- •Подготовка к вирусологии Вирусология. Успехи и задачи вирусологии, ее связь с другими науками.
- •Особенности работы вирусологических лабораторий, оборудование. Техника безопасности при работе с вирусами.
- •Условия хранения и культивирования вирусов в лаборатории
- •Виды взаимодействия вирусов с клетками
- •Пути передачи вирусных болезней (примеры). Понятие о стерильном и нестерильном иммунитете. Вирусоносительство.
- •Устойчивость вирусов к химическим и физическим факторам. Инактивация вирусов полная и частичная (примеры).
- •Формы и строение вирионов. Размеры вирусов и способы их измерения
- •Генетика и изменчивость вирусов. Виды изменчивости и их практическое значение
- •Принципы получения живых противовирусных вакцин. Контроли вакцин (примеры).
- •Интерферон. Интерференция вирусов и практическое использование этого явления.
- •Неспецифические факторы противовирусного иммунитета и их роль в защите организма.
- •Специфические факторы иммунитета при вирусных болезнях и их роль в защите организма. Схема иммуногенеза.
- •Иммунитет, виды иммунитета
- •Противовирусный иммунитет и его особенности
- •Роль антител и фагоцитоза в противовирусном иммунитете.
- •Характеристика основных свойств вирусов.
- •Понятие о вирусах и их классификация. Назовите семейства рнк и днк-содержащих вирусов
- •Химический состав вирусов. Антигенное строение вирионов
- •Основные этапы репродукции (размножения) вирусов и их характеристика.
- •Основные этапы репродукции (размножения) ретровирусов.
- •Роль вируса, макроорганизма и условий внешней среды при вирусном инфекционном процессе.
- •Методы и последовательность проведения лабораторной диагностики патологического материала при вирусных болезнях (схема диагностики).
- •Особенности взятия, транспортировки и подготовки материала для проведения
- •Микроскопический метод исследования патматериала при вирусных болезнях. Окраска мазков на обнаружение телец-включений.
- •Биологические препараты, применяемые для лечения и профилактики вирусных болезней.
- •Устойчивость вирусов к физическим и химическим факторам, консервирование вирусов
- •Методы консервирования вирусов.
- •Методы очистки и концентрации вирусов.
- •Лабораторные животные, используемые для диагностики вирусных болезней. Подбор и методы заражения (примеры).
- •Назначение куриных эмбрионов (кэ) в вирусологии (примеры). Контроль и подготовка эмбрионов к заражению.
- •Методы заражения эмбрионов (рисунок куриного эмбриона), сбор вируссодержащего материала.
- •Понятие о культурах клеток. Назначение культур клеток в вирусологии, условия их приготовления.
- •Первично-трипсинизированные культуры клеток, методы их получения. Оценка клеточного монослоя.
- •Классификация культур клеток. Этапы получения субкультур
- •Методы заражения клеточных культур (кк). Определение результативности заражения клеточных культур вирусами.
- •Серологическая диагностика вирусных болезней. Сущность, виды и назначение серологических реакций.
- •Цель, сущность, техника постановки реакции диффузионной преципитации в агаровом геле (рдп) (рид). Учет реакции и контроли.
- •Цель, сущность, техника постановки и учет реакции гемагглютинации (рга).
- •Цель, сущность, техника постановки и учет реакции задержки (торможения) гемагглютинации (рзга, ртга).
- •Цель, сущность, техника постановки и учет реакции непрямой гемагглютинации (рнга).
- •Цель, сущность, техника постановки и учет реакции гемадсорбции (ргАд).
- •Цель, сущность, техника постановки и учет реакции задержки гемадсорбции (рзгАд).
- •Реакции связывания комплемента (рск) в диагностике вирусных болезней. Сущность, техника постановки и учет реакции.
- •Реакция нейтрализации (рн) в диагностике вирусных болезней. Варианты и этапы постановки, сущность и учет.
- •Цель, сущность, постановка и учет результатов иммуноферментного анализа (ифа).
- •Люминесцентная микроскопия в вирусологии. Метод флуорохромирования (мф) и методы флуоресцирующих антител (мфа).
- •Прямой метод флуоресцирующих антител (мфа), его сущность и техника постановки.
- •Непрямые методы флуоресцирующих антител (мфа). Их сущность и техника постановки.
- •Цель постановки, компоненты и сущность полимеразной цепной реакции (пцр).
- •Характеристика вируса чумы плотоядных (вчп). Лабораторная диагностика и специфическая профилактика болезни.
