3.Иммунологическая лаборатория, задачи, оснащение, правила работы.

Задачи иммунологической лаборатории включают:

• Получение достоверной и своевременной лабораторной информации об изменениях состояния иммунного статуса пациента. 

• Диагностика инфекционных и неинфекционных болезней. 

• Выявление антигенов, онкомаркеров и других биологически значимых молекул и антител к ним при различных заболеваниях. 

• Дифференцирование инфекционной и поствакцинальной аллергии у детей и подростков. 

• Этиологическая диагностика микобактерий туберкулёза методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени. 

• Исследование системных и локальных изменений механизмов иммунной защиты при различных формах туберкулёзного процесса. 

• Обеспечение терапевтических мероприятий, оценка эффективности лечебных мероприятий, обеспечение органной и клеточной трансплантации, лекарственный мониторинг. 

Оснащение

Помещения базовой лаборатории должны быть достаточно просторными для обеспече­ния безопасного проведения лабораторной работы. Стены, потолок и пол должны иметь гладкую поверхность, легко моющуюся, не­проницаемую для жидкостей, устойчивую к дезинфектантам, обычно используемым в ла­боратории. Полы должны быть нескользки­ми. Трубы (вода, газ, вакуум и др.) должны отстоять от стен. Необходимо предусмотреть хорошую освещенность для всех видов ра­боты в лаборатории, исключить бликующие поверхности и подвод света через стеклян­ные потолки. Поверхности рабочих столов должны быть водонепроницаемы, устойчивы к дезинфектантам, кислотам, щелочам, ор­ганическим растворителям и умеренному на­греванию. Лабораторная мебель должна быть прочной. Пространство под столами и между мебелью должно быть легкодоступным для уборки. Шкафы для хранения расходных ма­териалов должны быть достаточно вместимы-ми, чтобы исключить загромождение рабочих столов и проходов. Для длительного хранения материалов оборудуется помещение вне ра­бочей зоны лаборатории. Каждая лаборато­рия оборудуется водопроводом и раковиной. Двери должны быть самозакрывающимися, иметь смотровые стекла и соответствовать противопожарным требованиям. В лаборато­рии должен находиться автоклав для обезза­раживания отходов. Вне рабочей зоны лабо­ратории следует предусмотреть помещения для хранения верхней одежды и личных ве­щей сотрудников, а также для принятия пи­щи, питья и курения.

К механической вентиляции базовой лабо­ратории специальных требований не предъ­является; на форточках и окнах должны быть смонтированы сетки для защиты от проник­новения насекомых.

Должны быть предусмотрены помещения и оборудование для безопасной работы и хра­нения радиоактивных изотопов, сжатых и сжиженных газов, горючих жидкостей и т.д. Предусматривается устройство систем противо­пожарной безопасности, защиты электросетей и приборов, аварийного душа и приспособле-

ний для промывания глаз. Выделяется и осна­щается помещение для оказания первой помо­щи. В системе водоснабжения не должно быть соединений между лабораторной и питьевой сетями, общая водопроводная сеть должна быть защищена от обратного тока воды из лабора­торной сети устройствами для разрыва струи.

Специального внимания требуют лабора­торные отходы, сбросы и стоки. Автоклавы и другие стерилизующие устройства для твер­дых отходов нуждаются в специально про­ектируемых помещениях и в специальном обслуживании. Жидкие отходы лаборатории и стоки требуют специальной обработки. Для обеззараживания части отходов и выбросов лаборатории требуются устройства для сжига­ния, оборудованные приспособлениями для улавливания дыма.

Оснащение базовой лаборатории оборудо­ванием следует проводить, исходя из сле­дующих требований: оборудование должно способствовать ограничению или предупреж­дению контакта микробиолога с инфекцион­ным материалом, должно быть изготовлено из материалов, непроницаемых для жидкостей, устойчивых к коррозии и прочных, без за­усенец и острых краев; оборудование должно быть сконструировано, изготовлено и уста­новлено так, чтобы использовать его было просто и чтобы можно было легко подвергать его чистке, обеззараживанию и проверке.

