Влияние распашки на биохимические свойства черноземов Юга России. Монография
.pdfразцы и на естественно-влажные образцы, хранимые в условиях низких положительных температур (холодильник).
Образцы почвы для исследования отбирались из пахотных горизонтов на глубину вспахивания (20 - 30 см). На целинных или залежных участках образцы отбирали не только из верхних горизонтов почв, а из всего гумусового профиля (А+АВ). В отдельные сроки были заложены полнопрофильные разрезы. Во всех случаях в верхних горизонтах дополнительно отбирались почвенные образцы из прикопок.
Сроки отбора образцов на изучаемых участках совпадали и выбирались, согласно рекомендациям, изложенным выше.
Почвенные образцы высушивались при комнатной температуре, при необходимости они подвергались хранению в условиях низких положительных температур (холодильник). Определение активности ферментов проводили с одинаковой навеской (1 г) свежей воздушно-сухой, очищенной от растительных остатков и камней, почвы, просеянной через сито диаметром отверстий 1 мм, при постоянной температуре 30°С (кроме каталазы — 20°С, активность которой определяется газометрически).
Показатели ферментативной активности почв характеризуются значительным варьированием. Динамичность их связывают с зависимостью от сочетания температуры и влажности, наличием доступных источников питательных веществ и жизнедеятельностью микроорганизмов (Зайцева, Звя-
гинцев, 1979; Ross, 1987; Patra et al., 1990). Высокая степень варьирования активности почвенных ферментов требует обязательного проведения статистического анализа.
Статистическая обработка результатов исследования осуществлена с использованием статистического пакета Statistica 10.0. Проведен расчет следующих основных показателей вариационной статистики: среднее ± среднего (M± m), стандартное отклонение (s), коэффициент вариации (CV) (Дмитриев, 2010). При обработке результатов исследования использовали как дисперсионный, так и корреляционный анализы. Чувствительность исследуемых показателей оценивали по степени их снижения в ответ на антропогенное воздействие - распашку.
51
ГЛАВА 5. ВЛИЯНИЕ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ – РАСПАШКИ НА ФЕРМЕНТАТИВНУЮ АКТИВНОСТЬ ЧЕРНОЗЕМОВ РОСТОВСКОЙ ОБЛАСТИ
5.1. АКТИВНОСТЬ ПЕРОКСИДАЗЫ И ПОЛИФЕНОЛОКСИДАЗЫ В ПАХОТНЫХ ЦЕЛИННЫХ И ЗАЛЕЖНЫХ ЧЕРНОЗЕМАХ
Содержание гумуса - ключевой показатель плодородия и состояния почв, определяющий выполнение ею экологических функций. Это важнейший признак определяющий устойчивость почв и их нормальное функционирование (Деградация и охрана..., 2002). В черноземах гумусообразование и гумусонакопление достигают максимальной интенсивности и совершенства. Однако в связи с интенсивным сельскохозяйственным использованием в этих почвах заметно ухудшаются качественно-количественные показатели гумуса (Русанов, 1999).
Определение активности окислительных ферментов полифенолоксидазы и пероксидазы, участвующих в процессах гумусообразования, является дополнительной характеристикой процессов синтеза и распада гумусовых веществ. Полифенолоксидаза катализирует окисление полифенолов в хиноны в присутствии свободного кислорода воздуха. Полифенолоксидаза играет ключевую роль в круговороте ароматических соединений. Пероксидаза же катализирует окисление полифенолов в присутствии перекиси водорода или органических перекисей. При этом ее роль состоит в активировании перекисей, поскольку они обладают слабым окисляющим действием на фенолы (Кононова, 1963).
Как демонстрируют рисунки 1 и 2, активность пероксидазы и полифенолоксидазы на пашне выше, чем на нераспахиваемых участках на 21-40% и 34-37% соответственно. При этом содержание органического вещества наоборот выше на почвах под степной растительностью на 43-58% (рис. 3). Следовательно, процессы новообразования гумуса и его разложения в почвах пашни протекают намного интенсивнее, чем в почвах под естественными сообществами. Если сравнивать между собой степной и залежный участок, то можно сказать, что целинный чернозем по изученным показателям опережает чернозем залежи (рис. 1-3).