- •Характеристика вируса гепатита плотоядных (вгп). Лабораторная диагностика болезни и средства специфической профилактики. Дифференциальная диагностика вирусов чумы и гепатита плотоядных.
- •Характеристика вирусов гриппа животных. Методы лабораторной диагностики гриппа и средства специфической профилактики болезни.
- •Характеристика вируса парагриппа-3 (пг-3) крупного рогатого скота. Методы лабораторной диагностики и средства специфической профилактики болезни.
- •Вирус классической чумы свиней. Лабораторная диагностика. Средства для специфической профилактики и лечения.
- •Вирус африканской чумы свиней. Характеристика вируса и лабораторная диагностика болезни. Дифференциальная диагностика вирусов африканской и классической чумы свиней.
- •Вирус лейкоза крупного рогатого скота. Характеристика возбудителя болезни и методы лабораторной диагностики.
- •Вирус лейкоза птиц. Характеристика возбудителей болезни и методы лабораторной диагностики.
- •Возбудитель вирусной диареи крупного рогатого скота. Характеристика возбудителя болезни и методы лабораторной диагностики.
- •Болезнь Марека (нейролимфаматоз кур). Характеристика возбудителя. Лабораторная диагностика и средства специфической профилактики.
- •Характеристика вируса инфекционного ринотрахеита (ирт) крупного рогатого скота. Лабораторная диагностика и средства специфической профилактики.
- •Характеристика аденовируса крупного рогатого скота. Лабораторная диагностика и средства специфической профилактики.
- •Лабораторная диагностика бешенства. Биологические препараты для специфической профилактики и лечения бешенства. Характеристика вируса бешенства. Вирус "фикс" и уличный вирус. Работы л. Пастера.
- •Характеристика вируса болезни Ауески. Проведение лабораторной диагностики и специфическая профилактика болезни. Дифференциальная диагностика бешенства и болезни Ауески.
- •Характеристика вируса чумы крупного рогатого скота, методы лабораторной диагностики и средства для специфической профилактики.
- •Характеристика вируса инфекционного бронхита кур (иб). Лабораторная диагностика и средства специфической профилактики.
- •Характеристика вируса инфекционной бурсальной болезни птиц (ибб, болезни Гамборо). Лабораторная диагностика и средства специфической профилактики.
- •Возбудитель синдрома снижения яйценоскости (сся-76). Лабораторная диагностика и средства специфической профилактики.
- •Характеристика инфекционного ларинготрахеита птиц (илт). Лабораторная диагностика болезни. Средства для специфической профилактики.
- •Характеристика вируса ньюкаслской болезни (нб). Методы лабораторной диагностики и биопрепараты для профилактики болезни.
- •Характеристика вируса болезни Тешена. Лабораторная диагностика и средства специфической профилактики.
- •Характеристика вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней. Методы лабораторной диагностики и средства для специфической профилактики.
Формы и строение вирионов. Размеры вирусов и способы их измерения
У простых вирусов внутри вириона НК, а наружная оболочка из белковых субъединиц.
Сложноорганизованные вирусы имеет имеют внешнюю оболочку – суперкапсид. У некоторых вирусов между капсидом и суперкапсидом находится матриксный белок.
По форме подразделяюся на:
Сферические (вирус гриппа)
Палочковидные (вирус табачной мозаики)
Пулевидные (бешенство)
Изометрические (вирус натуральной оспы)
Булавидные (бактериофаги)
Нитевидные (некоторые вирусы растений)
Типы симметрии каписдов:
Икосаэдрический (кубический) – НК окружена капсомерами, образующими форму икосаэдра (многогранника с 12 вершинами, 20 гранями): герпесвирусы.
Спиральный – капсомеры расположены вокруг НК по оси вращения (бешенство)
Комбинированный – головка организованна по принципу кубической, а отросток по принципу спиральной симметрии (бактериофаги)
Формы существования: внеклеточная (вирион – НК, капсула, суперкапсид) и внутриклеточная (вирус – НК и капсула)
Вирусные частицы могут быть полные (НК и капсид), неполные (белковая оболочка) и псевдовирусы (НК и белки клеток).
Размеры вирусов измеряются в нанометрах (нм). По размерам вирусы подразделяются на:
Мелкие (например, вирус полиомиелита) — размер вирусных частиц 10–25 нм.
Средние (например, вирусы гриппа) — размер вирионов составляет 100–120 нм.