Каждую лабораторию оснащают, как мини­мум, микроскопом, автоклавом, термостата­ми, сушильными и стерилизационными шка­фами, аппаратом для свертывания сыворотки, дистиллятором, центрифугами, лабораторны­ми весами, рН-метром, ФЭК, магнитной ме­шалкой, моечной ванной.

Рабочие кабинеты лаборатории должны быть светлыми, просторными, теплыми, снаб­жены подводкой холодной и горячей воды, электричеством, вакуумом, кислородом, воз­духом высокого давления и т. п. В некоторых кабинетах оборудуются боксы и вытяжные шкафы. В число обязательных помещений входят лаборатории кишечных, капельных инфекций, санитарно-бактериологическая, серологическая, а также вспомогательные помещения: средоварка, моечная, стерили-зационная (чистая и грязная), регистратура,

кладовые, санузел для сотрудников, виварий. В лабораториях с пунктами для обследования на носительство дополнительно оборудуют приемную, процедурную, туалеты для забора материала. Располагают помещения таким образом, чтобы «грязный» и «чистый» потоки не перекрещивались и не соприкасались.

В отношении помещений режимных лабо­раторий должны прежде всего соблюдаться те же требования, которые предусмотрены для лабораторий общего типа. Необходимыми дополнениями для режимных лабораторий являются следующие:

1. лаборатория должна быть отделена от тех частей здания, где передвижение сотрудников не ограничивается. Для отделения лаборато­рии от таких зон ее располагают в тупиковом конце этажа, а вход в лабораторию оборудуют воздушным шлюзом;

2. отверстия и щели в полу, стенах и потолке герметизируются. Устройства для мытья рук должны быть снабжены приспособлениями для открывания воды ножной педалью или локтем. Окна должны быть закрыты и закле­ены. Входные двери в лабораторные поме­щения должны быть самозакрывающимися и запирающимися на замок;

3. в лаборатории должен находиться авто­клав для обеззараживания лабораторных от­ходов. При необходимости переноса отходов для обеззараживания в другую часть того же здания их помещают в закрытый влагонепро­ницаемый контейнер;

4. вытяжную вентиляцию проектируют так, чтобы наиболее низкое давление создавалось в помещениях самой высокой опасности ин­фицирования. В этом случае движение воз­духа будет происходить из вспомогательных помещений в направлении основного рабоче­го помещения. Отработанный воздух выбра­сывается в окружающую среду только после фильтрации через бактериальные фильтры.

При оснащении режимных лабораторий обо­рудованием руководствуются рекомендациями, разработанными для базовых лабораторий, с тем дополнением, что вся работа с инфекцион­ным материалом в них проводится в защитных боксах 1-го и 2-го, а иногда и 3-го класса.

В режиме максимально изолированных ла­бораторий существует ряд особенностей для

обеспечения максимальной биологической безопасности персонала, населения и окру­жающей среды. Так, вход в лабораторию и вы­ход из нее осуществляются через санитарный пропускник. При входе обязательно полное пе­реодевание в специальную одежду, при выхо­де перед переодеванием обязательна целевая санитарная обработка (душ, дезинфектанты) персонала. Автономная вентиляция подде­рживает во всех рабочих помещениях разре­жение воздуха. Выброс воздуха из вытяжной вентиляции осуществляется только через стерилизующие бактериальные фильтры. Все отходы лаборатории подвергаются обеззара­живанию. Стерилизация отработанных ма­териалов в лаборатории проводится путем автоклавирования в проходных автоклавах, расположенных между рабочей и вспомога­тельной зоной. Лаборатория должна быть ос­нащена спецканализацией, для того чтобы все жидкие отходы накапливались в емкости и только после обеззараживания сливались в общую канализацию. Изоляция сотрудников лаборатории от инфекционного материала осуществляется с помощью защитных боксов 3-го класса и пневмокостюмов с избыточным давлением внутри.

