Переливание крови

32

При ручном методе исследования (можно с помощью автоматической системы) необходимо аккуратно удалить металлическую пленку, закрывающую микропробирки и в каждую микропробирку добавить по капле суспензии эритроцитов. Затем провести цетрифугирование в центрифуге для карт DG Gel.

Считывать результаты рекомендуется непосредственно после проведения центрифугирования карты. Не следует оставлять обработанные карты в горизонтальном положении. При вертикальном хранении карт оценку результатов можно давать в течении 24 часов, при условии их хранения при температуре +2-

8 .

Реакция агглютинации считается положительной, если агглютинация отмечается на разных уровнях в колонке (чувствительность от +/- до 3+),

отрицательной – если слой эритроцитов располагается на дне колонки и при этом отсутствует агглютинация на остальной площади колонки (см. рис. 3 и табл. 6).

Считывание результатов

33

Примечание:

1.Микропробирка Ctl. (контроль) должна давать отрицательный результат. Если результат положительный, данные теста считаются недействительным. 2.Отрицательные реакции с анти-D-реагентом должны быть проверены при использовании других реагентов и методов, в результате которых могут быть выявлены различные варианты D-антигена.

̒

3. При получении расходящихся результатов в микропробирках D и D, их необходимо рассматривать как слабый, либо частичный D-антиген.

Рекомендуется проанализировать экспрессию данного антигена.

4.Система AB0/ Rh: в случае реакции от +/- до 3+, необходимо исследовать наличие слабого антигена.

5. Наблюдение полного либо частичного гемолиза ( розовая надосадочная жидкость и/или гелевая колонка) в микропробирках должно рассматриваться как положительный результат, если вы убедитесь в том, что это не является следствием проблем при взятии и/или обращением с образцами.

6.Время от времени, результатом продолжительного нахождения эритроцитов в инкубационной камере могут стать положительные результаты 4+, но это не влияет на считывание результатов.

7.Результаты как таковые не могут рассматриваться в качестве диагноза. Они должны быть проанализированы наряду с клинической информацией и другими данными пациента.

8.Нельзя использовать гелевую карту после истечения срока годности ( указано на карте).

34

Рис.4.

Определение резус-фактора

Определение резус-принадлежности обычно производится в лаборатории и врач, переливающий кровь, как правило пользуется заключением лаборатории. В

отдельных случаях (профузное желудочное кровотечение и др.) определяют резус-фактор экспресс-методом на плоскости при комнатной температуре с помощью сывороток, приготовленных альбумине или полиглюкине.

Техника определения резус-фактора экспресс-методом:

Кровь берут из пальца непосредственно перед определением. На тарелку слева наносят каплю стандартной сыворотки анти-резус IV (AB) группы и параллельно (справа) наносят каплю резус-отрицательной сыворотки IV (AB)

группы, не содержащей антител. Рядом с ними помещают по одной капле крови реципиента в количестве 0,5 от объема взятой сыворотки. Индивидуальными стеклянными палочками или углами предметного стекла тщательно перемешивают кровь с сыворотками в течении 3-4 мин, после чего добавляют по одной капле физиологического раствора хлорида натрия, по истечении 5 минут

35

учитывают реакцию. При наличии агглютинации эритроцитов с сывороткой анти-

резус и отсутствия с контрольной сывороткой – кровь резус-положительная, при отсутствии агглютинации с обеими сыворотками – кровь резус-отрицательная.

12.Определение группы крови донора (во флаконе)

Несмотря на наличие сведений о группе крови на этикетке упаковки, необходимо непосредственно перед переливанием определить группу крови из флакона.

Определение группы крови донора (во флаконе) выполняется так же как определение группы реципиента (см. определение группы крови реципиента).

13.Общие сведения о пробах на совместимость переливания крови.

Антитела системы AB0 α и β – являются врожденными у человека. Они представляют собой агглютинина, вызывающие склеивание несовместимых эритроцитов в прямой реакции между сывороткой и эритроцитами. Эта реакция хорошо протекает на плоскости при температуре около 20 и поэтому при этих же условиях производится проба на совместимость по группам крови AB0.

Пробы на совместимость по группам крови AB0 и резус-антигену D

проводится отдельно и не могут заменить друг друга, так как антитела разного характера требуют разных методов для своего выявления.

Для проб на совместимость используется сыворотка крови реципиента и кровь донора.

Получение сыворотки больного и крови донора. Для получения сыворотки больного берут 4-5 мл крови без стабилизатора в пробирку, на которой надписывают фамилию и инициалы реципиента, группу его крови и дату. При этом врач должен лично убедиться в том, что надписи на пробирке сделаны правильно и относятся к тому больному, у которого взята кровь.

Через 1-2 минуты пробирку с кровью сильно встряхивают для отделения свёртка от стенок пробирки или обводят его сухой стеклянной палочкой.

