Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Лекция по биотехнологии №3.doc
Скачиваний:
218
Добавлен:
25.03.2015
Размер:
249.34 Кб
Скачать

Аллерген сухой очищенный комплексный из атипичных микобактерий (кам)

Многочисленными научными и практическими исследованиями и наблюдениями отечественных и зарубежных авторов выявлено, что в ряде случаев здоровые животные, а также больные, но не инфицированные возбудителем туберкулеза животные, реагируют на туберкулин положительно. Было установлено, что причиной такого явления является сенсибилизация животных атипичными, сапрофитными микобактериями, обитающими в окружающей среде. Особенно много таких микобактерий содержится в торфяных почвах. Кроме того, причиной неспецифических реакций на туберкулин у животных является ухудшение условий их содержания и кормления. Авторам данного руководства известны неопубликованные исследования их учителя — заслуженного деятеля науки, профессора, крупного патанатома страны Александра Николаевича Смирнова, который в 1964—1968 годах доказал, что при добавке в силос мочевины здоровый крупный рогатый скот может положительно реагировать на туберкулин.

Проблема неспецифических реакций обострилась на фоне общего успеха в борьбе с туберкулезом (Шаров А. Н., Тырина В. С., Ерошенко Л. А., Шевырев Н. С. и др., 1996). Наиболее распространенным методом дифференциации специфических и неспецифиче¬ких реакций у животных является симультанная проба с туберку линами для млекопитающих и для птиц. Не вдаваясь в технологию ее проведения, следует отметить то, что по более выраженной реакции на тот или другой аллерген делают заключение о сенсибилизации. Но такая проба не дает достоверных результатов при сенсибилизации млекопитающих сапрофитными микобактериями и микобактериями группы avium intracellulare. Исследования,проведенные на Курской биофабрике, показали, что более выраженными дифференцирующими свойствами в симультанной пробе с туберкулином для млекопитающих обладает комплексный аллерген из атипичных сапрофитных микобактерий (КАМ).

При разработке этого аллергена основными трудностями были подбор производственных штаммов, которые бы обеспечили широкий диапазон групповой специфичности аллергена, создание методики контроля активности и видовой специфичности препарата.

Общая технология получения аллергена КАМ выражается следующими этапами. Культуры атипичных сапрофитных микобактерий выращивают на синтетических питательных средах, приготовленных по рецептуре специалистов Курской биофабрики. После раздельного культивирования таких микобактерий белок профильтрованной жидкости осаждают трихлоруксусной кислотой, проводят очистку белка переосаждением сульфатом аммония с последующим диализом для удаления сульфатов через диализную или белкозиновую ленту. Затем у каждого моноаллергена определяют содержание ЕД в мл концентрата белков каждого вида сапрофитных атипичных микобактерий на морских свинках, просенсибили- зированных гомологичными штаммами, в сравнении с референтными известной активности сериями этих препаратов. Моноаллергены смешивают в равных дозах по содержанию ЕД препаратов. Полученный препарат разливают в ампулы или флаконы и подвергают лиофильной сушке, после чего его контролируют на стерильность, активность и видовую специфичность.

Готовый препарат представляет собой белковые фракции фотохромогенных и нефотохромогенных атипичных микобактерий, выделенных из культуральной жидкости указанных микроорганизмов, выращенных в специальных синтетических питательных средах и смешанных в равных количествах по содержанию единиц действия '(ЕД) моноаллергенов.

На введение КАМ млекопитающим на него интенсивно реагируют животные, сенсибилизированные как различными атипичными микобактериями, так и птичьими микобактериями группы avium interacellulare.

25