Для создания и практической реализации технических возможностей проведения опе­раций и процессов, при которых инфекцион­ный материал может попадать в окружающую среду, применяют боксирование. С помощью боксов (настольных, ламинарных) создают физические барьеры для предотвращения возможных контактов работающего персо­нала с инфекционным материалом. Выбор конструкции защитного бокса определяется степенью опасности для человека того мик­роба или продуктов его жизнедеятельности, с которым планируется работать, а также ха­рактером проводимых операций и процессов с точки зрения вероятности образования аэ­розолей.

Различают защитные боксы с частичным удержанием микробов (боксы 1-го и 2-го классов) и с полным их удержанием или изо­лирующие боксы (боксы 3-го класса).

В боксах 1 класса воздух рабочего помещения всасы­вается через проем в передней панели вентилятором, установленным на выходе из бокса после предфилыра

и высокоэффективного фильтра, и не дает возможности аэрозолю внутри бокса попасть в рабочее помещение. Удаляемый из бокса загрязненный воздух очищается от частиц аэрозоля в предфильтре и в специальном фильтре тонкой очистки и выводится в вытяжную сис­тему здания, в котором расположена лаборатория, или выбрасывается непосредственно в рабочее помещение. Боксы 1-го класса применяют для работ с микробами только умеренного уровня опасности.

Боксы 2-го класса представляют собой защитные конструкции с проемом в передней панели для рук работающего. Для защиты персонала и рабочих по­мещений в боксах создается нисходящий вертикаль­ный воздушный поток благодаря рециркуляции части засасываемого в бокс воздуха. Рециркулирующий, а также выводимый из бокса воздух очищается в высо­коэффективных аэрозольных фильтрах. Ламинарный поток воздуха обеспечивает также защиту находяще­гося внутри бокса исследуемого материала от контами­нации посторонней микрофлорой. Боксы 2-го класса используют для работы с микробами низкой категории риска, если лабораторные манипуляции сопровожда­ются массивным образованием аэрозолей, а также для всех лабораторных работ с микробами, представляю­щими высокий индивидуальный риск.

Боксы 3-го класса (изолирующие) являются га­зонепроницаемыми конструкциями, работающими под пониженным давлением. Они создают надежный физический барьер между материалом, находящимся внутри бокса, и персоналом и обеспечивают полное удержание микробов и продуктов их жизнедеятель­ности. Работа в боксе осуществляется с использовани­ем резиновых перчаток плечевого типа, герметически заделанных в стенки бокса. Воздух, засасываемый в бокс и выводимый из него вентилятором, подверга­ется очистке в предфильтре и в двух последовательно установленных высокоэффективных фильтрах либо проходит через термический затвор для сжигания всего органического материала. Очищенный воздух отводят по автономным воздушным системам за пре­делы здания, или сбрасывают в центральную систему транспортировки и очистки технологического возду­ха. Жидкие отходы из боксов 3-го класса собирают в специальную емкость, подвергают термической обработке, а затем сбрасывают в общую канализа­ционную систему лаборатории. В боксах 3-го клас­са допускается работа с микробами любого уровня опасности. Для проведения специализированных и комплексных исследований боксы 3-го класса могут объединяться в защитные технологические линии и

комплексы таких линий. В состав таких линий могут включаться ферментеры, инкубаторы, рефрижера­торы, замораживатели, центрифуги, измельчители, гомогенизаторы и другое оборудование. Некоторые линии отводятся для изолированного содержания по­допытных животных. Соединение отдельных элемен­тов в линии, а линий в комплексы осуществляется с помощью переходных камер-шлюзов.

Для группировки всех помещений микро­биологических лабораторий с одинаковыми уровнями реально присутствующих или по­тенциально возможных профессиональных вредностей, разделения их между собой и отделения их от внешней среды защитными барьерами применяют зонирование.

