Домашнее задание к занятию №13

1. Строение вирусов.

2. Методы лабораторной диагностики вирусных инфекций:

• Экспресс-методы

• Вирусологический метод

• Серологический метод

ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ № 14 Дата________________

TЕMA: Грипп, парагрипп, корь, РС-инфекция, паротит, риновирусная и аденовирусная инфекции, натуральная оспа.

Цель занятия:

1. Освоить методы диагностики респираторных вирусных инфекций;

2. Освоить вирусологическую диагностику гриппа;

3. Разбор биологических препаратов, используемых для профилактики, терапии и диагностики острых респираторных заболеваний.

Практическая работа.

1. Микроскопия:

Тельца Негри Культура тканей Культура тканей Гемадсорбция

(норма) (ЦПД)

2. Учет цветной пробы:

О К

Вывод: ____________________________________________________________

3. Постановка ориентировочной реакции гемагглютинации на стекле для обнаружения вируса в аллантоисной жидкости:

   1. 1 капля 5% взвеси бараньих (лучше куриных) эритроцитов + капля аллантоисной жидкости.

   2. Экспозиция 5 минут.

Вывод: ____________________________________________________________

4. Учет реакции торможения гемагглютинации (РТГА) с типовыми диагностическими сыворотками для определения типа вируса гриппа:

   1. Контроль вируса: 0,25 мл физ. р-ра + 0,25 мл вируссодержащей жидкости + 0,5 мл 1% взвеси эритроцитов;

   2. Контроль сыворотки: 0,25 мл физ. р-ра + 0,25 мл сыворотки + 0,5 мл 1% взвеси эритроцитов;

   3. Учет реакции после 30-40 мин инкубации при комнатной температуре.

«+» – гемагглютинация

« – » – торможение гемагглютинации

Вывод: ____________________________________________________________

5. Учет результатов РТГА для определения нарастания титра антител в парных сыворотках больного к гриппозным диагностикумам:

«+» – гемагглютинация

« – » – торможение гемагглютинации

Вывод: ____________________________________________________________

ПОЯСНЕНИЯ К ЗАНЯТИЮ:

Острые респираторные вирусные инфекции.

Под названием острые респира­торные вирусные инфекции объединяются грипп и большая группа болезней, ха­рактеризующихся преимущественным поражением дыхательных путей. К ним помимо гриппа относятся парагрипп, аденовирусная, риновирусная, респираторно-синцитиальная, коронавирусная и другие инфекции. Эти заболевания вызываются различными этиологическими агентами и широко распространены во всех странах мира. Взрослые люди в среднем в год болеет 2 раза гриппомили другими острыми респираторными заболеваниями, школьники – 3 раза, дети дошкольного возраста – 6 раз.

Семейство Orthomyxoviridae.

Грипп (Influenza, Grippus).

Грипп– острое респираторное заболевание вирусной этиологии, проте­кающее с явлениями общей интоксикации и поражением респираторного тракта.

1. Краткая характеристика инфекции. История вопроса.

До 1933 года возбудителем гриппа считалась гемофильная палочка Афанасьева-Пфейффера Haemophilus influensa. Достоверно вирусная природа гриппа установлена в 1933 году в Англии Смитом, Эндрюсом и Лейдлоу, выде­лившими специфический пневмотропный вирус из легких хомячков, за­раженных смывами из носоглотки больных гриппом, и обозначенный ими как вирус гриппа типа А – Myxovirus influenzaeA. В 1940 году Френсис и Мэджил открыли вирус гриппа типа В, а в 1947 году Тейлор выделил еще один новый вари­ант вируса гриппа – типа С (Эталон С/Тейлор/1233/47).

2. Характеристика вирусов гриппа.

2.1. Классификация.

Вирус гриппа является представителем рода Influenzavirus семейства Orthomyxoviridae группы Миксовирусов (myxum– слизистые). Имеет три серотипа – А, В и С. Тип А делится на подтипы и штаммы.

Номенклатура вируса включает тип, источник изоляции, место, номер, год изоляции, антигенная формула для типа А.

2.2. Морфология и химический состав.

Вирусы гриппа относятся к группе РНК-содержащих вирусов с размерами частиц 80-120 нм. Форма вируса чаще сферическая, но может быть и нитевидной. В центре вируса спиралевидный нуклеопротеид. РНК вирусов однонитчатая, состоит из 8-и самостоятельных отрезков. Это определяет высокую изменчивость вируса. Нуклеопротеид покрыт белковым капсидом и двуслойной липидной оболочкой – суперкапсидом, из которого торчат как шипы по 10 нм молекулы гемагглютининов и нейраминидаз. Известно 15 разновидностей гемагглютининов и 10 разновидностей нейраминидаз.

2.3. Антигенные свойства.

В составе вирусов гриппа присутству­ют различные антигены:

1. S-антиген (solution – растворимый), или внутренний нуклеокапсид, вклю­чает в себя рибонуклеиновую кислоту и вирусный белок, составляя 40%массы вириона. Отличается высокой стабильностью, общий для определенного типа вируса. Неинфекционный, неиммуногенный.

2. В наружной оболочке вириона содержится поверхност­ный V-антиген (viral – вирусный). В его составе гемагглютинин (антиген H) и нейраминидаза (антиген N). Определяет подтип и штамм вирусов гриппа типа А. Согласно современной номенклатуре вируса гриппа типа А, принятой ВОЗ в 1980 году, у вирусов гриппа, выделенных от человека, установлено наличие 4 подтипов антигена Н (Н0,H1,H2, Н3) и 2 подтипов антигена N (N1 и N2). Появился новый подтипH3N8 – вирус птичьего гриппа.

Вирусы гриппа типов В и С практически не изменяют своей антиген­ной структуры, тогда как вирус гриппа типа А быстро изменяется, обра­зуя новые подтипы и антигенные варианты. Антигенная структура виру­сов гриппа типа А претерпела значительные изменения.У вируса гриппа типа А выделяют два механизма изменения генетической структуры – антигенный шифт и антигенный дрейф. Первый вариант приводит к грубым изменениям в структуре гемагглютинина или нейраминидазы и обусловливает появ­ление новых подтипов вируса внутри типа А. Новые антигенные вариан­ты вируса вызывают более тяжелые по течению и более массовые по ха­рактеру распространения эпидемии гриппа. Их появление связывают с возможной циркуляцией вируса в межэпидемический период в организме животных (главным образом – свиней и кур) – реассортация вирусов гриппа птиц и человека (обмен генами). Антигенный дрейф приводит к менее значимым изменениям и определяет появление новых штаммов вируса.

