6 курс / Клинические и лабораторные анализы / Лабораторная_диагностика_туберкулеза_Ерохин_В_В_ред_

РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ СЛУШАТЕЛЯ

чивости к фторхинолонам методом гибридизации на биологических микрочипах // БЭБИМ. – 2008. – Том 145. – № 1. – С. 115–120.

2.Владимирский М.А., Аляпкина Ю.С., Варламов Д.А., Алексеев Я.И. Применение метода ПЦР в реальном времени для определения и контроля за распространением лекарственно-устойчи- вых штаммов микобактерий туберкулеза // Проблемы туберкулеза и болезни легких. – 2008. – №4. – С. 38–44.

3.Mikhailovich V., Lapa S., Gryadunov D., Sobolev A., Strizhkov B., Chernyh N., Skotnikova O., Irtuganova O., Moroz A., Litvinov V., Vladimirskii M., Perelman M., Chernousova L., Erokhin V., Zasedatelev A., Mirzabekov A. Identification of rfampin-resistant Mycobacterium tuberculosis strains by hybridization, PCR, and ligase detection reaction on oligonucleotide microchips // J. Clin. Microbiol.

– 2001. – Vol. 39. – P. 2531–2540.

4.Mokrousov I., Narvskaya O., Limeschenko E., Otten T., Vyshnevskiy B. Detection of ethambutol-resistant Mycobacterium tuberculosis strains by multiplex Allele-Specific PCR assay targeting embB306 mutations// J. Clin. Microb. – 2002. – Vol. 40. – P. 1617–1720.

Контрольные вопросы

1. Какие традиционные микробиологические методы определения лекарственной чувствительности вы знаете? Перечислите

2. Что такое фенотипическая лекарственная устойчивость? Что такое генотипическая устойчивость?

3. Какие ускоренные микробиологические методы определения лекарственной чувствительности вы знаете?

4. Какие молекулярно-генетические методы определения лекарственной чувствительности вам известны?

Модуль 12. Организация лаборатории молекулярногенетических методов исследований

Тема 12.2: План рабочих зон лаборатории молекулярно-генетических исследований и рекомендуемый комплект оборудования.

Количество часов, выделяемых на самоподготовку – 3

Вопросы для самостоятельной проработки

•основополагающие документы, регламентирующие работы с применением методов амплификации нуклеиновых кислот, действующие в системе здравоохранения Российской Федерации

•размещение ПЦР-рабочих зон в условиях баклаборатории;

•рекомендуемый комплект оборудования

Рекомендуемая литература для самостоятельной проработки:

1.Лунин В.Г., Тополян А.А., Колупаев В.Е., Сердобинский Л.А. Организация работы лаборатории, использующей для проведения исследований метод полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме реального времени. Методические рекомендации. – Тверь, Триада, 2008. – 24 с.

2.Методические указания (МУ 1.3. 2569-09) Организация работы лабораторий использующих методы амплификации нуклеино-

Раздел 1. САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ ПОДГОТОВКА

РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ СЛУШАТЕЛЯ

вых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I–IV групп патогенности – М., 2009

3.Методические указания (МУ 3.5.5.1034-01) «Обеззараживание исследуемого материала, инфицированного бактериями I–IV групп патогенности, при работе методом ПЦР» – М., 2001.

4.Приказ МЗ РФ от 21.03.03 № 109 «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации»

5.Приказ МЗиСР от 29 декабря 2010 г. 1224н «Порядок оказания медицинской помощи больным туберкулезом в Российской Федерации»

6.Ребриков Д.В., Саматов Г.А., Трофимов Д.Ю. и соавт. ПЦР «в реальном времени». Под ред. Д.В. Ребрикова, – изд 2-е, испр. и доп. – М.: БИНОМ. Лаборатория знаний. – 2009. – 223 с.

7.Санитарно-эпидемиологические правила (СП 1.2.1318-03) «Порядок выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I–IV групп патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами, ядами биологического происхождения и гельминтами».

8.Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы СанПиН 2.1.3.2630-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к организациям, осуществляющим медицинскую деятельность». – М., 2010.

9.Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами». – М., 2010.

10.Санитарно-эпидемиологические правила СП 3.1.1295-03 «Профилактика туберкулеза от 25.06.2003 г.

11.Семина Н.А., Ковалева Е.П., Акимкин В.Г., Храпунова И.А., Селькова Е.П. Профилактика внутрибольничного инфицирования медицинских работников. Практическое руководство // М.: Издательство РАМН, 2006. – 152 с.

12.Федеральный закон «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения», (В редакции ФЗ от 30 декабря 2001, №196ФЗ). – М.: 2002. – 48 С.

13.Черноусова Л.Н. Алгоритм микробиологических исследований для диагностики туберкулезной инфекции. Методическое пособие для врачей (сокращенный вариант) // Туберкулез и болезни легких. Нью-терра. – 2011. – №11. – С. 58–67

14.Черноусова Л.Н., Севастьянова Э.В., Андреевская С.Н., Ларионова Е.Е., Смирнова Т.Г. Алгоритм микробиологических иссле-

дований для диагностики туберкулезной инфекции. Методическое пособие для врачей №УМО-17-28/248 от 12.07.2011 М. – 2011. – С. 52

15.Шухов B.C., Рюмина И.И. Безопасность на рабочих местах в ле- чебно-профилактических учреждениях/Профилактика риска профессионального инфицирования вирусами гепатитов В, С, ВИЧ // Пособие для медицинских работников. – М., 2008. 79 с.

