- •Общая микробиология
- •1. Предмет, задачи, разделы микробиологии, ее связь с другими науками.
- •2. Основные этапы развития микробиологии.
- •3. Классификация микроорганизмов. Различия между эукариотами, прокариотами и вирусами.
- •4. Классификация бактерий. Принципы современной систематики и номенклатуры, основные таксономические единицы. Понятие о виде, варианте, культуре, популяции, штамме.
- •5. Методы микроскопии. Микроскопический метод диагностики инфекционных заболеваний.
- •6. Методы окраски микробов и их отдельных структур.
- •7. Морфология и химический состав бактерий. Протопласты. L – формы бактерий.
- •8. Ультраструктура бактерий.
- •9. Спорообразование у бактерий. Патогенные спорообразующие микробы.
- •10. Капсулы у бактерий. Методы их обнаружения.
- •11. Жгутики и включения у бактерий. Методы их обнаружения.
- •14. Рост и размножение бактерий. Кинетика размножения бактериальной популяции.
- •15. Морфология и ультраструктура риккетсий. Морфология и ультраструктура хламидий. Патогенные виды.
- •16. Морфология и ультраструктура спирохет. Классификация, патогенные виды. Методы выделения.
- •17. Морфология и ультраструктура микоплазм. Патогенные для человека виды.
- •18. Систематика и номенклатура вирусов. Принципы современной классификации вирусов.
- •19. Эволюция и происхождение вирусов. Основные отличия вирусов от бактерий.
- •20. Морфология, ультраструктура и химический состав вирусов. Функции основных химических компонентов вируса.
- •21. Репродукция вирусов. Основные фазы репродукции вирусов. Методы индикации вирусов в исследуемом материале.
- •22. Вирусологический метод диагностики. Методы культивирования вирусов.
- •23. Культуры клеток. Классификация клеточных культур. Питательные среды для культур клеток. Методы индикации вирусов в культуре клеток.
- •24. Морфология, ультраструктура и химический состав фагов. Этапы репродукции фагов. Различия между вирулентными и умеренными фагами.
- •25. Распространение фагов в природе. Методы обнаружения и получения фагов. Практическое использование фагов.
- •26. Бактериологический метод диагностики инфекционных заболеваний.
- •27. Питательные среды, их классификация. Требования, предъявляемые к питательным средам.
- •28. Ферменты бактерий, их классификация. Принципы конструирования питательных сред для изучения ферментов бактерий.
- •29. Основные принципы культивирования бактерий. Факторы, влияющие на рост и размножение бактерий. Культуральные свойства бактерий.
- •30. Принципы и методы выделения чистых культур аэробных и анаэробных бактерий.
- •31. Микрофлора почвы, воды, воздуха. Патогенные виды, сохраняющиеся во внешней среде и передающиеся через почву, воду, пищевые продукты, воздух.
- •32. Санитарно – показательные микроорганизмы. Коли – титр, коли – индекс, методы определения.
- •34. Взаимоотношения между микроорганизмами в ассоциациях. Микробы – антагонисты, их использование в производстве антибиотиков и других лечебных препаратов.
- •35. Влияние на микробы физических, химических и биологических факторов.
- •36. Стерилизация и дезинфекция. Методы стерилизации питательных сред и лабораторной посуды.
- •38. Формы и механизмы наследственной изменчивости микроорганизмов. Мутации, репарации, их механизмы.
- •43. Генетика вирусов. Внутривидовой и межвидовой обмен генетическим материалом.
- •44. Основные группы антимикробных химиопрепаратов, применяемых в терапии и профилактики инфекционных болезней.
- •45. Антибиотики. Классификация. Механизмы действия антибактериальных препаратов на микробы.
21. Репродукция вирусов. Основные фазы репродукции вирусов. Методы индикации вирусов в исследуемом материале.
Вирусы не способны размножаться на питательных средах - это строгие внутриклеточные паразиты. Более того, в отличие от риккетсий и хламидий, вирусы в клетке хозяина не растут и не размножаются путем деления. Составные части вируса - нуклеиновые кислоты и белковые молекулы синтезируются в клетке хозяина раздельно, в разных частях клетки - в ядре и в цитоплазме. При этом клеточные белоксинтезирующие системы подчиняются вирусному геному, его НК.
Репродукция вируса в клетке происходит в несколько фаз:
Первая фаза - адсорбция вируса на поверхности клетки, чувствительной к данному вирусу.