После ретракции свёртка от него отделяется сыворотка, которая и служит для пробы на совместимость. (Если необходимо ускорить отделение сыворотки,

пробирку с кровью центрифугируют около 5 минут. При 2000-3000 об/мин.)

36

Кровь доноров получают из контейнера, который подготовлен для переливания.

Для этого кровь выпускают через иглу в небольшом количестве (5-10 капель) в

пробирку или на пластинку, на которой будет проводиться проба. На пробирке

(пластинке) надписывают фамилию, инициалы донора, группу его крови и номер контейнера. При этом врач должен убедиться в том, что на пробирке (пластинке)

правильно написаны все сведения о доноре, имеющиеся на контейнере, из которого получена кровь.

Если больному переливается кровь из нескольких флаконов (контейнеров), пробы на совместимость должны быть сделаны с кровью из каждого флакона, даже если на них обозначено, что кровь получается от одного и того же донора.

Сыворотка больного должна быть свежей, полученной в тот же день, когда делается переливание крови, или накануне при условии сохранения её при температуре 4-8 . Исключением являются сроки взятия сыворотки для проведения пробы на совместимость у больных с гемотрансфузионными осложнениями.

14. Проведение проб на совместимость.

а) для проведения проб на индивидуальную совместимость по группе системы АВО из вены берут 3-5 мл крови и центрифугируют (или отстаивают) для получения сыворотки. На тарелку или планшет наносят каплю крови донора и каплю сыворотки в соотношении 1:5 или 1:8 с помощью стеклянной палочки или края предметного стекла смешивают кровь с сывороткой и после наблюдения в течение 5 минут добавляют каплю физиологического раствора хлорида натрия.

Результат реакции оценивают по наличию или отсутствию агглютинации.

Отсутствие агглютинации свидетельствует о групповой совместимости донора и реципиента, наличие её - о несовместимости. Пробу на индивидуальную совместимость необходимо проводить с каждой новой ампулой переливания крови.

б) проба на совместимости крови донора и реципиента по резус-фактору выполняется одним из двух способов:

1 способ. Проба с использованием 33% раствора полиглюкина.

37

Проба проводится в пробирке без подогрева в течение 5 минут. Для пробы применяется 33% раствор полиглюкина, приготовленный специально для лабораторных целей.

Техника. Для исследования используют центрифужную или любую другую пробирку ёмкостью не менее 10 мл. на пробирке надписать фамилию, инициалы,

группу крови больного и донора, номер контейнера с кровью. На дно пробирки,

на которой предварительно сделаны соответствующие обозначения, наносят 2

капли сыворотки больного, 1 каплю донорской крови и 1 каплю 33% раствора полиглюкина, специально приготовленного для лабораторных целей.

Содержимое пробирки перемешивают путём встряхивания, затем пробирку наклоняют до почти горизонтального положения и медленно поворачивают таким образом, чтобы содержимое растекалось по стенкам пробирки. Эту процедуру продолжают 5 минут, после этого в пробирку доливают 304 мл изотонического раствора хлорида натрия, перемешивают содержимое путём 2-3х кратного перевёртывания пробирки (не взбалтывать!) и просматривают на свет невооружённым глазом.

Оценка результатов: наличие агглютинации эритроцитов на фоне просветлённой или полностью обесцвеченной жидкости указывает на то, что кровь не совместима по резус-фактору и перелита быть не может.

2 способ. Проба с использованием 10% раствора желатина.

Выполняется в пробирках при температуре +46 - +480 С в течение 10-15 минут. На дно пробирки, соответственно обозначенной, помещают 1 каплю эритроцитов донора, предварительно отмытых десятикратным объемов раствора гидрохлорида натрия, затем добавляют туда 2 капли подогретого до разжижения 10% раствора желатины и 2-3 капли сыворотки больного. Содержимое пробирки перемешивают путем встряхивания и помещают в водяную баню при температуре

+46 - +480 С на 10 минут. Затем пробирку извлекают из водяной бани, добавляют в нее 5-8 мл хлорида натрия 0,9 % перемешивают путем 1-2 –х кратного проворачивания прпобирки по оси и просматривают невооруженным глазом или через лупу.

38

Оценка результатов: при наличии агглютинации – кровь несовместима и переливать ее больному нельзя!!!

Просьба на совместимость по резус-фактору на «водяной бане» (проба Т.Г.Соловьевой) в настоящее время не рекомендуется для применения (из-за недостаточной информативности) и применяется только в тех случаях, когда отсутствуют растворы полиглюкина и желатиноля.

Техника ее выполнения заключается в следующем:

На маркированную чашку Петри берут каплю сыворотки больного и добавляют в 8-10 раз меньшего объема каплю крови донора, тщательно перемешивают стеклянной палочкой и ставят на водяную баню (ёмкость с водой

45-47°). Через 10 минут оценивают результат. Наличие реакции агглютинации указывает на то, что кровь донора и больного несовместимы по резус-фактору.