Крупные (например, вирус натуральной оспы) — размер вирусных частиц около 300 нм.
Размеры вирусов определяют с помощью электронной микроскопии, центрифугированием в градиенте плотности и ультрафильтрацией через фильтры с известным диаметром пор.
Генетика и изменчивость вирусов. Виды изменчивости и их практическое значение
Геном вирусов содержит один тип нуклеиновой кислоты - ДНК или РНК. В разных по величине вирионах в геноме насчитывают от нескольких до многих десятков генов. Геном вируса является гаплоидным, т. е. представлен одним набором генов. Частично диплоидны ДНК-содержащие вирусы, в ДНК которых встречаются повторяющиеся нуклеотидные последовательности. Полностью диплоидны ретровирусы, геном которых представлен двумя идентичными молекулами РНК.
У вирусов с фрагментированным геномом (вирусы гриппа, реовирусы) каждый фрагмент представляет собой один ген. Особенность вирусного генома - его относительно малый размер, чаще всего в пределах 5-190 тыс. п.н.
Гены – транскрибируемые участки нуклеиновой кислоты, кодирующие функциональный белок.
Геном – совокупность генов, характерная для гаплоидного набора хромосом данного вида организмов.
Генофонд – совокупность всех генов, которые имеются у особей определенной популяции или вида в целом.
Фенотип – это совокупность всех внешних и внутренних признаков и функции данного вируса. Фенотип вируса не является его постоянным свойством, он может изменяться как в результате его мутаций, так и под влиянием внешних условий репродукции. Фенотипические свойства вируса могут быть установлены морфологическим и серологическими методами.
Генотип определяется только структурой наследственного материала-ДНК или РНК, т.е. последовательностью нуклеотидов в их молекулах. Генотип–постоянное свойство вируса, и меняется он в результате мутаций, происходящих в геноме.
Экзон – смысловые фрагменты нуклеиновой кислоты
Интрон – некодирующие фрагменты нуклеиновой кислоты
Сплайсинг (редактирование) – вырезание из предшественника иРНК интронов и ковалентное связывание экзонов с образованием зрелых молекул иРНК.
В основе наследственного изменения свойств вирусов, могут лежать:
Модификации – не наследуемые (фенотипические) изменения у вирусов, обусловленные клеткой-хозяином. Эти изменения лежат в основе адаптации вируса к новому хозяину и преодоления зависимою от хозяина ограничения.
Модификации NK вирусов осуществляют клеточные ферменты, ответственные за ограничение (рестрикцию) репродукции вируса.
Мутации, то есть внезапные наследуемые изменения последовательности нуклеотидов в определенном участке генома вируса. Мутации происходят у всех вирусов, независимо от того, является ли их генетическим аппаратом ДНК или РНК. В результате мутаций отдельные вирионы могут приобретать новые свойства.
По своему механизму мутации могут быть тоже разными: спонтанные и индуцированные; по протяженности их делят на точечные и аберрационные.
Индуцированные мутации получают из популяций дикого типа обработанных мутагенами (например, азотистой кислотой, гидроксиламином, алкилирующими агентами, ультрафиолетовым облучением).
Спонтанные мутации могут быть получены при пассировании на моделях в отсутствии каких-либо мутагенов. Эти спонтанные мутации накапливаются в геномах вирусов и приводят к изменению фенотипа, которые принято называть фенотипическими (в основном являются абберационными).
Как спонтанные, так и индуцированные мутации делят на прямые и обратные (реверсии).
Мутации при пассажах. Патогенность - это потенциальная способность вируса вызывать инфекционный процесс. Её можно усиливать при пассажировании на чувствительных моделях или ослаблять при пассажировании на слабо чувствительных моделях. Изменчивость вирусов возникающая в серии пассажей на лабораторных животных, КЭ, КК принципиально не отличается от мутаций, возникающих при воздействии физическими и химическими мутагенами, так как в обоих случаях изменения признаков у вируса связаны с изменениями в его генотипе. Такого типа многоступенчатые мутации являются отражением процесса перехода количественных изменений в качественные.
Гибридизация
Заражение вирусами чувствительных клеток носит множественный характер, т.е. в клетку может проникать сразу несколько вирионов. При этом вирусные геномы в процессе репликации могут кооперироваться или интерферировать. В процессе такой смешанной инфекции могут иметь место различные формы взаимодействия как между вирусными геномами (генетические рекомбинации или гибридизация), так и между продуктами генов (негенетические взаимодействия или гибридизация).