Контрольные вопросы

1. Назовите основные структурно-функциональные подразделения противотуберкулезной службы в системе здравоохранения Российской Федерации.

2. Перечислите основополагающие документы, которые регламентируют работы с применением методов амплификации нуклеиновых кислот, действующие в системе здравоохранения Российской Федерации.

3. Назовите основной набор рабочих зон для лабораторий, применяющих методы амплификации нуклеиновых кислот.

Раздел 1. САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ ПОДГОТОВКА

5.Приказ МЗ РФ от 21 марта 2003 г №109 «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации»

6.Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 29 декабря 2010 г. № 1224 «Об утверждении Порядка оказания медицинской помощи больным туберкулезом в Российской Федерации»

7.Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы СанПиН 2.1.3.2630-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к организациям, осуществляющим медицинскую деятельность». – М., 2010.

8.Санитарные нормы и правила (СанПин 2.1.7.728-99) "Правила сбора, хранения и удаления отходов лечебно-профилактиче- ских учреждений".

9.Санитарные правила (СП 1.2.036–95) «Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I–IV групп патогенности». Госкомсанэпиднадзор России. Москва, 1995.

10.Федеральный закон РФ ФЗ №77 «О предупреждении распространения туберкулеза в Российской Федерации» от 18.06.2001

Контрольные вопросы

1. Отличаются ли правила организации безопасной работы в бактериологической и молекулярно-генетический лабораториях

2. Перечислите основополагающие документы, которые регламентируют безопасную работу в лаборатории с применением методов амплификации нуклеиновых кислот для диагностики туберкулеза, действующие в системе здравоохранения Российской Федерации.

Раздел 1. САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ ПОДГОТОВКА

Раздел 2. ЛЕКЦИОННЫЕ МАТЕРИАЛЫ* Очная часть

1. Лекция: «Этиология и патогенез туберкулеза» – 1 час

Основные вопросы, освещаемые в лекции:

•Открытие возбудителя туберкулеза

•Представление о причинах возникновения туберкулеза

•Определение и анализ этиологических факторов туберкулеза

•Патогенез туберкулеза

•Роль макрофагов легких и проблемы взаимодействия макро- фаг-микобактерия

•Устойчивость микобактерий к факторам внешней среды

2. Лекция: «Эпидемиологическая ситуация по туберкулезу в РФ и мире» – 1 час

Основные вопросы, освещаемые в лекции:

• Закономерности эпидемического процесса

• Развитие эпидемической ситуации по туберкулезу в различных социо-экономических условиях

• Факторы риска и причины ухудшения ситуации по туберкулезу

• Профилактические и противоэпидемические мероприятия

3. Лекция: «Характеристика и таксономия микроорганизмов рода

Mycobacterium» – 2 часа

Основные вопросы, освещаемые в лекции:

• Таксономия и классификация микроорганизмов рода Mycobacterium

• Морфология и физиология микобактерий

• Изменчивость и формы существования микобактерий

4. Лекция: «Световая, люминесцентная и LED-микроскопия» – 1 час

Основные вопросы, освещаемые в лекции:

•История развития световой, люминесцентной и LED микроскопии

•Чувствительность и специфичность методов

•Эффективность микроскопии на различных этапах лабораторного сопровождения больных туберкулезом

5.Лекция: «Организация выявления больных туберкулезом бактериоскопическими методами в учреждения ПМСП» – 1 час

Основные вопросы, освещаемые в лекции:

•Роль учреждений ПМСП в выявлении больных туберкулезом легких бактериоскопическими методами; структура сети лабораторий

* Предлагаемые модельные лекционные материалы представлены на компакт-диске

Раздел 2. ЛЕКЦИОННЫЕ МАТЕРИАЛЫ

РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ СЛУШАТЕЛЯ

•Причины недостаточной эффективности выявления больных туберкулезом легких в учреждениях ПМСП

•Основные этапы алгоритма выявления и их характеристика

•Эффективность работы клинико-диагностических лабораторий (КДЛ) и основные проблемы качества исследований

6. Лекция: «Правила сбора, транспортировки, обработки и хранения диагностических материалов» – 1 час

Основные вопросы, освещаемые в лекции:

•Виды диагностического материала для микробиологических исследований при туберкулезе. Диагностический материал при туберкулезе легких и внелегочной локализации. Асептически собранный материал. Материал, содержащий постороннюю микрофлору или собранный без соблюдения правил асептического сбора.

•Организация сбора материала и правила биологической безопасности. Требования к расходным материалам. Правила сбора мокроты.

•Правила хранения и транспортировки диагностического материала, содержащего биологические объекты III-ей группы патогенности.

•Требования к качеству диагностического материала, прием и регистрация материала.

•Подготовка реагентов для обработки диагностического материала.

•Обработка диагностического материала, деконтаминация и концентрация образцов.

7. Лекция: «Питательные среды: характеристики и правила приготовления» – 1 час

Основные вопросы, освещаемые в лекции:

• Виды питательных сред, их характеристика.

• Приготовление питательных сред для культивирования микобактерий разных видов.

• Корректировка свойств плотных питательных сред.

8. Лекция: «Правила посева, культивирования, идентификации и интерпретации результатов» – 1 час

Основные вопросы, освещаемые в лекции:

•Посев и культивирование микобактерий туберкулеза и нетуберкулезных видов.

•Исключение кросс-контаминации при проведении культуральных исследований.