Микробиология. Лекции / Zanyatie_3_Spory_PitSredy_VChK_1_den_03-2022_st
.pdf
Классификация питательных сред по назначению (2):
•элективные (избирательные) — служат для выделения определенного вида микробов, росту которых они благоприятствуют, задерживая или подавляя рост сопутствующих микроорганизмов. Среды становятся элективными при добавлении к ним определенных солей, антибиотиков, изменения pH. Жидкие элективные среды называют средами накопления.
•консервирующие — предназначены для транспортировки исследуемого материала.
NB! По каждому типу сред нужны примеры! (из более позднего материала...)
ч. 3
Метод выделения чистой культуры: общий принцип, значение в микробиологии
1-й день работы по ВЧК
Метод выделения чистой культуры:
общие моменты
•Метод ВЧК – это инструмент для открытия и изучения новых видов бактерий (+ триада Коха!)
•Метод ВЧК – это основа бактериологического метода диагностики инфекционных болезней – одного из ведущих в практической медицине
•Метод ВЧК – это последовательность действий, строго структурированных по дням и этапам работы (→ запоминать надо без «вариаций на тему»!)
Метод выделения чистой культуры:
основные этапы
•1-й этап (1-й день) – это работа с клиническим/ нативным материалом (его итог – посев материала на питательные среды для выращивания бактерий)
•2-й этап (2-й день) – это работа с выросшими изолированными колониями (его итог – выбор подозрительной колонии и ее отсев на скошенный агар)
•3-й этап (3-й – 4-й день) – это работа с чистой культурой (итог – видовая идентификация чистой культуры + определение ее антибиограммы и оформление ответа/заключения)
Этапы выделения чистой культуры бактерий
(далеко не идеальная схема из Интернета…)
Выделение чистой культуры бактерий: 1-й день
(работа с нативным/клиническим материалом)
1. Отбор проб
всоответствии с МУ 4.2.2039-
05,их доставка
влабораторию NB! это задача для персонала ЛПО → ……
2. Микроскопия мазков первичного материала (→ выбор питательной среды для посева)
3. Посев этого |
4. Инкубация |
материала на |
посевов в |
плотную пита- |
термостате |
тельную среду |
при |
→ механическое |
оптимальной |
разобщение |
температуре |
бактерий для их |
(и газовом |
изолированного |
составе!) |
роста |
|
|
|
Конкретика по п.3: для «разобщения» первичного материала на плотных средах можно использовать:
Шпатели бывают разные...
Посев петлей по Голду – быстрый и простой (если есть умелые руки!):
Наносят материал, делают 30-40 штрихов петлей в секторе А.
Прожигают петлю и выводят 4 штриха из сектора А в сектор I.
Вновь прожигают петлю и проводят 4 штриха из сектора I в сектор II.
То же – в сектор III.
Посев шпателем по методу Дригальского (более надежная методика):
Материал наносят петлей, а шпателем распределяют по всей поверхности агара
По методу пластинчатых разводок Коха материал разводят в расплавленном агаре и вливают в чашки (это самый точный метод!)
Нюансы 1-го дня работы по ВЧК:
1.Требования МУ 4.2.2039-05 по правилам сбора, срокам хранения и доставки материала – в будущем надо будет знать (д.б. лекция + стенд в коридоре)
2.Методы приготовления мазков из различных видов первичного материала: гноя, мокроты, крови, а также способы их фиксации – незабвенны, как оказывается!
3.Посев клинического материала проводится не только на плотные, но и на жидкие питательные среды –среды
накопления/обогащения (на случай, если жизнеспособность
бактерий снижена из-за проводимого лечения)
4.Надо уметь объяснять, при какой температуре идет инкубация посевов (и почему!)
5.И еще один момент: что делать с первичным материалом после проведения всех манипуляций 1-го дня?!