- •Общая микробиология
- •1. Предмет, задачи, разделы микробиологии, ее связь с другими науками.
- •2. Основные этапы развития микробиологии.
- •3. Классификация микроорганизмов. Различия между эукариотами, прокариотами и вирусами.
- •4. Классификация бактерий. Принципы современной систематики и номенклатуры, основные таксономические единицы. Понятие о виде, варианте, культуре, популяции, штамме.
- •5. Методы микроскопии. Микроскопический метод диагностики инфекционных заболеваний.
- •6. Методы окраски микробов и их отдельных структур.
- •7. Морфология и химический состав бактерий. Протопласты. L – формы бактерий.
- •8. Ультраструктура бактерий.
- •9. Спорообразование у бактерий. Патогенные спорообразующие микробы.
- •10. Капсулы у бактерий. Методы их обнаружения.
- •11. Жгутики и включения у бактерий. Методы их обнаружения.
- •14. Рост и размножение бактерий. Кинетика размножения бактериальной популяции.
- •15. Морфология и ультраструктура риккетсий. Морфология и ультраструктура хламидий. Патогенные виды.
- •16. Морфология и ультраструктура спирохет. Классификация, патогенные виды. Методы выделения.
- •17. Морфология и ультраструктура микоплазм. Патогенные для человека виды.
- •18. Систематика и номенклатура вирусов. Принципы современной классификации вирусов.
- •19. Эволюция и происхождение вирусов. Основные отличия вирусов от бактерий.
- •20. Морфология, ультраструктура и химический состав вирусов. Функции основных химических компонентов вируса.
- •21. Репродукция вирусов. Основные фазы репродукции вирусов. Методы индикации вирусов в исследуемом материале.
- •22. Вирусологический метод диагностики. Методы культивирования вирусов.
- •23. Культуры клеток. Классификация клеточных культур. Питательные среды для культур клеток. Методы индикации вирусов в культуре клеток.
- •24. Морфология, ультраструктура и химический состав фагов. Этапы репродукции фагов. Различия между вирулентными и умеренными фагами.
- •25. Распространение фагов в природе. Методы обнаружения и получения фагов. Практическое использование фагов.
- •26. Бактериологический метод диагностики инфекционных заболеваний.
- •27. Питательные среды, их классификация. Требования, предъявляемые к питательным средам.
- •28. Ферменты бактерий, их классификация. Принципы конструирования питательных сред для изучения ферментов бактерий.
- •29. Основные принципы культивирования бактерий. Факторы, влияющие на рост и размножение бактерий. Культуральные свойства бактерий.
- •30. Принципы и методы выделения чистых культур аэробных и анаэробных бактерий.
- •31. Микрофлора почвы, воды, воздуха. Патогенные виды, сохраняющиеся во внешней среде и передающиеся через почву, воду, пищевые продукты, воздух.
- •32. Санитарно – показательные микроорганизмы. Коли – титр, коли – индекс, методы определения.
- •34. Взаимоотношения между микроорганизмами в ассоциациях. Микробы – антагонисты, их использование в производстве антибиотиков и других лечебных препаратов.
- •35. Влияние на микробы физических, химических и биологических факторов.
- •36. Стерилизация и дезинфекция. Методы стерилизации питательных сред и лабораторной посуды.
- •38. Формы и механизмы наследственной изменчивости микроорганизмов. Мутации, репарации, их механизмы.
- •43. Генетика вирусов. Внутривидовой и межвидовой обмен генетическим материалом.
- •44. Основные группы антимикробных химиопрепаратов, применяемых в терапии и профилактики инфекционных болезней.
- •45. Антибиотики. Классификация. Механизмы действия антибактериальных препаратов на микробы.
6. Методы окраски микробов и их отдельных структур.
Методы окраски. Окраску мазка производят простыми или сложными методами. Простые заключаются в окраске препарата одним красителем; сложные методы (по Граму, Цилю — Нильсену и др.) включают последовательное использование нескольких красителей и имеют дифференциально-диагностическое значение. Отношение микроорганизмов к красителям расценивают как тинкториальные свойства. Существуют специальные методы окраски, которые используют для выявления жгутиков, клеточной стенки, нуклеоида и разных цитоплазматических включений.
