдержки бывает меньше расчетной и в них может сохраняться посторонняя микрофлора, способная инфецировать культуральную жидкость. Поэтому реакторы должны быть снабжены мощными мешалками и отражательными перегородками, не допускающими вращение жидкости в аппарате.
Приготовленную пит среду стерилизуют либо непосредственно в аппарате, если емкость не превышает ….м3, либо в установке непрерывной стерилизации (УНС).
При стерилизации пит среды непосредственно в аппарате, пит среда стерилизуется острым и глухим паром. Острый пар подается в аппарат, глухой – в рубашку аппарата.
Подача острого пара приводит к образованию конденсата, поэтому следует заранее учитывать разбавление среды конденсатом и вносить изменения в расчет объема пит среды.
Среду нагревают до температуры стерилизации 120-130С и выдерживают при этой температуре 20-40 мин. Такая длительная термическая обработка приводит к определенным химическим изменениям в составе пит среды.
Некоторые нестойкие …….. температур соединения ………, что приводит к потере необходимых пит веществ.
Другие соединения могут вступать во взаимодействие между собой с образованием продуктов, ингибирующих рост микроорганизмов. По окончании стерилизации пит среду охлаждают подачей холодной воды в рубашку или змеевики.
Непрерывная стерилизация
При этом методе длительность выдержки среды при высокой температуре меньше, чем при периодич.стерилизации, что обеспечивает лучшее сохранение термолабильных компонентов среды.
Сам процесс состоит из следующих стадий:
Пит среда подается насосом в нагреватель, затем в выдерживатель, где происходит стерилизация среды. Из выдерживателя пит среда поступает в теплообменник, где охлаждается и поступает в ……………….. под давлением стерильного воздуха.