В зонах используют специальную для каж­дой из них рабочую или защитную одеж­ду, средства индивидуальной защиты, осу­ществляют адекватную отделку помещений и проводят дифференцированную обработку воздушных вентиляционных и технологичес­ких выбросов, твердых и жидких отходов. Разделение помещений по зонам позволяет наиболее целесообразно проводить их обез­зараживание, целевую санитарную обработку персонала, обработку использованной спецо­дежды и других средств индивидуальной за­щиты, материалов и предметов, передаваемых между зонами. Немалую роль при реализации принципа зонирования играет также эконо­мический фактор; целесообразнее ограни­чить контроль профессиональных вредностей лишь теми помещениями, где они имеются, чем распространять его на лабораторию в целом.

Мероприятия по зонированию помещений реали­зуются при проектировании и строительстве лабора­тории. Исходя из функционального предназначения лаборатории и схемы исследовательского процесса, выделяют группу помещений, которые должны быть изолированы от других помещений и окружающей среды, если в них запланировано проводить работу с активными препаратами, вследствие чего такие по­мещения должны рассматриваться как потенциально или фактически «грязные». При их проектировании должна учитываться диктуемая спецификой соот­ветствующих исследований необходимость и вероят­ность работы с активными материалами в открытом виде непосредственно на лабораторных столах или в негерметичной аппаратуре и приборах, которые

имеют такие габариты, что их невозможно поместить в защитные боксы. Эти помещения составляют яд­ро современных микробиологических лабораторий и требуют при их проектировании, строительстве и эксплуатации особого внимания. Эта группа помеще­ний формирует 3-ю зону комплексной диагностичес­кой или исследовательской лаборатории.

Помещения лаборатории, для которых типична ра­бота с инфекционными материалами в герметичной аппаратуре, приборах и в защитных боксах, квалифи­цируют как «условно грязные» и относят ко 2-й зоне.

Отдельную группу рабочих помещений лаборатории составляют помещения буферного предназначения, которые выполняют функции препараторских и об­служивают основные помещения (3-я и 2-я зоны) лаборатории. В этих помещениях проводят работы только с неактивными препаратами, с материалами, лабораторной посудой и реактивами общего пользова­ния. Временное пребывание в этих помещениях био­логически активных материалов и подлежащих пере­даче в основные помещения лаборатории разрешается только в герметической укупорке, исключающей за­грязнение помещений. Данные помещения считаются «чистыми» и относятся к помещениям 1-й зоны.

В лабораториях имеются помещения общего пред­назначения, планировка, отделка и оснащение ко­торых так же, как и помещений 1-й зоны, должны отвечать общим архитектурным требованиям, предъ­являемым к зданиям научно-исследовательских уч­реждений. К ним относятся вестибюли, гардеробы, административные кабинеты, буфеты, склады, поме­щения технического обслуживания (мастерские, ко­тельные, трансформаторные и др.). Эти помещения формируют 0-ю зону лаборатории.

Дифференциация рабочих помещений ла­бораторий по различным зонам требует чет­кого обозначения границ между зонами и создания на этих границах, за исключением входа и выхода в 0-ю зону, санитарных про­пускников для людей, а также установки со­ответствующих передаточных устройств для материалов и исследовательской аппаратуры и приборов.

Санпропускники предназначены для исклю­чения выноса на одежде и на теле людей специ­фических микроорганизмов при переходе пер­сонала из более «грязных» помещений в менее «грязные». Это достигается переодеванием пер­сонала, следующего в помещения более «гряз­ной» зоны, в санпропускниках в спецодежду,

установленную для данной зоны, использова­нием необходимых дополнительных средств индивидуальной защиты вплоть до пневмокос-тюмов, снятием и обработкой использованной спецодежды и других средств индивидуальной защиты при выходе из указанной зоны, целевой санитарной обработкой персонала и, наконец, одеванием одежды, характерной для зоны, в которую входит сотрудник.