2.4. Культивирование.

Вирусы гриппа накапливают на 5-7 дневном курином эмбрионе 36-48 часов или различных клеточных культурах – первичные культуры эмбриональных почечных клеток обезьян, человека, свиней и телят, куриные фибробласты (HeLa,KB, клетки сердца, кишечника и другие первичные диплоидные и гетероплоидные клетки к гриппу нечувствительны). Можно заражать новорожденных мышей и хомячков интраназально. У них развивается пневмония. Из легких получают взвесь вирусов.

2.5. Резистентность.

Вирусы гриппа обладают слабой устойчивостью к действию физиче­ских и химических факторов и разрушаются при комнатной температуре в течение нескольких часов, в то время как при низких температурах (от -25°С до -70°С) сохраняются несколько лет. Быстро погибают принагревании, высушивании, а также при воздействии небольших концент­раций хлора, озона, ультрафиолетовой радиации. Под воздействием УФО вирус сначала теряет инфекционность, затем – гемагглютинины, после чего – погибает.

2.6. Патогенность для животных.

Наиболее чувствительны к гриппу индюки и куры. Перелетные птицы являются основными распространителями вирусов птичьего гриппа. Хорошо известны подтипы H5N1 и H7N7. Из-за вспышки 2003 года, вызванной вирусом подтипа H7N7 в Голландии было уничтожено около 20 млн. кур. В 2003 году отмечено 11 случаев заболеваний человека, вызванных вирусом подтипа H7N7, из которых 8 закончились смертью пациентов.

1. Эпидемиология.

Источником гриппозной инфекции является бо­льной человек с явными и стертыми формами заболевания и, возможно, птицы. Путь переда­чи инфекции – воздушно-капельный. Возможен контактно бытовой путь передачи, отмеченный преимущественно при передаче птичьего гриппа. Максимальная заразительность наблюдается в первые дни болезни, когда при кашле и чихании с капельками слизи вирус выделяется во внешнюю среду. Выделение вируса при неосложненном течении гриппа заканчивается к 5-6-му дню от началазаболевания. В то же время при пневмонии, осложняющей течение грип­па, вирус обнаруживается в организме до 2-3 нед от начала заболевания.Повышение заболеваемости и вспышки гриппа наблюдаются в холод­ное время года. Эпидемии, вызываемые вирусом гриппа типа А, повторя­ются каждые 2-3 года и имеют взрывной характер (в течение 1-1,5 мес заболевает 20-50% населения). Эпидемии гриппа В возникают через 3-6 лет, распространяются медленнее, длятся 2-3 мес и поражают не бо­лее 25% населения.Ввиду того, что гриппом переболевает не все население одновременно и продолжительность иммунитета различная, периодически образовыва­ется значительная неиммунная прослойка, особенно восприимчивая к новым заносным вариантам вируса. Местные штаммы вирусов гриппа чаще обусловливают лишь сезонный подъем заболеваемости. Грипп С не дает эпидемических вспышек, заболевание носит лишь спорадический характер.

3. Патогенез.

Вирус гриппа избирательно поражает эпителий респира­торного тракта (преимущественно трахеи). Проникновение в клетки происходит при участии гемагглютининов и нейраминидазы. Гемагглютинины прикрепляются к рецепторам α2,6 клеток слизистых оболочек (и эритроцитов), а нейраминидаза разрушает сиалосодержащие белки мембраны, формируя в ней отверстие, через которое и проходит вирус. Этот же механизм приводит и к выходу вируса из клетки. Размножаясь в клетках ци­линдрического эпителия, вызывает их дегенеративные изменения, ис­пользуя содержимое эпителиальных клеток для построения новых вирусных частиц. Массированный выход зрелых вирусных частиц неред­ко сопровождается гибелью эпителиальных клеток, а некроз эпителия и связанное с этим разрушение естественного защитного барьера приводят к вирусемии. Токсины вируса гриппа вместе с продуктами распада эпите­лиальных клеток оказывают токсическое действие на сердечно-сосуди­стую, нервную (центральную и вегетативную) и другие системы организ­ма. Гриппозная инфекция приводит к подавлению иммунитета, а при внедрении вторичной бактериальной флоры через некротизированную поверхность слизистой оболочки дыхательных путей могут возникнуть различные осложнения.

В патогенезе гриппа выделяют пять основных фаз патологического процесса:

1. Репродукция вируса в клетках дыхательных путей;

2. Вирусемия, токсинемия, токсические и токсико-аллергические реакции;

3. Поражение дыхательных путей с преимущественной локализацией процесса в каком-либо отделе дыхательного тракта;

4. Возможные бактериальные осложнения со стороны дыхательных путей и других систем организма;

5. Обратное развитие патологического процесса.

В основе поражения различных органов и систем при гриппе ведущую роль играют циркуляторные расстройства, причиной которых являются нарушения тонуса, эластичности и проницаемости сосудистой стенки, прежде всего капилляров, развивающиеся на фоне эндогенной интоксикации продуктами распада пораженных вирусом клеток. Повышение проницаемости сосудистой стенки приводит к нарушению микроциркуляции и возникновению геморраги­ческого синдрома (носовые кровотечения, кровохарканья, а при тяжелом течении – кровоизлияния в вещество и оболочки головного мозга, в аль­веолы, что проявляется синдромом инфекционно-токсической энцефа­лопатии или геморрагическим токсическим отеком легких).

Грипп обусловливает снижение иммунологической реактивности. Это приводит к обострению различных хронических заболеваний, а также к возникновению вторичных бактериальных осложнений. Наиболее частое и серьезное осложнение гриппа – острая пневмония. В настоящее времяобщепризнано, что пневмония при гриппе носит смешанный вирусно-бактериальный характер вне зависимости от сроков ее возникновения.

