Для заметок

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ №2 Дата ________________

ТЕМА: «ОТЧЕТ ПО МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИЙ, ВЫЗВАННЫХ ВИБРИОНАМИ, САЛЬМОНЕЛЛАМИ, ШИГЕЛЛАМИ, КЛЕБСИЕЛЛАМИ, ПРОТЕЕМ»

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

1. Определить уровень усвоения студентами пройденного материала.

Вопросы для письменного контроля:

1. Холерный вибрион: морфологические, тинкториальные, антигенные и биологические особенности. Отличия классического биовара от биовара Эль-Тор. Эпидемиология, патогенез, клиника и лабораторная диагностика холеры. Специфическая профилактика и лечение холеры.

2. Шигеллы: морфологические, тинкториальные и биологические особенности. Эпидемиология, патогенез, клиника, лабораторная диагностика, специфическая профилактика и лечение дизентерии.

3. Сальмонеллы: морфологические, тинкториальные, антигенные и биологические особенности. Классификация Кауфмана-Уайта. Эпидемиология, патогенез, клиника, лабораторная диагностика, специфическая профилактика и лечение брюшного тифа и паратифов; отличия ранней и поздней диагностики брюшного тифа; серодиагностика брюшного тифа. Эпидемиология, патогенез, клиника, лабораторная диагностика, специфическая профилактика и лечение сальмонеллезов.

4. Клебсиеллы: морфологические, тинкториальные и биологические особенности. Эпидемиология, патогенез, клиника, лабораторная диагностика, специфическая профилактика и лечение инфекций, вызванных клебсиеллами.

5. Протей: морфологические, тинкториальные и биологические особенности. Эпидемиология, патогенез, клиника, лабораторная диагностика, специфическая профилактика и лечение инфекций, вызванных протеем.

ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ № 3 ДАТА ________________

ТЕМА: ПАТОГЕННЫЕ АНАЭРОБЫ: КЛОСТРИДИИ – ВОЗБУДИТЕЛИ ГАЗОВОЙ ГАНГРЕНЫ, СТОЛБНЯКА, БОТУЛИЗМА. БАКТЕРОИДЫ.

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

1. Обсудить биологические свойства патогенных анаэробов: клостридий – возбудителей газовой гангрены, столбняка, ботулизма; бактероидов.

2. Разобрать общие принципы и методы лабораторной диагностики раневой анаэробной инфекции, столбняка, ботулизма и инфекций, вызываемых бактероидами.

3. Разобрать лечебно-профилактические препараты, используемые при анаэробных инфекциях.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА:

1. Просмотр и зарисовка в альбом готовых препаратов C.perfringens, C.tetani, C.botulinum (окраска по методу Ожешки).

C.perfringens C.tetani C.botulinum

2. Зарисовка в альбом изменений питательных сред (среда Китта-Тароцци, Вильсона-Блера, молоко, сахарный агар) при росте в них патогенных анаэробов.

среда Китта-Тароцци среда Китта-Тароцци молоко молоко

в исходном виде при росте анаэробов в исходном виде при росте анаэробов

среда Вильсона-Блера среда Вильсона-Блера сахарный агар сахарный агар

в исходном виде при росте анаэробов в исходном виде при росте анаэробов

3. Разбор препаратов для специфической профилактики и лечения анаэробных инфекций: сыворотка противогангренозная (анти-C.perfringens, анти-C.novyi, анти-C.septicum) поливалентная лошадиная; вакцины АКДС, АДС, АДС-М, ТАВte, иммуноглобулин противостолбнячный человека, сыворотка противостолбнячная лошадиная жидкая; трианатоксин (ботулинические анатоксины типа А, В, Е) адсорбированный, тетраанатоксин (ботулинические анатоксины типа А, В, Е и столбнячный анатоксин) адсорбированный, сыворотка противоботулиническая А, В, Е лошадиная жидкая.

ПОЯСНЕНИЯ К ЗАНЯТИЮ:

1. Анаэробная раневая инфекция (газовая гангрена)

1. Краткая характеристика инфекции. Основные клинические симптомы.

Анаэробная раневая инфекция – полимикробное заболевание в развитии, которого принимают участие несколько видов клостридий (C.perfringens, C.novyi (oedematiens), C.septicum, C.histolyticum, C.sordellii и др.), часто – в ассоциации с аэробными бактериями (стафилококками, стрептококками и др., легко инфицирующими раны). Газовая гангрена – субфасциальная анаэробная инфекция, сопровождающаяся некрозом мышечной ткани и выраженной интоксикацией организма. Кожные покровы серо-синего цвета. Рана резко болезненна, края её бледные, отечные, безжизненные, дно раны сухое. Окраска видимых в ране мышц напоминает вареное мясо. При надавливании на края раны из тканей выделяются пузырьки газа с неприятным сладковато-гнилостным запахом. Пальцами определяется типичная крепитация. Состояние больного быстро ухудшается, наступает шок.

2. Характеристика возбудителя:

Классификация

Клостридии относятся к 18 группе грамположительных образующих споры анаэробов, включены в род Clostridium. Возбудителями газовой гангрены являются несколько видов: C.perfringens, C.novyi (oedematiens), C.septicum, C.histolyticum, C.sordellii и др.