При простых методах мазок окрашивают каким-либо одним красителем, используя красители анилинового ряда (основные или кислые). Если красящий ион (хромофор) — катион, то краситель обладает основными свойствами, если хромофор - анион, то краситель имеет кислые свойства. Кислые красители — эритрозин, кислый фуксин, эозин. Основные красители — генциановый фиолетовый, кристаллический фиолетовый, метиленовый синий, основной фуксин. Преимущественно для окраски микроорганизмов используют основные красители, которые более интенсивно связываются кислыми компонентами клетки. Из сухих красителей, продающихся в виде порошков, готовят насыщенные спиртовые растворы, а из них — водно-спиртовые, которые и служат для окрашивания микробных клеток. Микроорганизмы окрашивают, наливая краситель на поверхность мазка на определенное время. Окраску основным фуксином ведут в течение 2 мин, метиленовым синим — 5—7 мин. Затем мазок промывают водой до тех пор, пока стекающие струи воды не станут бесцветными, высушивают осторожным промоканием фильтровальной бумагой и микроскопируют в иммерсионной системе. Если мазок правильно окрашен и промыт, то поле зрения совершенно прозрачно, а клетки интенсивно окрашены.
Сложные методы окраски применяют для изучения структуры клетки и дифференциации микроорганизмов. Окрашенные мазки микроскопируют в иммерсионной системе. Последовательно нанести на препарат определенные красители, различающиеся по химическому составу и цвету, протравы, спирты, кислоту и др.
7. Морфология и химический состав бактерий. Протопласты. L – формы бактерий.
Бактериальная клетка состоит из клеточной стенки, цитоплазматической мембраны, цитоплазмы с включениями и ядра, называемого нуклеоидом. Имеются дополнительные структуры: капсула, микрокапсула, слизь, жгутики, пили. Некоторые бактерии в неблагоприятных условиях способны образовывать споры.
Клеточная стенка. В клеточной стенке грамположительных бактерий содержится небольшое количество полисахаридов, липидов, белков. Основным компонентом толстой клеточной стенки этих бактерий является многослойный пептидогликан (муреин, мукопептид), составляющий 40-90 % массы клеточной стенки. С пептидогликаном клеточной стенки грамположительных бактерий ковалентно связаны тейхоевые кислоты (от греч. teichos — стенка).
В состав клеточной стенки грамотрицательных бактерий входит наружная мембрана, связанная посредством липопротеина с подлежащим слоем пептидогликана. На ультратонких срезах бактерий наружная мембрана имеет вид волнообразной трехслойной структуры, сходной с внутренней мембраной, которую называют цитоплазматической. Основным компонентом этих мембран является бимолекулярный (двойной) слой липидов. Внутренний слой наружной мембраны представлен фосфолипидами, а в наружном слое расположен липополисахарид.
Функции клеточной стенки: 1. Обусловливает форму клетки. 2. Защищает клетку от механических повреждений извне и выдерживает значительное внутреннее давление. 3. Обладает свойством полупроницаемости, поэтому через нее избирательно проникают из среды питательные вещества. 4. Несет на своей поверхности рецепторы для бактериофагов и различных химических веществ.
Метод выявления клеточной стенки - электронная микроскопия, плазмолиз.
Протопласты – клетки микроорганизмов, полностью утратившие клеточную стенку. Могут образовываться в результате мутаций, автолитических процессов, действия некоторых антибиотиков (лизоцима, пенициллина). Микоплазмы и L–формы бактерий представляют собой протопласты. Их получают и искусственно для исследовательских целей.
L-формы бактерий, их медицинское значение L-формы - это бактерии, полностью или частично лишенные клеточной стенки (протопласт +/- остаток клеточной стенки), поэтому имеют своеобразную морфологию в виде крупных и мелких сферических клеток. Способны к размножению.
Цитоплазматическая мембрана располагается под клеточной стенкой (между ними - периплазматическое пространство). По строению является сложным липидобелковым комплексом, таким же, как у клеток эукариот (универсальная мембрана).
Функции цитоплазматической мембраны: 1. Является основным осмотическим и онкотическим барьером. 2. Участвует в энергетическом метаболизме и в активном транспорте питательных веществ в клетку, так как является местом локализации пермеаз и ферментов окислительного фосфорилирования. 3. Участвует в процессах дыхания и деления. 4. Участвует в синтезе компонентов клеточной клетки (пептидогликана). 5. Участвует в выделении из клетки токсинов и ферментов.
Цитоплазматическая мембрана выявляется только при электронной микроскопии.