Переливать кровь от данного донора нельзя!

в) проба на биологическую совместимость выполняется у постели больного после подключения системы для трансфузии. Проба выполняется при переливании крови и ее компонентов (эритроцитарная масса, эритроцитарная взвесь, плазма).

Для этого первые 15-20мл крови вводят струйно, а затем с помощью зажима останавливают переливание на 3-5 минут., наблюдая в это время за состоянием больного (поведение, жалобы, болей за грудиной, в пояснице, появление учащенного пульса и дыхания, тошноты рвоты, изменение окраски кожных покровов и слизистых). При отсутствии изменения в состоянии больного

(признаки совместимости) пробу повторяют еще дважды и, если реакция отсутствует, продолжают гемотрансфузию.

При использовании эритроцитов, освобожденных от плазмы (отмытых,

размороженных), эритроциты группы 0(I) являются как бы универсальной трансфузионной средой и могут быть перелиты реципиенту любой группы.

Реципиенты группы AB(IV), в крови которых не содержится групповых антител,являются как бы универсальными реципиентами и им могут быть перелиты эритроциты любой группы крови, освобожденные от плазмы.

15. Учет трансфузионного и акушерского анамнеза.

39

Если больной получал трансфузии крови, одноименной или совместимой по группам крови системы AB0 и резус принадлежности D, но, несмотря на это,

трансфузии осложнялись реакциями или осложнениями, это указывает на возможную сенсибилизацию больного к другим антигенам системы резус или к антигенам других систем и на совместимость для него крови, содержащей эти антигены. Наличие указаний на возможную сенсибилизацию требует дальнейшего исследования крови реципиента и, если будут найдены антитела, то потребуется индивидуальный подбор крови.

Использование подобранной крови :

Как специальный, так и индивидуальный подбор крови, проводимый на СПК

(ОПК), является предварительной процедурой. Врач трансфузиолог, получив флакон с кровью, должен во избежание ошибки сверить паспортные данные на флаконе с данными о крови больного в истории болезни, произвести контрольные реакции определение группы крови больного и донора на совместимость. При совпадении группы крови и резус-принадлежности больного и донора и отсутствии агглютинации в пробах на совместимость, врач может приступить к переливанию крови.

Особенность пробы на совместимость у больных с гемотрансфузионными

осложнениями.

У больных, перенесших гемотрансфузионные осложнения, происходят характерные серологические сдвиги, заключающиеся в том, что в период до 10-20

дня идет нарастание сенсибилизации, выражающееся в повышении титра антител,

послуживших причиной осложнения, и в появлении антител другой специфичности.

После 20-го дня начинается постепенное снижение титра антител и исчезновение их в порядке, обратном появлению. Поэтому, таким больным в период нарастания сенсибилизации пробу на совместимость следует проводить с сывороткой,

полученной от них непосредственно в день проведения трансфузии крови или не далее чем накануне. Пи переливании крови после 20-го дня, кроме этой пробы,

желательно дополнительно проводить пробу на совместимость с порцией

40

сыворотки, заготовленной на высоте сенсибилизации (10 – 20-й день). Это дает возможность предупредить переливание больному крови, содержащей антиген,

против которого у него совсем недавно имелись антитела.

16. Основные требования при гемотрансфузии

Самыми важными показателями, позволяющими судить о совместимости переливаемой крови (эритроцитов) являются совместимость по группе крови AB0 и

совместимость по резусантигену D.

Для обеспечения совместимости переливаемой крови необходимо на основание определения группы крови реципиента и записи в истории болезни, а

также документации на контейнере с кровью, правильно выбрать кровь в отношении групп крови системы AD0 и резус-принадлежности.

Непосредственно перед переливанием крови, независимо от проведенных ранее исследований и имеющихся записей, врач обязан снова проверить групповую принадлежность реципиента и крови донора, выполнить пробу на совместимость по группам крови AB0 и одну из проб на совместимость по резус антигену D.

Врач должен предусмотреть возможность несовместимости по отношению к другим антигенам и принять меры для ее предупреждения. Если кровь (эритроциты)

донора оказалась несовместимой с кровью реципиента в пробе на совместимость по группам AB0 или в пробе на совместимость по резус-антигену, она не должна быть ему перелита!

Если кровь (эритроциты) донора оказалась совместимой с кровью реципиента в пробах на совместимость по группам кровиAB0 и резус-антигену D и нет указаний на несовместимость по отношению к другим антигенам кровь (эритроциты) может быть перелита.

Введение донорской крови в организм больного следует начинать с биологической пробы.

Ответственным за выполнение перечисленных требований и обеспечение совместимости при переливании крови является врач, переливающий кровь.

17. Организация трансфузий в операционной.