Воспалительный процесс в легких может быть обусловлен присоеди­нением различной бактериальной флоры (чаще пневмококками), но в последние годы все большее значение приобретает золотистый стафило­кокк, грамотрицательная флора либо сочетанная инфекция.

3. Клиника.

Инкубационный период продолжается от 12 до 48 ч. Различают следующие клинические формы болезни: типичный грипп и атипичный (афебрильный, акатаральный и молниеносный); потяжести течения – легкий, среднетяжелый, тяжелый и очень тяжелыйгрипп; по наличию осложнений – осложненный и неосложненный грипп.

1. Иммунитет.

Постинфекционный иммунитет стойкий, возможно – пожизненный. Иммунитет типо-, подтипо- и штаммоспецифический. Основную роль играют вируснейтрализующие антитела против гемагглютининов внеклеточных вирусов. Антитела появляются в крови через 3-4 дня после начала заболевания и достигают пиковых концентраций через 2-3 недели. Секреторный SIgAобеспечивает защиту слизистых оболочек, препятствуя адгезии вирусов на клетках эпителия (связывание гемагглютининов). Интерфероны α и β блокируют развитие вируса внутри пораженных клеток.NK-клетки вызывают гибель пораженных вирусом клеток, что приводит к прекращению репликации вируса.

1. Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал – смыв из носоглотки, мазок из полости носа, мокрота, сыворотка крови.

7.1. Экспресс-диагностика.

Для быстрой диагностики гриппа используют метод обна­ружения вируса гриппа с помощью флюоресцирующих антител в мазках из полости носа в первые дни болезни. Мазки обрабатывают специфическими гриппозными флюоресциру­ющими сыворотками. Образовавшийся комплекс антиген-антитело ярко светится в ядре и цитоплазме клеток цилиндрического эпителия и отчет­ливо виден в люминесцентном микроскопе. Ответ можно получить через 2-3 ч.

7.2. Вирусологический метод.

• Культивирование вируса осуществляется на курином эмбрионе или различных клеточных культурах – первичные культуры почечных клеток обезьян, человека и телят (HeLa,KB, клетки сердца, кишечника и другие первичные диплоидные и гетероплоидные клетки к гриппу нечувствительны).

• Для индикации проводится РГАдс или РГА через 3-4 дня.

• Для идентификации – РТГА со специфическими противогриппозными диагностическими сыворотками.

7.3. Серодиагностика.

Серологические исследования помогают ретроспективной диагности­ке гриппа. Исследуют парные сыворотки крови, взятые у больных в острый период болезни (до 5-го дня от начала заболевания) и в период реконвалесценции – через 12-14 дней. Наиболее показательными всерологической диагностике являются РСК и РТГА с гриппозными антигенами. Диагностическим считается нарастание титра антител в 4 раза и более.

8. Специфическая профилактика и терапия.

8.1. Профилактика.

• Вакцинация.

Существует 12 вакцин, содержащих антигены вирусов H1N1, H3N2 и B.

1. Живые (2) – российского производства. Интраназальные. Не применяются.

2. Инактивированные цельновирионные (3) – интраназальные или инъекционные.

3. Субъединичные (7) – гриппол (с иммуномодулятором полиоксидонием), аггрипак, ваксигрипп, инфлювак, флюорикс и др.

• Иммуноглобулин нормальный донорский (в двойной дозировке).

• Интерферон лейкоцитарный человеческий – интраназально.

8.2. Терапия.

При гриппе применяют комплекс этиотропных, патогенети­ческих и симптоматических средств, направленных на возбудителя забо­левания, дезинтоксикацию организма, повышение защитных сил, ликви­дацию воспалительных и других изменений.

Лечение легких и среднетяжелых форм гриппа проводят в домашних условиях, тяжелых и осложненных – в инфекционном стационаре.

Противовирусная терапия:

• Ремантадин эффективен при лечении гриппа, вызванного вирусом типа А, и лишь при раннем его использова­нии – в первые часы и сутки от начала заболевания.Нарушает репликацию вируса гриппа А. Противовирусный эффект реализуется путем блокирования ионных каналов М2 вируса, что сопровождается нарушением его способности проникать в клетки и высвобождать рибонуклеопротеид. Тем самым ингибируется важнейшая стадия репликации вирусов. У вирусов может развиваться резистентность к римантадину, частота которой достигает 30%

• При гриппе, вызванном вирусом типа А и В, эффективно назначение препарата озельтамивир (тамифлю) взрослым и детям старше 12 лет. Препарат ингибирует нейраминидазу вируса. Эффективен для лечения птичьего гриппа.

• Реленца(занамивир) – структурный аналог нейраминовой кислоты. Конкурирует с ней за места связывания нейраминидаз вирусов гриппа. Эффективен для лечения птичьего гриппа.

• Арбидол эффективен в отношении вирусов гриппа А и В и возбудите­лей других ОРВИ. Назначают его взрослым и детям старше 12 лет.

• Амиксин эффективен как против вирусов гриппа, так и против возбу­дителей всех ОРВИ.

• Неовир применяется при лечении гриппа и ОРВИ, вызванных вируса­ми парагриппа, риновирусами, PC-вирусом, аденовирусами, герпесвирусами.

• Циклоферон– индуктор эндогенного интерферона с выраженнойпротивовирусной, иммуномодулирующей и противовоспалительной ак­тивностью.

• При гриппе, протекающем в легкой и среднетяжелой неосложненной форме, используются препаратыα-интерферона– в частности, чело­веческий лейкоцитарный интерферон (ЧЛИ) с низкой противовирусной активностью (до 10 тысME).

Симптоматическая и патогенетическая терапия.

Во время лихорадочного периода больному гриппом необходимы постель­ный режим, тепло, обильное горячее питье с большим количество витами­нов, особенно С и рутин (чай, компот, настой шиповника, фруктовые соки, морс). Для профилактикигеморрагических осложнений, особенно пожилым людям с повышенным АД, необходим зеленый чай, варенье или сок черноплодной рябины (аро­нии), грейпфруты, а также витамины группы рутина (рутин, кварцетин) в соче­тании с 300 мг аскорбиновой кислоты в сутки.