Морфологические и тинкториальные свойства

Все клостридии – возбудители анаэробной раневой инфекции – грамположительные палочки с центрально или субтерминально расположенными спорами. C.perfringens не имеет жгутиков, в организме человека и животных образует капсулу, которая утрачивается при пересевах на питательные среды. C.novyi – перитрих, капсулы не образует. C.septicum – полиморфна, встречаются нитевидные формы до 50 мкм в длину, перитрих, капсулы не образует. Остальные клостридии – возбудители анаэробной раневой инфекции – небольшие палочки, перитрихи.

Культуральные свойства

Культивируют клостридии в средах для анаэробных микроорганизмов (среда Китта-Тароцци, Вильсона-Блера, молоко, сахарно-кровяной агар, КАБ-среда, тиогликолевые среды). C.perfringens, C.histolyticum, C.sordellii могут расти в присутствии небольшого количества кислорода (умеренные облигатные анаэробы), а C.novyi и C.septicum не выносят даже малого количества кислорода (строгие облигатные анаэробы).

Биохимические свойства

C.perfringens сбраживает многие углеводы до кислоты и газа, разжижает желатину и свернутую сыворотку, при расщеплении белков выделяется H₂S и NH₃. C.novyi сбраживает небольшое количество углеводов, разжижает желатину, но не свернутый белок, не образует H₂S. C.septicum обладает выраженной сахаролитической активностью и разжижает желатину, разлагает белки с выделением H₂S и NH₃, индола не образует. C.histolyticum не ферментирует углеводы, но обладает выраженной протеолитической активностью, образуя большое количество H₂S. C.sordellii ферментирует некоторые углеводы, разжижает желатину, свернутую сыворотку, образует индол. Клостридии образуют ферменты патогенности: коллагеназа, желатиназа, гиалуронидаза, ДНК-аза, нейраминидаза, лецитиназа.

Токсигенные свойства

C.perfringens продуцирует целый ряд белковых экзотоксинов: мембранотоксины (гемолизины и лейкоцидин), цитотоксины, энтеротоксин. α-гемолизин (альфа-токсин или фосфолипаза С) относительно термолабилен, способен гидролизовать фосфолипиды мембран клеток (лецитин, сфингомиелин, фосфатидилсерин, фосфатидилинозитол и др.), вызывает лизис эритроцитов и некротические изменения в тканях. θ-гемолизин (тета-токсин) является термолабильным белком, способен реагировать с холестерином клеточных мембран, разрушая эритроциты, лейкоциты, эндотелиальные клетки, обеспечивая инвазию и участвуя в некрозе тканей; также воздействует на миокард и нарушает сердечную деятельность. β-токсин (бета-токсин) является белковым термолабильным токсином с некротическим действием. ε-токсин (эпсилон-токсин) – белковый токсин, обладающий нейротоксическим действием вследствие повышенной тропности к тканевым структурам мозга. Лейкоцидин снижает фагоцитарную активность и хемотаксическую подвижность лейкоцитов, в высоких дозах повреждает лейкоцитарные мембраны и вызывает лизис лейкоцитов. Серовары А,С и Д C.perfringens образуют энтеротоксин – термолабильный белок, прочно связанный с оболочкой микробной клетки, способный понижать потребление кислорода тканями и вызывающий развитие энтерита. C.novyi также продуцирует несколько токсинов. Действие α-токсина на ткани приводит к образованию отека, β-токсин обладает дермонекротической и гемолитической активностью. C.histolyticum выделяет α-токсин, оказывающий летальное и некротическое действие при прямом повреждении тканей, и гемолизин (ε-токсин).

Антигенные свойства

C.perfringens имеет 6 сероваров (A, B, C, D, E, F), а C.novyi - 3 серовара (А, В, С), которые отличаются друг от друга по антигенным свойствам вырабатываемых ими токсинов. C.septicum подразделяется на серовары по Н-антигену, вырабатываемые разными сероварами токсины не различаются между собой.

Резистентность

Споры клостридий отличаются большой устойчивостью к различным воздействиям. Споры C.perfringens погибают при кипячении лишь в течение 15-30 минут. Споры C.novyi кипячение выносят в течение 1-2 часов, а в окружающей среде сохраняются до 20-25 лет. Споры C.septicum менее устойчивы и при кипячении погибают в течение нескольких минут.

Патогенность для животных

Из экспериментальных животных восприимчивыми к C.perfringens являются морские свинки, кролики, мыши. C.perfringens патогенна для домашних животных: серовар В вызывает дизентерию у ягнят и других животных, серовар С – геморрагическую энтеротоксинемию у овец, коз, поросят, телят, серовар D – инфекционную энтеротоксемию у людей и животных, серовар Е – некротический энтерит у людей, энтеротоксемию у ягнят и телят. Серовары В и С C.novyi вызывают заболевание у животных. При подкожном введении кроликам, белым мышам, морским свинкам возникает студенистый, желеобразный отек, обычно без пузырьков газа.