4. Получение плазмы и сыворотки крови. Гематокрит. Химический состав плазмы.

Получение плазмы

Для получения плазмы кровь необходимо предохранить от свёртывания добавлением антикоагуляторов – веществ, препятствующих свертыванию крови (гепарин, лимонно - кислый натрий).

СТАБИЛИЗИРОВАННАЯ КРОВЬ - кровь, предохраненная от свертывания. В пробирку или стеклянный цилиндр с антикоагулятором выпустить по 10 мл крови из яремной вены животного. Закрыв сосуд пальцем или пробкой, несколько раз перевернуть его для перемешивания крови.

1 способ. Цилиндр поставить в термостат кровь лошади - на 1 час, крупного рогатого скота - на 24…48 часов.

2 способ. Пробирку с взятой кровью поставить в центрифугу. Центрифугировать при 3000 об/мин в течение 20…30 минут.

Убедиться, что при стоянии или центрифугировании кровь расслаивается на плазму и форменные элементы

Получение сыворотки

Если выпущенную в сосуд кровь не стабилизировать антикоагулятором, происходит ее свертывание и образуется сгусток, содержащий форменные элементы и выпавший в осадок белок фибриноген.

Сгусток постепенно уплотняется, стягивается и от него отделяется прозрачная желтоватого цвета жидкость – сыворотка (происходит процесс ретракции)

СЫВОРОТКА - представляет собой плазму, лишенную белка фибриногена и других веществ, участвующих в свертывании крови.

1 способ. В пробирку или цилиндр без антикоагулятора выпустить 10 мл крови животного и поставить ее в термостат при 38°С на несколько часов. Образование кровяного сгустка и частичная ретракция, т.е. его стягивание и самопроизвольное отделение сыворотки наступает у лошадей через 1…3часа, а полное отделение сгустка через 12…18 часов. У крупного рогатого скота ретракция протекает значительно медленнее. Из пробирки, с полной ретракцией сгустка, слить или отсосать сыворотку и сравнить ее с плазмой. Сыворотка имеет желтовато-соломенный цвет и более прозрачна, чем плазма.

2 способ получения сыворотки. При выделении из крови фибриногена механическим путем, получают кровь, которая содержит все составные части, кроме белка фибриногена - ДЕФИБРИНИРОВАННУЮ КРОВЬ, т. е. эта кровь, теряет способность к свертыванию. Состав дефибринированной крови

Гематокрит – процентное соотношение объема эритроцитов ко всему объему крови. Показатель гематокрита тем выше, чем больше количество эритроцитов и выше уровень гемоглобина. Гематокрит выражается в процентах (%).

Плазма крови содержит в своем составе воду (90..92%) ,сухое вещество (8…10%), белки (60…90г/л) – альбумины(35г/л), глобулины (40…45г/л) фибриноген(2…4 г/л) протромбин(0,1…0,15 г/л), аминокислоты, полипептиды, мочевину (3,33…8,32 г/л), креатин(45…75 мкмоль/л), креатинин(84 мкмоль/л), мочевую кислоту(0,12…0,46 ммоль/л),глюкозу(1…1,2 г/л), нейтральные жиры, липиды(3…4 г/л) и летучие жирные кислоты(25 г/л), витамины, минеральные вещества(около 9 г/л) – преимущественно катионы Na+, K+, Ca+, анионы Cl-, HCO3-, HPO4-, ферменты, поступающие из клеток тканей, гормоны. Плазма является источником питательных веществ и биологически активных веществ для клеток, тканей организма.