Для уменьшения сильной головной и мышечной болей, укорочения проявлений токсикоза и воспалительных изменений в дыхательных путях используют комплексный препарат «антигриппин». Можноиспользовать также колдрекс или аспирин UPSA с витамином С, предвари­тельно растворив таблетку этих препаратов в полустакане теплой воды, либо анальгетики – панадол, темпалгин, седалгин. Жаропонижающие средства следует принимать лишь при высокой температуре тела, достигающей 39°С и более и 38°С – у детей и пожи­лых лиц.

Обязательно назначение комплекса витаминов («Ревит», «Гексавит», «Ундевит», «Декамевит»), аскорби­новой кислоты до 600-800 мг/сут и укрепляющего стенки сосудов рутина до 150-300 мг/сут.

Для улучшения дренажной функции бронхов и усиления эвакуации слизи и мокроты необходимо проведение теплых влажных ингаляций, содержащих соду и бронходилататоры (солутан, эуфиллин, эфедрин). При выра­женном рините для интраназального введения используют 2-5% раствор эфедрина, 0,1% раствор (или эмульсию) санорина, нафтизин, галазолин.

Назначение антибиотиков или сульфаниламидов для профилактики осложнений (пневмоний) у больных с неосложненным течением гриппа неоправданно, так как нередко способствует развитию этих осложнений.

Семейство Paramyxoviridae

Семейство Paramyxoviridaeвключает три рода вирусов:Paramyxovirus,Morbillivirus,Metamyxovirus.В составе рода парамиксовирусов патогенными для человека являются вирусы парагриппа 1-5 типов, эпидемического пароти­та (свинка); в роду морбилливирусов – вирус кори; а в роду метамиксовирусов – респираторно-синцитиальный вирус. Это крупные (150-200 нм), сложно устроенные вирусы. Тяж нуклеопротеида свернут в клубок и одет внутренней белковой оболочкой. Снаружи вирион покрыт липидной оболочкой, которая по своему составу близка плазматической мембране клетки-хозяина. В состав суперкапсида входят также поверхностные гликозилированные белки H, N и F:

• Белки H (парамиксовирусы и морбилливирусы) и N (род парамиксовирусов) являются вирусными рецепторами, обладают соответственно гемагглютинирующей и нейраминидазной активностью.

• Белок F выполняет функцию слияния с мембраной чувствительной клетки. Под суперкапсидом находится слой матриксного М-белка.

Геном представлен одноцепочечной молекулой «минус» РНК, которая окружена белковым капсидом со спиральным типом симметрии (белок NP). В составе вириона имеются молекулы ферментов (РНК-полимеразы P и L).

Содержат два видоспецифических антигена:

• S-антиген (нуклеопротеид) – внутренний;

• Y-антиген (белки H и N) – наружный.

Парамиксовирусы вызывают острую литическую инфекцию. Репликация вирусов происходит в цитоплазме зараженных клеток. Продолжительность цикла репродукции составляет около 10 часов.

Для культивирования используют куриные эмбрионы и первично-трипсинизированные клеточные культуры.

Парамиксовирусы неустойчивы во внешней среде. Быстро инактивируются при высыхании, нагревании, облучении ультрафиолетом. Источником инфекции является больной человек. Механизм передачи – аэрогенный, путь передачи – воздушно-капельный.

Вирусы парагриппа.

Были выделены в США Р. Чаноком в 1956 году от детей с ОРЗ.

Относятся к роду Paramyxovirusсемейства Paramyxoviridae.

Различают 5 самостоятельных типов вирусов парагриппа человека (ВПГЧ 1-5 серотипов). В нашей стране циркулируют типы 1, 2 и 3. Обладают гемагглютинирующей и нейраминидазной активностью.

ВПГЧ вызывают острую респираторную инфекцию, протекающую у взрослых легче, чем грипп.

Продолжительность инкубационного периода составляет 6-9 дней. Вирусы поражают преимущественно клетки эпителия носоглотки и гортани, поэтому заболевание протекает с выраженной клиникой ринофарингита и ларингита (сухой лающий кашель, осиплость голоса). Явления общей интоксикации при парагриппе выражены слабо. У детей первых лет жизни заболевание протекает в более тяжелой форме с вовлечением нижних отделов дыхательных путей (бронхит, пневмония). Наиболее серьезным осложнением парагриппа у детей является отек гортани со стенозом голосовой щели (круп). Продолжительность острого периода составляет от нескольких дней до двух недель.

После перенесенного заболевания развивается стойкий продолжительный иммунитет (гуморальный и местный).

Парагрипп встречается в течение всего года, однако повышение уровня заболеваемости приходится на холодное время года.

Лабораторная диагностика.

В качестве исследуемого материала для диагностики используют глоточный смыв, либо мазок, взятый с помощью ватного тампона с задней стенки глотки, сыворотку крови.

1. Экспресс-диагностика:

• Реакция прямой иммунофлюоресценции со стандартными типовыми антисыворотками.

• Реже применяют риноцитоскопию при окраске по Романовскому.

2. Вирусологический метод:

• Выделение вируса осуществляют в культурах клеток почек обезьян «МК-2» или эмбриона человека. ВПГЧ редко дают выраженный цитопатогенный эффект.

• Индикацию чаще всего проводят с помощью реакции гемадсорбции. Для этого к зараженным культурам клеток прибавляют эритроциты морской свинки или человека. Если клетки инфицированы вирусом парагриппа, они адсорбируют эритроциты.

• Идентификация осуществляется помощью иммунных сывороток в РТГАдс или РСК.

3. Серодиагностика:

• Исследование парных проб сыворотки крови больного (интервал 10-14 дней) на наличие противовирусных антител в РТГА или РСК. Нарастание титра антител во второй сыворотке в 4 и более раз указывает на парагриппозную инфекцию.

4. В крови больных неосложненным парагриппом – нормоцитоз или умеренная лейкопения. СОЭ не увеличена.

Специфическая профилактика и терапияотсутствует.

Вирус эпидемического паротита (свинки).

Вирус паротита описан в 1934 году К. Джонсоном и Э. Гудпасчером.