Вторая фаза - проникновение вируса в клетку хозяина путем виропексиса.
Третья фаза - «раздевание» вирионов, освобождение нуклеиновой кислоты вируса от суперкапсида и капсида. У ряда вирусов проникновение нуклеиновой кислоты в клетку происходит путем слияния оболочки вириона и клетки-хозяина. В этом случае вторая и третья фазы объединяются в одну.
В зависимости от типа нуклеиновой кислоты этот процесс совершается следующим образом.
ДНК-содержащие (ДНК —> иРНК —>белок):
Репродукция происходит в ядре: аденовирусы, герпес, паповавирусы. Используют ДНК-зависимую РНК - полимеразу клетки.
Репродукция происходит в цитоплазме: вирусы имеют свою ДНК-зависимую РНК полимеразу.
РНК-содержащие вирусы:
Рибовирусы с позитивным геномом (плюс-нитиевые): пикорна-, тога-, коронавирусы. Транскрипции нет.
РНК —>белок
Рибовирусы с негативным геномом (минус- нитевые): грипп, корь, паротит, орто-, парамиксовирусы.
(-)РНК —> иРНК —> белок (иРНК комплементарная (-)РНК). Этот процесс идет при участии специального вирусного фермента - вирионная РНК-зависимая PHK-полимераза ( в клетке такого фермента быть не может).
Ретровирусы
(-)РНК -> ДНК —> иРНК —>белок (и РНК гомологична РНК). В этом случае процесс образования ДНК на базе (-)РНК возможен при участии фермента - РНК-зависимой ДНК-полимеразы (обратной транскриптазы или ревертазы)
Четвертая фаза - синтез компонентов вириона. Нуклеиновая кислота вируса образуется путем репликации. На рибосомы клетки транслируется информация вирусной иРНК, и в них синтезируется вирус-специфический белок.
Пятая фаза - сборка вириона. Путем самосборки образуются нуклеокапсиды.
Шестая фаза - выход вирионов из клетки. Простые вирусы, например, вирус полиомиелита, при выходе из клетки разрушают ее. Сложноорганизованные вирусы, например, вирус гриппа, выходят из клетки путем почкования. Внешняя оболочка вируса (суперкапсид) формируется в процессе выхода вируса из клетки. Клетка при таком процессе на какое-то время остается живой.
Описанные типы взаимодействия вируса с клеткой называются продуктивными, так как приводят к продукции зрелых вирионов.
Иной путь - интегративный - заключается в том, что после проникновения вируса в клетку и "раздевания" вирусная нуклеиновая кислота интегрирует в клеточный геном, то есть встраивается в определенном месте в хромосому клетки и затем в виде так называемого прови-руса реплицируется вместе с ней. Для ДНК- и РНК-содержащих вирусов этот процесс совершается по-разному. В первом случае вирусная ДНК интегрирует в клеточный геном. В случае РНК-содержащих вирусов вначале происходит обратная транскрипция: на матрице вирусной РНК при участии фермента "обратной транскриптазы" образуется ДНК, которая встраивается в клеточный геном. Провирус несет дополнительную генетическую информацию, поэтому клетка приобретает новые свойства. Вирусы, способные осуществить такой тип взаимодействия с клеткой, называются интегративными. К интегративным вирусам относятся некоторые онкогенные вирусы, вирус гепатита В, вирус герпеса, вирус иммунодефицита человека, умеренные бактериофаги.
Кроме обычных вирусов, существуют прионы - белковые инфекционные частицы, не содержащие нуклеиновую кислоту. Они имеют вид фибрилл, размером до 200 нм. Вызывают у человека и у животных медленные инфекции с поражением мозга: болезнь Крейтцфельда-Якоба, куру, скрепи и другие.
Методы индикации вирусов в исследуемом материале.
О репродукции вирусов в культурах клеток судят по их цитопатическому действию (ЦПД), которое носит разный характер в зависимости от вида вируса, по бляшкообра- манию на клеточном монослое, покрытом тонким агаровым слоем, гемадсорбции эритроцитов и другим тестам.
Таким образом, индикация вирусов производится микроскопически по наличию ЦПД, бляшкообразованию на клеточном монослое, гемадсорбции эритроцитов, добавленных к клеточной культуре вируса, а также в реакции гемагглютинации с исследуемым вируссодержащим материалом. Реакцию гемагглютинации вызывают вирусы, содержащие в составе своего капсида или суперкапсида гемагглютинин.