Глава 3. Биологически активные соединения травы кипрея узколистного.

Цель: Идентифицировать биологически активные соединения травы кипрея узколистного.

КАЧЕСТВЕННЫЕ РЕАКЦИИ:

3.1. Методика хроматографического определения аскорбиновой кис­лоты в траве кипрея узколистого .В ступке измельчают 0,5 г травы кипрея, заливают 5 мл воды, перемешивают, остав­ляют на 15 мин и фильтруют. Полученное извлечение наносят ка­пилляром на пластинку (один капилляр), рядом как свидетель на­носят чистую аскорбиновую кислоту; пластинку помещают в хрома-тографическуго камеру с системой растворителей этилацетат — ледяная уксусная кислота (80 : 20). Хроматографирование ведут ~ 20 мин (пробег растворителя ^13 см), после чего хроматограмму высушивают на воздухе.

Хроматограмму обрабатывают 0,04 % (или 0,001 н.) раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолятом натрия в воде. Аскорбиновая кис­лота обнаруживается в виде белого пятна на розовом фоне.

Вывод:аскорбиновая кислота обнаружена.

3.2.Методика хроматографического определения каротиноидов в траве кипрея. 1 г измельченных плодов кипрея заливают 5 мл хлороформа в колбе вместимостью 25 мл, экстрагируют 1,5 ч, после чего фильтруют л полученное извлече­ние наносят капилляром на пластинку, рядом наносят свидетель — р-каротип. Пластинку помещают в камеру с системой растворите­лей цпклогексан — эфир (80 : 20). Хроматографирование ведут ^ 20 мин (пробег растворителя 13 см). После этого хромато­грамму высушивают на воздухе.

Затем хроматограмму обрабатывают 10%-ным раствором фосфор-номолибденовой кислоты в этиловом спирте. После прогревания пластинки при температуре 60—80 "С каротиноиды проявляются в виде пятен синего цвета на желто-зеленом фоне.

Вывод: каротиноиды обнаружены.

3.3.ФЛАВОНОИДЫ

Хроматограф и ческое определение. На круг­лый диск хроматографической бумаги на расстоянии 0,5 см от центра наносят исследуемые извлечения травы гречихи, бутонов софоры, травы копеечника желтеющего и в качестве «свидетелей» — спирто­вые растворы рутина ч кверцетина. Диаметр пятна не должен пре­вышать 5 мм. В центр диска вводят фитиль из хроматографической бумаги.

Вывод: флавоноиды обнаружены. (хроматограмма прилогается).

3.4.Дубильные вещества в растительном сырье определяют качест­венными реакциями, которые можно подразделить на две группы: реакции осаждения и Цветные реакции. Для проведения качествен­ных реакций из растительного сырья готовят водное извлечение.

Методики качественного определения. Приготовление извлече­ния. 1 г измельченного растительного сырья заливают 100 мл во­ды. Нагревают на водяной бане 20—30 мин, процеживают через вату и полученное извлечение используют для проведения качест­венных реакций.

Качественные реакции извлечения, К 2—3 мл извлечения добавляют по каплям 1 %-ный раствор желати­ны. Появляется муть, исчезающая при добавлении избытка жела­тины .

Вывод: Дубильные вещества обнаружены.

3.5. АЛКАЛОИДЫ Методики качественного анализа. Приготовление из­влечения из растительного сырья, а) I г измель­ченного растительного сырья помещают в колбу вместимостью 100 мл, заливают 25 мл 1%-ной HCJ и нагревают на кипящей водя­ной бане в течение 5 мин. После охлаждении извлечение фильтруют через бумажный фильтр (извлечение А).

б) 2 г измельченного растительного сырья помещают в колбу вместимостью 100 мл, добавляют 1 мл 10%-ного раствора аммиака и

20 мл хлороформа и оставляют на 1 ч при периодическом перемешивании. Хлоро­формное извлечение отфильтровывают че­рез вату в делительную воронку вмести­мостью 100 мл и алкалоиды извлекают 15 мл 1 %-ной НС! (извлечение Б).

Вывод:алкалоиды обнаружены.