Относится к роду Paramyxovirusсемейства Paramyxoviridae. Обладает гемагглютинирующей и нейраминидазной активностью.

Эпидемический паротит или свинка наиболее часто поражает детей в возрасте от 5 до 15 лет. Вспышки заболевания наблюдаются и среди взрослых, особенно в закрытых коллективах (в армейских казармах, общежитиях). В типичных случаях инфекция сопровождается умеренной лихорадкой, появляется припухлость, болезненность одной или обеих околоушных слюнных желез. Больной ребенок выглядит как «хомячок с орехом за щекой».

Продолжительность инкубационного периода составляет 2-3 недели. Продолжительность острого периода – 7-10 дней. Период заразительности начинается еще до видимых симптомов поражения околоушной железы и заканчивается с исчезновением этих симптомов. Основной путь передачи – воздушно-капельный, дополнительный – контактно-бытовой. В 30-40% наблюдается бессимптомная инфекция с развитием прочного иммунитета. Лица с бессимптомной формой инфекции заразны для окружающих.

Местом первичной репродукции вируса является эпителий слизистых оболочек носоглотки и полости рта. Затем по стенонову протоку вирус проникает в околоушную слюнную железу. Лимфогенным путем вирус может попадать в кровеносное русло (вирусемия). Вирус паротита способен поражать внутренние органы: яички, яичники, поджелудочную и щитовидную железы, почки, головной мозг, вызывая серьезные осложнения (орхит, оофорит, менингит, менингоэнцефалит, тиреоидит, панкреатит, нефрит). Орхит наблюдается почти в 20% случаев свинки у лиц мужского пола. Последствием перенесенного двустороннего орхита является половая стерильность.

Постинфекционный иммунитет пожизненный.

Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал – слюна или спинномозговая жидкость, сыворотка крови.

1. Вирусологический метод:

• Выделение вируса осуществляют в 7-9 дневных куриных эмбрионах или клеточных культурах. Материал вводят в амниотическую полость. Вирус обычно не вызывает видимых изменений в тканях эмбриона.

• Индикацию чаще всего проводят в реакции гемагглютинации (эмбрион) или РГАдс с эритроцитами морской свинки (культуры клеток).

• Идентификация осуществляется помощью стандартной антисыворотки в РТГА и РТГАдс.

2. Серодиагностика:

• Исследование парных проб сыворотки крови больного (интервал 10-14 дней) на наличие противовирусных антител в РТГА. Нарастание титра антител во второй сыворотке в 4 и более раз указывает на парагриппозную инфекцию.

Специфическая профилактика.

Иммунизация проводится однократно на первом году жизни с помощью живой ослабленной вакцины, полученной на куриных эмбрионах.

Специфического лечения нет.

Вирус кори.

Относится к роду Morbillivirusсемейства Paramyxoviridae.

Был открыт в 1911 году Дж. Андерсоном и Дж. Гольдбергом.

Описан только один серологический вариант вируса. Обладает гемагглютинирующей активностью. Нейраминидазы нет.

Корь (лат. morbilli) – острая вирусная болезнь, характеризующаяся лихорадкой, общей ин­токсикацией, энантемой, макулопапулезной сыпью, поражением конъюнк­тивы и верхних отделов респираторного тракта. До введения обязательной вакцинации была самой распространенной детской болезнью с относительно высокой летальностью.

Вирус кори является одним из самых «заразных» вирусов. Носительство не отмечено, поэтому источником инфекции может быть только больной человек, у которого вирус выделяется со слезной жидкостью, секретами носа, слизистой полости рта.

Продолжительность инкубационного периода составляет около 10 дней. Входные ворота – слизистая респираторного тракта. Вирус размножается в тканях верхних дыхательных путей и конъюнктиве глаз уже на первой неделе инкубационного периода, затем лимфогенным путем поступает в кровеносное русло (вирусемия) и распространяется по всему организму. Вирус поражает клетки ретикуло-эндотелиальной системы. После короткого продромального периода, во время которого отмечается лихорадка, ринит, фарингит, симптомы интоксикации, на коже больных появляется пятнисто-папулезная сыпь. Первые элементы сыпи возникают в области лба и за ушными раковинами. Затем сыпь быстро распространяется на лицо, шею, грудь, туловище, конечности (элементы сыпи незаразны). К раннему симптому кори относится появление на слизистой оболочке полости рта точечных некрозов, окруженных участками воспаления, так называемых пятен Бельского-Филатова-Коплика. Появление сыпи сопровождается высокой лихорадкой, конъюнктивитом и повышением интоксикации. Высокая температура у детей может сопровождаться судорогами, помутнением сознания. Кашель, резь в глазах, фотофобия, конъюнктивит – утяжеляют состояние больных детей.

Период высыпаний продолжается 3-4 дня, после чего температура нормализуется, элементы сыпи бледнеют, в течение нескольких дней сохраняются в виде пигментированных пятен, и в дальнейшем исчезают.

Коревая инфекция сопровождается ослаблением неспецифической резистентности организма, что часто приводит к развитию вторичных бактериальных инфекций (бронхопневмония, синуситы, воспаление среднего уха, мастоидит). На фоне иммунодефицитного состояния у маленьких детей иногда развивается первичная коревая пневмония и коревой энцефалит.

Перенесенное заболевание оставляет прочный гуморальный иммунитет. Полученные от матери антитела (естественный пассивный иммунитет) защищают ребенка до 6-ти месячного возраста.

Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал – смыв из носоглотки, моча, сыворотка крови.

1. Экспресс-диагностика:

• Реакция прямой иммунофлюоресценции.

• Реже применяют цитоскопию при окраске по Романовскому, при которой обнаруживают многоядерные симпласты.

2. Вирусологический метод:

• Выделение вируса осуществляют в культурах фибробластах японских перепелок, культурах HeLa,Hep2, А-1, почек обезьян.

• Индикацию осуществляют по цитопатическому действию вируса – образование гигантских многоядерных клеток.

• Идентификация осуществляется помощью иммунных сывороток в РТГАдс.

3. Серодиагностика (основной метод):

• Исследование сыворотки крови больного на наличие противовирусных антител в РТГА, РСК и РПГА.

