Вияние орхидэктомии на иммунный статус мышей гибридов F1. Монография

3. ВЛИЯНИЕ ОРХИДЭКТОМИИ НА ЦЕНТРАЛЬНЫЕ И ПЕРИФЕРИЧЕСКИЕ ОРГАНЫ

ИММУНИТЕТА

Известно, что половые стероидные гормоны влияют на органы и ткани иммунной системы, и это влияние обеспечивается рецепторно-опосредованным путем (McDonnell, 2000). Так, у многих видов млекопитающих половое развитие приводит к возрастной атрофии тимуса (Sempowski et al., 2002; Steffens et al., 2000). Введение экзогенных половых гормонов в дозах, превышающих физиологические, вызывает атрофию тимуса (Savino, Dardenne, 2000). В результате кастрации самцов и самок возрастная атрофия тимуса отменяется и происходит увеличение его массы (Kendall, 1990; Olsen, Kovacs, 1996).

Сроки максимального увеличения массы тимуса у животных различных видов в литературных источниках сообщаются разные. Нами предварительно было установлено, что у мышей В6D2F1 срок максимального увеличения массы тимуса после кастрации самцов наступает на 5-й неделе. Именно этот срок был выбран для определения параметров иммунитета и индукции РТПХ.

3.1. Влияние орхидэктомии на концентрацию тестостерона в сыворотке крови

У животных после кастрации происходит снижение концентрации тестостерона в простате, семенных пузырьках, семенной жидкости и сыворотке крови (Kashiwagi et al., 2005). Так, через 3 ч после кастрации у самцов крыс содержание тестостерона в сыворотке крови составляло менее 1,73 нмоль/л, тогда как до операции этот показатель был около 6,9 нмоль/л (Kashiwagi et al., 2005). У NOS-2-

51

нмоль/л, тогда как у контрольных мышей 54 нмоль/л. Через 12 недель после кастрации концентрация тестостерона остается сниженной в среднем в 4 раза и составляет около 13,5 нмоль/л.

Таким образом, гонадэктомия приводит к достоверному снижению содержания тестостерона в сыворотке крови.

3.2. Влияние орхидэктомии на количество лейкоцитов, относительное количество лимфоцитов в периферической крови и массу тела

Как известно, кастрация приводит к различным изменениям в обмене веществ, структуре и функции органов и тканей организма. Одним из результатов кастрации является изменение липидного обмена и, как следствие, увеличение массы тела продуктивных и непродуктивных животных

(Мануилова, 1966; Ермоленко, 1973; Fettman et al., 1997; Kanchuk et al., 2002; Nguyen et al., 2004). Тем не менее, у

мышей не было обнаружено изменения массы тела после гонадэктомии (Eidinger, Garett, 1972). Для изучения влияния гонадэктомии на массу тела самцов B6D2F1 нами проводилось взвешивание животных через 12 и 16 недель после проведения операции, и она составила 31,5 и 29,5 мг соответственно при 34,35 в контроле.

Как свидетельствуют полученные результаты, через 12 и 16 недель после гонадэктомии не отмечалось достоверного изменения массы тела животных.

Мы исследовали количество лейкоцитов и относительное количество лимфоцитов в периферической крови в разные сроки после кастрации.

Установлена тенденция к увеличению абсолютного количества лейкоцитов в периферической крови. Как видно из данных табл. 1, достоверно повышалось относительное количество лимфоцитов в периферической крови через 5 и 12

53

недель после кастрации. Относительное количество лимфоцитов в крови гонадэктомированных животных было в среднем в 1,3 раза выше, чем у интактного контроля. Разница в показателях абсолютного количества лимфоцитов в периферической крови у гонадэктомированных и интактных животных не являлась достоверной, тем не менее, отмечалась тенденция к повышению абсолютного количества лимфоцитов в сыворотке крови у гонадэктомированных животных.

Таблица 1

Количество лейкоцитов и лимфоцитов в периферической крови, масса тимуса, селезенки, количество клеток в тимусе и селезенке в динамике посткастрационного периода

54

Таким образом, кастрация приводит к достоверному увеличению относительного количества лимфоцитов в периферической крови. Масса тела после кастрации достоверно не изменяется.

3.3. Влияние орхидэктомии на массу и количество клеток в тимусе

Рецепторы андрогенов находятся на лимфоидных и эпителиальных клетках тимуса (Olsen, Kovacs, 2001). Андрогенные рецепторы играют важную роль в действии половых стероидных гормонов на процесс возрастной инволюции тимуса (Cavengh et al., 1997). Снижение концентрации половых гормонов после кастрации приводит к отмене инволюции тимуса и увеличению его массы (Ellis et al., 1997).

Результаты исследования массы и абсолютного количества ядросодержащих клеток тимуса у самцов BDF1 через 5 и 12 недель после кастрации представлены в табл. 1 и на рис. 3, 4.

*Р<0,001; **Р<0,05

Рис. 3. Масса тимуса в динамике посткастрационного периода

55

Общее количество ядросодержащих клеток в тимусе у кастрированных мышей в среднем было в 2,6 раза больше, чем у контрольных животных, через 5 недель после кастрации (157 x 106 в опытной группе и 47,9 x106 в контрольной) и в 1,4 раза выше через 12 недель (65,2 x 106 в опытной группе) (см. табл. 1, рис. 4). По данным S. Aboudkhil et al. (1991), у мышей BDFI через 2 недели после кастрации количество клеток в тимусе составляет 88,9х106, тогда как у контрольных мышей 53,4 х106.

Таким образом, после кастрации в динамике отмечается достоверное увеличение массы и количества ядросодержащих клеток в тимусе.

3.4. Влияние орхидэктомии на массу и количество ядросодержащих клеток в селезенке

В работах ряда исследователей установлено повышение массы селезенки после гонадэктомии на 10-й и 12-й неделях

(Eidinger, Garett, 1972; Ellis et al., 1976; Leposavic et al., 1995).

Рис. 5. Масса селезенки после гонадэктомии в динамике

57

4. ВЛИЯНИЕ ОРХИДЭКТОМИИ НА ПАРАМЕТРЫ ГУМОРАЛЬНОГО И КЛЕТОЧНОГО ИММУННОГО ОТВЕТА

Физиологический уровень тестостерона обладает ингибирующим влиянием на гуморальный иммунный ответ

(Chao, 1996; Wichmann et al., 1996). Уменьшение продукции тестостерона приводит к усилению В-лимфопоэза и повышению числа периферических В-клеток (Smithson et al., 1994; Viselli et al., 1995), а также повышенной продукции В- клеток в костном мозге (Erlandsson et al., 2001). Усиление В- лимфопоэза может приводить к увеличению антителообразования.

Чтобы оценить интенсивность гуморального иммунного ответа, определяли количество IgM- и IgGантителобразующих клеток в селезенке in vivo, а также уровень IgЕ в сыворотке крови в различные сроки после кастрации. Для оценки клеточного иммунного ответа определяли степень выраженности гиперчувствительности замедленного типа в разные сроки после кастрации.

4.1. Влияние орхидэктомии на количество IgM-антителообразующих клеток на Т-зависимый антиген при первичном гуморальном иммунном ответе

Имеются данные о повышении продукции иммуноглобулинов класса М и G на тимуснезависимые и тимусзависимый антигены при первичном и вторичном иммунном от-

вете (Eidinger, Garet, 1972).

Параметры первичного (IgM-АОК) гуморального иммунного ответа на Т-зависимый антиген (ЭБ) исследовали в динамике посткастрационного периода через 5 и 12 недель после операции.

59