52
Рис. 1. Активность пероксидазы в пахотном целинном и залежном черноземе учхоза «Донское» ДонГАУ и УОХ ЮФУ, 1-4 парабензохинона
на 1 г почвы за 30 мин
Рис. 2. Активность полифенолоксидазы в пахотном целинном и залежном черноземе учхоза «Донское» ДонГАУ и УОХ ЮФУ, 1-4 парабензохи-
нона на 1 г почвы за 30 мин
Активность фенолоксидазы и пероксидазы в почве зависит от типа землепользования и интенсивности воздействия (Sinsabaugh, 2010). Распашка почв приводит к потере органического вещества почвы, особенно лабильного органического вещества. Эти изменения сопровождаются повышением полифенолоксидазы (Waldrop et al., 2000). Хотя есть и противоположные результаты – интенсивное сельскохозяйственное использование
53
снижает активность полифенолоксидазы (Monkiedje et al., 2006). Для активности пероксидазы данные также противоречивы (Sinsabaugh, 2010).
Рис. 3. Содержание гумуса в пахотном целинном и залежном черноземе учхоза «Донское» ДонГАУ и УОХ ЮФУ, %.
Длительная распашка чернозема обыкновенного приводит к снижению содержания органического вещества более чем на 40% (рис.3). По литературным данным (Laiho, 2006; Sinsabaugh, 2010) потеря органического вещества при распашке, приводит к повышению интенсивности окислительных процессов в почве. Причем в аридных экосистемах высокая температура и низкая влажность приводят к окислительному стрессу, который интенсифицирует выработку фенолоксидаз.
На активность пероксидазы и полифенолоксидазы, помимо содержания органического вещества, оказывает значительное влияние рН почвы, температура и влажность. То в какую сторону произойдет изменение активности этих ферментов при распашке, зависит от сочетания этих факторов. Множественная модель линейной регрессии, которая включает рН почвы, среднегодовую температуру и среднегодовое количество осадков и активность ферментов показала зависимость от содержания гумуса активности полифенолоксидазы только на 36%, а для пероксидазной активности 32% (Sinsabaugh, 2010). Множественная корреляция с тремя другими переменными имеет коэффициент 0,52. Эта модель предполагает, что актив-
54
ность фенолоксидаз и пероксидазы может иметь положительные или отрицательные связи при различных сочетаниях экологических переменных.
Внекоторых отклики активности ферментов могут быть объяснены зависимостью от рН почвы, температуры или влажности. Но в более широком масштабе, величина и направление ответов варьирует в зависимости от микробного и растительного состава сообществ (Sinsabaugh, 2010).
Внаших исследованиях корреляционный анализ показал, достоверную отрицательную зависимость активности пероксидазы и полифенолоксидазы от влажности (коэффициенты корреляции соответственно равны - 0,64 и
-0,62). Зависимость от содержания гумуса составила - 0,55 и - 0,60 (табл.7).
Таблица 7 Корреляционная матрица свойств чернозема обыкновенного Персианов-
ской степи, n = 130
|
|
гумус |
темп |
влаж |
рН |
ПО |
ПФО |
каталаза |
инвертаза |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
гумус |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
температура |
-0,02 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
влажность |
0,37 |
-0,62 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
рН |
-0,01 |
-0,17 |
0,02 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ПО |
-0,55 |
0,19 |
-0,64 |
0,00 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ПФО |
-0,60 |
0,18 |
-0,62 |
-0,19 |
0,66 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
каталаза |
0,19 |
-0,21 |
0,38 |
0,29 |
-0,33 |
0,08 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
инвертаза |
0,89 |
-0,03 |
0,26 |
0,05 |
-0,65 |
-0,57 |
0,25 |
|
|
|
|
|
||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ДГ |
0,33 |
0,38 |
-0,13 |
-0,04 |
0,06 |
0,32 |
0,21 |
0,33 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Принимая во внимание неоднозначный характер изменений активности пероксидазы и полифенолоксидазы при распашке, и их зависимость от климатических факторов, мы провели исследование сезонной динамики. Как демонстрируют рисунки 4 и 5, активность пероксидазы и полифенолоксидазы в различные месяцы выше в пахотном черноземе, хотя степень превышения меняется в зависимости от сезона года (т.е. от сочетания температуры и влажности в первую очередь).