Специфическая профилактика.

Осуществляется путем иммунизации детей в возрасте от 3-х месяцев до 1 года живой ослабленной вакциной (вакцинный штамм Ленинград-16, культивируемый на клетках почек морских свинок или фибробластах японских перепелок). Плановая ревакцинация проводится в 9 лет. Кроме того, как средство экстренной профилактики применим иммуноглобулин нормальный донорский (противокоревой).

Специфического лечения нет.

Респираторно-синцитиальный вирус (РС-вирус).

Был выделен в 1957 году в США Р. Чаноком от детей с ОРЗ.

РС-вирус является представителем рода Metamyxovirusсемейства Paramyxoviridae.

Диаметр вириона 90-120 нм, в своем составе имеет рибонуклеиновую кислоту с харак­терной спиралевидной структурой и комплементсвязывающий антиген. Имеет вирусспецифический комплемент связывающий антиген. В отличие от других парамиксовирусов не обладает гемагглютининами и нейраминидазой. Характерным свойством этого вируса является способность обусловли­вать образование синцития или псевдогигантских клеток в культуре тка­ни.

Размножается в культуре тканей HeLa, Нeр-2 и почки эмбриона че­ловека. Во внешней среде нестоек, при температуре 55°С инактивируется в течение 5 мин.

Респираторно-синцитиальная инфекция – острое вирусное заболевание, ха­рактеризующееся явлениями умеренной интоксикации и поражением преимущественно нижних отделов органов дыхания с частым развитием брон­хитов, бронхиолитов, пневмоний.

Респираторно-синцитиальная инфекция распростра­нена повсеместно, регистрируется круглый год, наибольший подъем за­болеваемости наблюдается зимой и весной. Источником инфекции яв­ляется больной человек в остром периоде болезни. Передается воздуш­но-капельным путем. Чаще наблюдается у детей раннего возраста, одна­ко отмечается высокая восприимчивость и взрослых. При заносе этой инфекции в детские учреждения заболевают практически все дети в воз­расте до одного года.

Кли­ническое течение болезни, как естественное, так и при экспериментальной инфекции у взрослых, не отражает сущности процесса, развивающе­гося у детей, так как у взрослых заболевание чаще протекает как острое респираторное заболевание. Считается, что при PC-инфекции ведущей является патология нижних дыхательных путей и наиболее характер­ным – тяжелое поражение бронхиол.

Воспалительные изменения развиваются в начальном периоде на сли­зистой оболочке носа и глотки. У взрослых поражением этих отделов процесс может ограничиться. У детей в возрасте до года обычно поража­ются бронхиолы и паренхима легких с наличием некроза трахеобронхиального эпителия и некротического обтурационного бронхиолита, что приводит к закупорке бронхов комочками слизи. Возникающий спазм приводит к образованию ателектазов и эмфиземе, что способствует воз­никновению вирусно-бактериальных пневмоний.

Гуморальный иммунитет после перенесенной болезни сохраняется всю жизнь.

Инкубационный период составляет 3-6 дней. У взрослых заболевание в большинстве случаев протекает в виде легкого респираторного заболевания с признаками слабовыраженной интоксикации. Отмечается умеренная головная боль, вялость. Температура тела обычно субфебрильная, иногда достигает 38°С. В неосложненных случа­ях продолжительность лихорадочного периода составляет 2-7 дней. Катаральные изменения проявляются в виде ринита, умеренной гипе­ремии мягкого неба, дужек, реже – задней стенки глотки.

Ведущим симптомом PC-инфекции является сухой, продолжитель­ный, приступообразный кашель, который может длиться до 3 нед.

Наиболее тяжелые формы болезни, обусловливающие в 0,5% случаев летальные исходы, свойственны детям до одного года.

Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал – смыв из носоглотки, сыворотка крови.

1. Экспресс-диагностика:

• Реакция прямой иммунофлюоресценции.

2. Вирусологический метод:

• Выделение вируса осуществляют в культурах клеток почек обезьян «МК-2», HeLa, Нeр-2 или почки эмбриона че­ловека.

• Индикацию осуществляют по цитопатическому действию вируса – образование синцития.

• Идентификация осуществляется помощью иммунных сывороток в РИФ, РН и РСК.

3. Серодиагностика (основной метод):

• Исследуют парные сыворотки, взятые с интервалом 10-14 дней, при помощи РН, РСК и РПГА. Диагно­стическим является нарастание титра антител в 4 раза и более.

Специфическая профилактика и терапияотсутствует.

Семейство Picornaviridae.

Риновирусы.

Были впервые выделены в 1960 году от людей, больных острым ринитом.

Риновирусы относятся к роду RhinovirusсемействаPicornaviridae.

Это мелкие вирусы, содер­жащие РНК. Размеры вирионов 15-30 нм, основу их составляет рибонуклеиновая кислота. Кубический тип симметрии нуклеокапсида. Характерно отсутствие внешней облочки.

В настоя­щее время различают около 113 серотипов риновирусов.

Во внешней среде нестойки, в течение 10 мин инактивируются при температуре 50°С, при высушивании на воздухе большая часть инфекционности теряется через несколько минут. Так как в составе пикорнавирусов имеются лишь нуклеопротеиды и отсутствуют липиды, то они устойчивы к эфиру и дезоксихолату натрия.

Риновирусное заболевание, или заразный насморк, – острая респираторная болезнь, вызываемая риновирусами, характеризуется преимущественным поражением слизистой оболочки носа и слабо выраженными симптомами общей интоксикации.

В условиях умеренного климата риновирусное забо­левание встречается в течение всего года. Подъем заболеваемости регист­рируется в основном весной и осенью. Риновирусы обусловливают до 20-25% всех острых респираторных заболеваний.

Источником инфекции являются больные и вирусоносители, путь рас­пространения – воздушно-капельный. Возможно также заражение через инфицированные предметы.

Переболевшие риновирусным заболеванием приобретают иммунитет, в период выздоровления в крови появляются вируснейтрализующие, комплементсвязывающие и другие антитела, однако иммунитет после пе­ренесенного заболевания строго специфичный, поэтому возможны многократные заболевания, вызванные разными серотипами вируса.