Санпропускники целесообразно распола­гать на границах 0-й и 1-й зон (санпропуск­ник 1-й зоны), 1-й и 2-й зон (санпропускник 2-й зоны), 2-й и 3-й зон (санпропускник 3-й зоны). Зональные санпропускники должны обеспечивать:

• санпропускник 1 -й зоны: при входе персона­ла из 0-й зоны в 1-ю — замену домашней одежды на рабочую, но не спецодежду, при выходе из 1-й зоны — гигиенический душ для персонала, заме­ну рабочей одежды на домашнюю;

• санпропускник 2-й зоны: при входе пер­сонала из 1-й зоны во 2-ю — замену рабо­чей одежды 1-й зоны на спецодежду в со­ответствующем комплекте; при выходе из 2-й зоны — целевую санитарную обработку персонала, замену спецодежды на рабочую, регламентированную обработку снятой спе­цодежды;

• санпропускник 3-й зоны: при входе пер­сонала из 2-й зоны в 3-ю — дополнение спе­цодежды 2-й зоны пневмокостюмом; при вы­ходе из 3-й зоны — обработку пневмокостюма непосредственно на человеке под «химичес­ким душем», снятие и дальнейшую обработку пневмокостюма, восстановление комплекта спецодежды, предназначенного для 2-й зоны.

Кроме разграничения рабочих зон лабора­тории с помощью санитарных пропускников, значительное внимание при проектировании необходимо уделить выбору местоположения каждой зоны в общей системе лаборатории или здания. Необходимо располагать помещения более высокой зональности внутри помещений более низкой зональности, по принципу «ящик в ящике», не допуская примыкания помещений 3-й зоны к наружным ограждениям зданий и расположения их на последних верхних этажах, в подвалах и над помещениями 0-й и 1-й зон. Помещения 2-й и 3-й зон должны иметь авто­номные системы вентиляции, которые создают

в этих помещениях разряжение, обеспечива­ющее направленное движение воздуха в сто­рону помещений более высокой зональности. Воздух, выбрасываемый системами вентиля­ции 2-й и 3-й зон, фильтруется через фильтры тонкой очистки или каскады таких фильтров. Системы сбора и обработки стоков для 2-й и 3-й зон также должны быть автономными.

Правила

Работа в иммунологической лаборатории требует строгого соблюдения определенных правил и протоколов, чтобы обеспечить безопасность сотрудников, точность результатов и надлежащее ведение экспериментов. Прежде всего, соблюдение правил безопасности стоит на первом месте. Лаборатория должна быть оснащена средствами индивидуальной защиты, такими как перчатки, очки, маски и халаты, чтобы минимизировать риск контакта с потенциально опасными веществами и образцами.

Порядок работы в лаборатории также включает в себя строгие меры по стерильности. Все инструменты и оборудование должны быть стерилизованы перед использованием, а образцы должны обрабатываться в условиях асептики, чтобы избежать контаминации. Для этого могут использоваться биологические шкафы, которые обеспечивают необходимый уровень защиты.

Ключевым аспектом является правильное ведение документации. Каждое исследование должно быть тщательно записано, включая методы, использованные реагенты, условия экспериментов и полученные результаты. Это не только обеспечивает возможность воспроизводимости исследований, но и помогает в дальнейшем анализе данных.

Кроме того, важно следить за использованием реагентов и материалов. Они должны храниться в надлежащих условиях, а их срок годности регулярно проверяться. Это поможет избежать использования некачественных веществ, что может испортить результаты.

Командная работа и коммуникация между членами лаборатории тоже играют важную роль. Эффективное сотрудничество, обмен идеями и результатами между специалистами могут значительно повысить качество исследований и ускорить процесс изучения.

Наконец, соблюдение этических норм и стандартов – важный компонент работы в иммунологической лаборатории. Все исследования должны быть направлены на улучшение здоровья и благополучия человека, соблюдая права всех участников, если исследования затрагивают людские образцы.

Соблюдение всех этих правил обеспечит не только безопасность сотрудников, но и высокое качество научных результатов, что в конечном итоге будет способствовать дальнейшему прогрессу в области иммунологии.