Пояснения к занятию

БРУЦЕЛЛЕЗ

1. Краткая характеристика инфекции. Основные клинические симптомы. История вопроса.

Возбудители бруцеллеза названы в честь Д. Брюса. Патогенными для человека являются три вида бруцелл: Brucella melitensis (возбудитель бруцеллеза мелкого рогатого скота) – открыта Д. Бюрне в 1886 году; Brucella abortus (возбудитель бруцеллеза крупного рогатого скота) – Б. Бангом и Б. Стрибольтом в 1897 году; Brucella suis (возбудитель бруцеллеза свиней) – Ж. Траумом в 1914 году.

2. Характеристика возбудителей:

2.1. Классификация

4 группа по определителю Берджи (грамотрицательные аэробные / микроаэрофильные бактерии), род Brucella, вид B. abortus, B. melitensis, B. suis.

2.2. Морфологические и тинкториальные свойства

Мелкие коккобактерии, спор не образуют, жгутиков не имеют, неподвижны, образуют капсулу, грамотрицательные.

2.3. Культуральные свойства

Требовательны к питательным средам, нуждаются в нативном белке, аминокислотах и других факторах роста, размножаются медленно, особенно в первых генерациях. Для культивирования используют печеночный бульон, в котором бруцеллы растут в виде равномерного помутнения (диффузный рост) и печеночный агар – мелкие, выпуклые, бесцветные колонии через 1 – 3 недели.

2.4. Биохимические свойства

Все бруцеллы расщепляют глюкозу, но не ферментируют мальтозу и маннозу, в отличие от францизелл. Секретирует гиалуронидазу.

2.5. Токсигенные свойства

Эндотоксин – липополисахарид клеточной стенки (вызывает интоксикацию и аллергизацию).

2.6. Антигенные свойства

Соматический О-антиген – липополисахарид клеточной стенки, Vi-антиген – капсульный.

2.7. Резистентность

Устойчивы к факторам окружающей среды, месяцами сохраняются в моче, навозе больных животных, в шерсти овец, в пыли; хорошо переносят низкие температуры, в замороженном мясе сохраняются до полугода; высокочувствительны к дезинфектантам и повышенным температурам.

2.8. Патогенность для животных

Патогенны для многих животных – крупного и мелкого рогатого скота, свиней.

3. Патогенез и эпидемиология

Бруцеллез – хроническая персистирующая зоонозная инфекция; человек заражается только от больных животных через мясо, молоко, брынзу, масло; во многих случаях заболевание носит профессиональный характер, поскольку наиболее часто болеют люди, работающие со скотом. В организм хозяина бруцеллы проникают через неповрежденные кожу и слизистые несколькими путями (алиментарный, контактный, аэрогенный), благодаря выраженной инвазивности (капсула, устойчивость к бактерицидному действию крови, секреция гиалуронидазы и других ферментов) попадают в лимфу и кровь (бактериемия), разносятся по организму, проникают и размножаются в лимфоидных клетках, образуя гранулемы в печени, селезенке, лимфоузлах; поражается также кроветворная, нервная, половая системы; инфекционные аборты у беременных. Периодические обострения связаны с выходом возбудителей в кровь. Различают острый, подострый и хронический бруцеллез.

4. Иммунитет

Постинфекционный иммунитет (гуморальный и клеточный) напряженный, поствакцинальный – 1 год.

5. Лабораторная диагностика

Исследуемый материал:

Кровь, желчь, костный мозг, фекалии, моча.

Методы диагностики:

1. Экспресс-диагностика

ПЦР, РИФ, ИФА.

2. Бактериологический метод

Низкая высеваемость возбудителя.

I этап: посев исследуемого материала на питательные среды:

печеночный бульон – равномерное помутнение;

печеночный агар – мелкие, выпуклые, бесцветные колонии через 1 – 3 недели.

II этап: изучение выросших колоний по культуральным, морфологическим и тинкториальным свойствам, пересев материала колоний на скошенный печеночный агар для выделения чистой культуры.

III этап: идентификация чистой культуры:

• по биохимическим свойствам: бактериостатические тесты Хеддельсона (бактериостатическое действие красок (фуксин, тионин), условия культивирования первых генераций, выделение сероводорода);

• по антигенным свойствам: РА;

• по фаголизабельным свойствам: B. abortus чувствительна к фагу Т6.

3. Биологический метод

Заражение лабораторных животных (чаще морских свинок и мышей) исследуемым материалом подкожно, затем воспроизводится экспресс-диагностика, микроскопический (мазки-отпечатки) и бактериологический методы.

4. Серологический метод

По мере хронизации процесса снижается диагностическая значимость метода.

Реакция Хеддельсона (качественная) – РА (если реакция идет в I квадрате – реакция сомнительная, если в I, II, III квадратах – реакция положительная), реакция Райта (количественная) – РА, РСК, РПГА.

5. Метод кожно-аллергических проб

Является обязательным. По мере хронизации процесса увеличивается диагностическая ценность. Проба Бюрне с аллергеном (в основе лежит гиперчувствительность замедленного типа – антителнезависимая). Бруцеллин (аллерген) – взвсь трехнедельной бульонной культуры бруцелл, убитой нагреванием. Вводится в предплечье, учет по зоне гиперемии и отека: если диаметр папулы более 2 см – человек инфицирован, если менее 2 см – не инфицирован.