Риновирусы проникают в организм человека через дыхате­льные пути. В зависимости от места внедрения развиваются различные клинические проявления. При внедрении риновирусов в носоглотку воз­никает ОРЗ с преимущественным повреждением слизистой оболочки носа. При внедрении вируссодержащего материала в виде аэрозоля воз­никают заболевания с преимущественным поражением трахеи и бронхов.

Возбудитель риновирусной инфекции размножается в клетках эпите­лия респираторного тракта, вызывая местную воспалительную реакцию с резким набуханием, отечностью тканей и обильной секрецией.

Развивающийся после болезни иммунитет бывает как гуморальный, так и тканевой. При этом защитное действие в большей степени связано с появлением секреторных антител.

Инкубационный период продолжается 1-6 дней (чаще 2-3 дня). Заболевание характеризуется слабо выраженными симп­томами общей интоксикации; начинается остро, появляется недомога­ние, тяжесть в голове, умеренно выраженные «тянущие» боли в мышцах. Эти симптомы развиваются на фоне нормальной или субфебрильной температуры. Одновременно развивается катаральный синдром – чиха­ние, чувство саднения, царапанья в горле. Появляются заложенность носа, затруднение носового дыхания.

Ведущий симптом – насморк с обильными серозными выделениями, которые вначале имеют водянистый характер, затем становятся слизи­стыми. Наряду с ринореей часто наблюдается сухой кашель, гиперемия век, слезотечение. В среднем насморк продолжается 6-7 дней, но может затянуться до 14 дней. В зеве воспалитель­ные изменения выражены слабо и характеризуются умеренной гипере­мией дужек, миндалин, слизистой оболочки мягкого неба, реже задней стенки глотки.

У детей младшего возраста болезнь протекает тяжелее, чем у взрослых, из-за более выраженных катаральных явлений. Осложнения наблюдаются редко.

Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал – смыв из носоглотки, сыворотка крови.

1. Экспресс-диагностика:

• Реакция прямой иммунофлюоресценции.

2. Вирусологический метод:

• Выделение вируса осуществляют в культурах фибробластов эмбриона че­ловека.

• Индикацию осуществляют по цитопатическому действию вируса.

• Идентификация осуществляется помощью иммунных сывороток в РИФ, РН.

3. Серодиагностика (основной метод):

• Исследуют парные сыворотки, взятые с интервалом 14-28 дней, при помощи РН, РСК. Диагно­стическим является нарастание титра антител в 4 раза и более.

Специфическая профилактика и терапияотсутствует.

Семейство Adenoviridae.

Аденовирусы были выделены в 1953 году У. Роу из культуры клеток аденоидальных миндалин у детей. В 1954 году американскими учеными во главе с Хюбнером – из ткани миндалин и лимфатических узлов, по­лученных от детей во время операций, а также обнаружены у лиц с за­болеваниями верхних дыхательных путей, сопровождавшимися конъ­юнктивитами. С 1956 года в практику вошел термин «аденовирусы», предложенный Эндерсом и Френсисом, а болезни, вызываемые данной группой вирусов, получили название аденовирусных заболеваний.

Семейство Adenoviridaeв настоящее время насчитывает 90 серотипов аденовирусов, в том числе – 49 типов, выделенных от че­ловека и различающихся в антигенном отношении.

Аденовирусы – типичные нуклеокапсиды, состоящие из двунитчатой линейной ДНК (12-14%) покры­той белковой мембраной (87% массы), в которой содержится 252 капсомера. Вирионы имеют икосаэдральную структуру, диаметр равен 70-90 нм.

В состав аденовирусов входят три антигена, локали­зованные в различных капсомерах. Один из них, общий для всех серотипов – комплементсвязывающий, другой – типоспецифический, обусловливает способность аденовирусов агглю­тинировать эритроциты обезьян-резус и крыс, третий – отличается токсичностью и вызывает цитопатическое действие, выражающееся в округлении зараженных клеток с последующей их дегенерацией. При этом ДНК аденовирусов синтезируется в ядре, а вирусные белки – на цитоплазматических рибосомах. Сборка вирионов происходит в ядрах клеток, где, скаплива­ясь, они образуют кристаллоподобные включения.

Аденовирусы сохраняются до 2 нед при комнатной температуре, но погибают от воздействия ультра­фиолетового облучения и хлора.

Аденовирусные заболевания (pharyngoconjunctivalfever–PCP– англ.) – острые вирусные болезни, протекающие с преимущественным поражением органов дыхания, глаз и лимфатических узлов.

Вспышки заболева­ний чаще обусловлены типами 3, 4, 7, 14 и 21. Тип 8 вызывает эпидемиче­ский кератоконъюнктивит.

Источником инфекции являются больные с клиниче­ски выраженными или стертыми формами заболевания. Заражение про­исходит воздушно-капельным путем. Однако не исключена возможность и алиментарного пути передачи инфекции.

Заболеваемость повышается в холодное время года. Чаще болеют дети и военнослужащие. Особенно высока заболеваемость во вновь сформи­рованных коллективах (в первые 2-3 мес).

Воротами инфекции являются преимущественно слизистые оболочки верхних дыхательных путей, реже – конъюнктивы. Аденови­русы размножаются в слизистой оболочке с характерным последовательным вовлечением в патологический процесс нисходящих отделов дыхательного тракта. Репродукция аденовирусов может происхо­дить в ткани кишечника, лимфатических узлах с развитием генерализованной лимфаденопатии. Помимо местных изменений, аденовирусы оказывают общее токсическое воздействие на организм в виде лихорадки и симпто­мов общей интоксикации.

Инкубационный период колеблется от 4 до 14 дней (чаще 5-7 дней). Основными клиническими формами аденовирусных заболеваний являются: ринофарингиты, ринофаринготонзиллиты, фарингоконъюнктивальная лихорадка, конъюнктивиты и кератоконъюнктивиты, аденовирусная пневмония.

Аденовирусные заболевания начинаются остро с повышения темпе­ратуры тела, симптомов интоксикации (познабливание, головная боль, слабость, снижение аппетита, мышечные боли и др.). Лихорадка в типичных случаях продолжительная, длится до 6-14 дней.

