Домашнее задание к занятию №4.
1. Менингококки. Морфологические, культуральные и биологические особенности. Микробиологическая диагностика менингокковых инфекций (менингита, менигококкцемии, назофаренгита).
2. Гонококки. Морфологические, культуральные, биологические свойства. Диагностика острой и хронической гонорей.
ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ № 5 Дата_________________
TЕMA: ПАТОГЕННЫЕ КОККИ – СТАФИЛОКОККИ И СТРЕПТОКОККИ. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА КОККОВЫХ ИНФЕКЦИЙ. ФАГОТИПИРОВАНИЕ СТАФИЛОКОККОВ. ПРЕПАРАТЫ ДЛЯ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ И ТЕРАПИИ СТАФИЛОКОККОВЫХ ИНФЕКЦИЙ.
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:
1. Обcудить ряд теоретических вопросов по изучению биологических свойств стафилококков и стрептококков и заболеваний, вызываемых ими.
2. Познакомить с методами забора материала для лабораторного исследования, освоить способы лабораторной диагностики заболеваний, вызываемых грамположительными патогенными кокками.
3. Провести опыт самообследования студентов на носительство патогенных кокков.
ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА
1. Просмотр и зарисовка демонстрационных посевов стафилококков (объяснить каждый демонстрационный посев). Записать в альбом все признаки патогенности:
а) пигменты у стафилококков;
б) зона гемолиза на кровяном агаре вокруг колоний стафилококков;
в) выявление плазмокоагулазы. В 0,2-0,3 мл стерильной плазмы вносят суточную агаровую культуру стафилококка, пробирки ставят в термостат на 3 –6 - 24 часа.
г) определение фермента лецитиназы. С этой целью производят посев па среду Чистовича (МПА + 20%желточной смеси + 10% поваренной соли). Если стафилококки имеют лецитиназу, то через 24 - 48 -часов вокруг колонии внутри среды виден мутный венчик.
д) ферментация маннита в анаэробных условиях.
е) типирование стафилококков цри помощи стандартных фагов. На поверхность чашки с хорошо просушенным сахарным МПА засевают газоном 4-10 часовую бульонную культуру стафилококка. Дно чашки расчерчивают на квадраты. В среднюю часть каждого квадрата вносят по одной петле типового фага. Чашки ставят в термостат на 5-6 часов, выдерживают 12 часов при комнатной температуре и производят учет по наличию лизиса.
ГРУППЫ МЕЖДУНАРОДНЫХ ФАГОВ:
1 группа 29, 52, 52А, 79, 80
2 группа 3А, 3В, 3С, 55, 71
3 группа 6, 7, 42Е, 47, 53, 75, 77, 54
4 группа 42Д
вне группы 187, (73)
2. Просмотр и зарисовка демонстрационных посевов стрептококков:
а) a- и b- гемолиз на кровяном МПА;
в) характер роста на сахарном бульоне:
S. pyogenes S. pneumoniae S. faecalis.
придонный диффузный
3. Демонстрация определения каталазной активности стафилококов и стрептококков. На стекло нанести 2 капли 3% перекиси водорода, в первую каплю внести культуру стафилококка, а во вторую – стрептококка. Положительная реакция характерна для стафилококков и проявляется в образовании пузырьков газа в виде шапки.
4. Изучение посевов слизи из зева и носа:
а) культуральные особенности (обратить внимание наличие зон гемолиза) ;
А. размер___________________ А. размер___________________
Б. форма____________________ Б. форма____________________
В. поверхность_______________ В. поверхность_______________
Г. цвет _____________________ Г. цвет______________________
Д. прозрачность______________ Д. прозрачность______________
Е. гемолиз ___________________ Е. гемолиз ___________________
А. размер___________________ А. размер___________________
Б. форма____________________ Б. форма____________________
В. поверхность_______________ В. поверхность_______________
Г. цвет _____________________ Г. цвет ______________________
Д. прозрачность______________ Д. прозрачность_______________
Е. гемолиз ___________________ Е. гемолиз ___________________
б) мазки из колоний стафилококков и стрептококков, окрашенных по Граму, зарисовать;
в) определение плазмокоагулирующей активности стафилококков, выросших на кровяном MПА. Для опыта брать золотистые или белые колонии, окруженные зонами гемолиза.
Методика определения плазмокоагулазы
На предметное стекло палочкой нанести каплю плазмы и в нее внести полную петлю культуры стафилококков. При положительной реакции через 3 –5 минут образуются хлопья.
