35. Зависимость скорости ферментативной р-ции от концентрации субстрата. Графики Михаэлиса-Ментен и Лайнуйвера-Бэрка. Медико-биологическое значение константы Михаэлиса.

Скорость ферментативной р-циизависит от концентрации фермента, концентрации субстрата, концентрации кофактора, концентрации продуктов р-ции, рН среды, температуры, присутствия ингибиторов или активаторов, а также от структуры субстрата, если фермент обладает относительной специфичностью действия. При повышении концентрации фермента (при избытке субстрата) скорость р-ции возрастает линейно. Накопление продуктов р-ции замедляет протекание р-ции, сдвигая ее в обратную сторону, продукты р-ции в случае их избытка могут также связываться с ферментом, коферментом, активатором и тем самым мешать протеканию р-ции.

График Михаэлиса. При увеличении концентрации субстрата сначала скорость ферментативной р-ции быстро возрастает, в дальнейшем притрост скорости замедляется и в конце концов прекращается (кривая Михаэлиса). Константа Михаэлиса (Кm) представляет собой ту концентрацию субстрата, при которой скорость р-ции составляет половину максимальной. Выражается в молях субстрата на литр. Величина Кmхар-ет каталитическую активность фермента: чем она меньше, тем выше активность фермента.

V

[S]

График Лайнуйвера-Бэрка.

36. Ингибирование ферментативной активности и его виды. Медико-биологическое значение ингибиторов.

Ингибитораминазывают в-ва, угнетающие каталитическую активность фермента.Обратимое ингибирование– ингибитор соединяется с ферментом не прочно, может диссоциировать из образовавшегося комплекса, или может быть вытеснен из него.Необратимое ингибированиехар-ся прочным связыванием ингибитора с ферментом.Конкурентное ингибированиевызывается действием в-в, являющихся структурными аналогами субстрата. Конкурентный ингибитор соединяется с активным центром фермента, подменяя собой субстрат. Степень ингибирования при этом зависит от соотношения концентраций субстрата и ингибитора, повышением концентрации субстрата можно вытеснить ингибитор и этим снять торможении р-ции.Неконкурентное ингибирование– ингибитор не имеет структурного сходства с субстратом и присоединяется к ферменту одновременно с субстратом, при этом возникает тройной комплекс фермент-субстрат-ингибитор. Ингибитор присоединяясь в области активного центра изменяет конформацию ферментной молекулы, что ведет к потере каталитической активности. Неконкурентными ингибиторами являются ионы тяжелых металлов и цианиды.Бесконкурентное ингибирование– ингибитор не может реагировать с ферментом, соединяется с фермент-субстратным комплексом, подавляя протекание р-ции.Субстратное ингибирование– возникает при избыточной концентрации в среде субстрата. К ферменту присоединяется добавочная молекула субстрата, образуется непродуктивный фермент-субстратный комплекс.Аллостерическое ингибирование– проявляется при присоединении к алостерическому центру фермента отрицательного эффектора (модуллятора), что ведет к конформационным перестройкам в молекуле фермента, захватывающим его активный центр.