Поражение дыхательных путей может сочетаться с воспалением конъ­юнктив.

Пленчатые конъюнктивиты встречаются преимущественно у детей дошкольного возраста. Заболевание начинается остро и протекает тяже­ло. Температура тела достигает 39-40°С и сохраняется до 5-10 дней.

Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал – смывы из носоглотки, сыворотка крови.

1. Экспресс-диагностика:

• Реакция прямой иммунофлюоресценции.

2. Вирусологический метод:

• Выделение вируса осуществляют в культурах Hep-2,HeLa, клеток почек эмбриона человека.

• Индикацию осуществляют по цитопатическому действию вируса (внутриядерные включения).

• Идентификация осуществляется помощью иммунных сывороток в РИФ и РСК.

3. Серодиагностика:

• Исследуют парные сыворотки, взятые с интервалом 10-14 дней, при помощи РСК и РТГА. Диагно­стическим является нарастание титра антител в 4 раза и более.

Специфическая профилактика.

Имеется инактивированная (формалином) аденовирусная вакцина серотипов 3,4,7.

Специфическая терапия отсутствует.

Семейство Poxviridae

Возбудитель натуральной оспы был открыт в 1892 году Г. Гварниери, который описал околоядерные включения (тельца Гварниери). В 1906 году Э. Пашен обнаружил вирусние корпускулы в жидкости оспенных пузырей (тельца Пашена).

Возбудитель натуральной оспы относится к вирусам семейства Poxviridae, подсемействаChordopoxviridae, родаOrthopoxvirus.

Вирус содержит ДНК, имеет размеры 200-350 нм, размножается в цитоплазме с образованием включений. Вирус натуральной оспы имеет антигенное родство с эритро­цитами группы А крови человека, что обусловливает слабый иммунитет, высокую заболеваемость и смертность соответствующей группы лиц. Он устойчив к воздействию внешней среды, особенно к высушиванию и низким температурам. Он может длительное время, в течение ряда меся­цев, сохраняться в корочках и чешуйках, взятых с оспин на коже боль­ных, в замороженном и лиофилизированном состоянии остается жизнеспособным несколько лет. Вирус натуральной оспы имеет четыре антигена: Х-гемагглютинин; растворимыеL- иS-антигены; нуклеопротеидныйNP-антиген, выявля­емые в реакциях связывания комплемента и преципитации.

Натуральная оспа (Variola,variolamajor– лат.;Smallpox– англ.;Pocken,Blatern– нем.;Variol– франц.) – острое вирусное заболевание, котороев типичных случаях характеризуется общей интоксикацией, лихорадкой, своеобразными высыпаниями на коже и слизистых оболочках, последовате­льно проходящими стадии пятна, пузырька, пустулы, корочки и рубца.

Натуральная оспа относится к антропонозам и пред­ставляет собой высококонтагиозную (особо опасную) инфекцию. К оспе восприимчивы все люди, если у них нет иммунитета, полученного в резу­льтате перенесенного ранее заболевания или вакцинации. Натуральная оспа была широко распространена в Азии и Африке. В результате прове­денной иммунизации оспенной вакциной населения всех континентов, она была повсеместно ликвидирована в 1977 году. В январе 1980 г. Министерство здравоохранения СССР отменило обязательную вакцинациюпротив натуральной оспы.Является воздушно-ка­пельной инфекцией, однако возможна инокуляция вируса при непосред­ственном соприкосновении с пораженной кожей больного или инфици­рованными им предметами. Заразительность больного наблюдается на протяжении всего заболевания – от последних дней инкубации до отторжения корочек. Трупы умерших от оспы также сохраняют высокую зара­зительность.

При вдыхании зараженного воздуха вирусы попадают в респираторный тракт. Возможно заражение через кожу и трансплацентарно. Вирус поступает в ближайшие лимфатические узлы и далее в кровь, что приводит к вирусемии. Гематогенно инфицируется эпи­телий, здесь происходит размножение вируса. Ослабление иммунитета ведет к активации вто­ричной флоры и превращению везикул в пустулы. Вследствие гибели ро­сткового слоя эпидермиса, глубоких нагноительных и деструктивных процессов формируются рубцы. Может развиться инфекционно-токсический шок. Для тяжелых форм характерно развитие геморрагического синдрома.

При типичном течении оспы инкубационный пе­риод длится 8-12 дней. Начальный период характеризуется ознобом, по­вышением температуры тела, сильными рвущими болями в пояснице, крестце и конечностях, сильной жаждой, головокружением, головной болью, рвотой.

На 4-й день наблюдается снижение температуры тела, ослабляются клинические симптомы начального периода, но появляются типичные оспины на коже головы, лица, туловища и конечностей, которые прохо­дят стадии пятна, папулы, пузырька, пустулы, образования корочек, от­торжения последних и образования рубца. Одновременно появляются оспины на слизистой оболочке носа, ротоглотки, гортани, трахеи, брон­хах, конъюнктивах, прямой кишке, женских половых органов, мочеиспу­скательного канала. Они вскоре превращаются в эрозии.

На 8-9-й дни болезни в стадии нагноения пузырьков вновь ухудшает­ся самочувствие больных, возникают признаки токсической энцефалопа­тии (нарушение сознания, бред, возбуждение, у детей – судороги). Пери­од подсыхания и отпадения корок занимает около 1-2 нед. На лице иволосистой части головы образуются многочисленные рубцы.

Лабораторная диагностика.

В качестве исследу­емого материала используют содержимое оспенных везикул и пустул.

1. Экспресс-диагностика:

• Приготовленные мазки обрабатываются методом серебрения по Морозову. Под им­мерсионным микроскопом обнаруживаются тельца Пашена в виде мелкихкруглых образований темно-коричневого или черного цвета, расположенных поодиночке, парами, короткими цепочками, неправильными группами.

• Допол­нительное электронномикроскопическое исследование позволяет уточнить ультраструктуру элементарных телец.

• Непрямая РИФ.

• Используя кроличью иммунную сыворотку можно обнаружить оспенные антигены в реакции микропреципитации в агаровом геле.