55
Рис. 4. Динамика активности пероксидазы в пахотном и целинном черноземе учхоза «Донское» ДонГАУ, 1-4 парабензохинона на 1 г почвы за 30 мин
Рис. 5. Динамика активности полифенолоксидазы в пахотном и целинном черноземе учхоза «Донское» ДонГАУ, 1-4 парабензохинона на 1 г почвы за
30мин
Вотдельные месяцы мы видим, что различия в активности этих ферментов на пашне и нераспахиваемых участках не являются значимыми (р>0,05), особенно для активности пероксидазы. Можно сделать вывод о нецелесообразности использовании активности пероксидазы и полифенолоксидазы в целях диагностики изменений почв при их сельскохозяйственном освоении.
56
Активность пероксидазы и полифенолоксидазы выше в почвах пашни, но только в верхних горизонтах, подвергающихся непосредственному воздействию (рис. 6-7; 9-10). На глубине 40-50 см активность этих ферментов в черноземе пахотного и целинного участка (рис. 6-7) и пахотного и залежного участка практически не отличается. Хотя различия в содержании гумуса на этой глубине еще значительны (рис. 8, 11).
Рис. 6. Активность пероксидазы в пахотном и целинном черноземе учхоза «Донское» ДонГАУ, 1-4 парабензохинона на 1 г почвы за 30 мин
Рис. 7. Активность полифенолоксидазы в пахотном и целинном черноземе учхоза «Донское» ДонГАУ, 1-4 парабензохинона на 1 г почвы за 30 мин
57
Направленность процессов гумусообразования и разложения органических веществ и их интенсивность определяется сочетанием почвенных и климатических факторов. Действие климатических факторов с глубиной выравнивается, что возможно и объясняет схожесть в уровнях активности изучаемых ферментов на глубине 40-50 см.
Рис. 8. Содержание гумуса в пахотном и целинном черноземе учхоза «Донское» ДонГАУ, %
Рис. 9. Активность пероксидазы в пахотном и залежном черноземе УОХ ЮФУ, 1-4 парабензохинона на 1 г почвы за 30 мин
58
Рис. 10. Активность полифенолоксидазы в пахотном и залежном черноземе УОХ ЮФУ, 2013 г., 1-4 парабензохинона на 1 г почвы за 30 мин
Рис. 11. Содержание гумуса в различных горизонтах пахотного и залежного чернозема УОХ ЮФУ, 2013 г., %
Применение профильного подхода позволило произвести пересчет активности изученных ферментов на весь гумусовый профиль (рис. 12-13). Особый характер профильного распределения активности пероксидазы и полифенолоксидазы отразился на их «запасах». При учете всего гумусового профиля, отличия между пахотным и целинным, а также пахотным и залежным участками становятся незначительными. Запасы гумуса при этом в изученных черноземах разного вида землепользования отличаются значи-
59
тельно (рис. 14) Этот факт еще в большей степени затрудняет использование активности этих ферментов в диагностических целях.
Рис. 12. Активность пероксидазы в пахотном целинном и залежном черноземе учхоза «Донское» ДонГАУ и УОХ ЮФУ в пересчете на весь гумусовый профиль
Рис. 13. Активность полифенолоксидазы в пахотном целинном и залежном черноземе учхоза «Донское» ДонГАУ и УОХ ЮФУ в пересчете на весь гумусовый профиль
60
