Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru t.me/Prokururor I Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

6 курс / Клинические и лабораторные анализы / Лабораторная_диагностика_туберкулеза_Ерохин_В_В_ред_

.pdf
Скачиваний:
40
Добавлен:
24.03.2024
Размер:
6 Мб
Скачать
☆

9.

Результаты исследования культуры с

Выводы

плотной среды Финн-II

 

1.

Колонии цвета слоновой кости

а. Культура принадлежит к M.tuberculosis

 

 

2. R-колонии

б. Культура принадлежит к M.bovis

3.

ПЦР IS6110 положительна

в. Дрожжевые грибы

4.

Рост на среде, содержащей салици-

г. Культура принадлежит к M.avium

ловокислый натрий, отрицателен

 

5. S – колонии

д. Культура принадлежит к M.gordonae

10.

 

Результаты исследования культуры с

Выводы

 

плотной среды Финн-II

 

 

 

1.

Время получения культуры – три дня

а. Культура принадлежит к M.tuberculo-

 

sis

 

 

 

 

2.

Мазок по Ziehl-Neelsen – синие кокки

б. Культура принадлежит к M.gordonae

 

 

 

 

 

3.

Цвет колоний – ярко-желтый

в. Неспецифическая микрофлора

 

 

 

 

 

4.

ПЦР IS6110 отрицательна

г. Культура принадлежит к M.fortuitum

 

 

 

 

 

5.

Мазок по Ziehl-Neelsen – красные па-

д. Нетуберкулезные микобактерии

 

лочки

 

 

11.

 

 

 

 

 

 

Результаты исследования диагностиче-

Выводы

 

ского материала

 

 

 

1.

ПЦР IS6110 отрицательна

а. В исследуемом образце ДНК МБТК не

 

обнаружена

 

 

 

 

2.

Выявлена мутация в гене rpoB

б. В исследуемом образце выявлена

 

ДНК МБТК

 

 

 

 

3.

Выявлена мутация в гене katG

в. В образце выявлена ДНК МБТК с

 

устойчивостью к рифампицину

 

 

 

 

4.

ПЦР IS6110 положительна

г. В образце выявлена ДНК МБТК с

 

устойчивостью к изониазиду

 

 

 

 

5.

Выявлена мутация в гене gyrA

д. В образце выявлена ДНК МБТК с

 

устойчивостью к фторхинолонам

 

 

 

12.Расположите зоны лаборатории молекулярной диагностики в соответствии с поточностью движения материала

 

Расположение зон в

Название зоны

 

мол-ген лаборатории

 

 

 

1. 1-ая зона

а. Проведения реакции амплификации и учета ее ре-

 

зультатов при использовании гибридизационно–флюо-

 

 

ресцентного метода детекции

 

2. 2-ая зона

б. Первичной обработки материала, выделения нуклеи-

ЗАДАНИЯ

новых кислот

 

3. 3-ая зона

в. Приготовление реакционной смеси

 

 

4. 4-ая зона

г. Приема, регистрации, разбора материала

 

 

 

ТЕСТОВЫЕ

5. 5-ая зона

д. Учета результатов реакции амплификации нуклеино-

вых кислот методом электрофореза и\или гибридиза-

 

 

ционно – ферментным методом детекции.

688

Блок C Ситуационные задачи

Задача №1.

В приемное отделение ПТУ поступил ВИЧ-инфицированный больной Б., возраст 32 года, с подозрением на туберкулез генерализованной формы. У больного до поступления в ПТУ туберкулеза в анамнезе не отмечено.

Задание: провести лабораторную диагностику туберкулеза / микобактериоза. Дать рекомендации по выбору эффективных препаратов для химиотерапии пациента (за исключением ретровирусной терапии).

А. Выбор информативного диагностического материала для микробиологических исследований

1.Мокрота

2.Моча

3.БАЛ

4.Биоптат/операционный материал

5.Ликвор

Б. Выбор метода диагностики бактериовыделения

1.Микроскопия

2.Посев на плотные питательные среды

3.Посев на жидкие питательные среды

4.ПЦР-диагностика

В. Выбор метода идентификации выделенных культур

1.Микроскопия по ЦН

2.Микроскопия люминесцентная

3.Окраска по Граму

4.Посев на кровяной агар

5.Иммунохроматографический тест

6.Посевы на питательные среды с TCH, PNB, натрий салициловокислым

7.Температурный тест роста культуры

8.Культуральная характеристика роста на плотной питательной среде

Г. Выбор метода определения лекарственной чувствительности

1.Лекарственная чувствительность МБТ на основе ПЦР-диагно- стики в диагностическом материала

2.Лекарственная чувствительность МБТ на основе ПЦР-диагно- стики из выделенной культуры

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ

689

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ

3.Лекарственная чувствительность МБТ на жидких питательных средах к ПТП первого ряда

4.Лекарственная чувствительность МБТ на жидких питательных средах к ПТП второго ряда

5.Лекарственная чувствительность МБТ на плотных питательных средах к ПТП первого ряда

6.Лекарственная чувствительность МБТ на плотных питательных средах к ПТП второго ряда

Д.Необходимые процедуры внутреннего контроля качества исследований

1.Посев штамма H37Rv на питательные среды с TCH, PNB, натрий салициловокислым

2.Контрольный положительный препарат по микроскопии

3.Контрольный отрицательный препарат по микроскопии

4.Контроль стерильности питательной среды

5.Посев штамма H37Rv на жидкие питательные среды с ПТП

6.Посев штамма H37Rv на плотные питательные среды с ПТП

7.Посев лабораторного штамма МБТ с широкой (экстенсивной) лекарственной устойчивостью на жидкие питательные среды с ПТП

8.Посев лабораторного штамма МБТ с широкой (экстенсивной) лекарственной устойчивостью на плотные питательные среды с ПТП

9.Использование контрольных штаммов H37Rv и с широкой (экстенсивной) лекарственной устойчивостью при проведении ПЦР-диагностики ЛЧ.

Задача №2.

В приемное отделение ПТУ поступил больной «Ч», возраст 66 лет, с рецидивом фиброзно-кавернозного туберкулеза. В анамнезе длительное лечение ПТП первого и второго ряда, множество отрывов от лечения. Данные о результатах лекарственной чувствительности отсутствуют.

Задание: провести лабораторную диагностику туберкулеза. Дать рекомендации по выбору эффективных препаратов для химиотерапии пациента.

А. Выбор информативного диагностического материала для микробиологических исследований

1 Мокрота

2 Моча

690

3 БАЛ

4 Биоптат/операционный материал

5 Ликвор

Б. Выбор метода диагностики бактериовыделения

1 Микроскопия

2 Посев на плотные питательные среды

3 Посев на жидкие питательные среды

4 ПЦР-диагностика

В. Выбор метода идентификации выделенных культур

1 Микроскопия по ЦН

2 Микроскопия люминесцентная

3 Окраска по Граму

4 Посев на кровяной агар

5 Иммунохроматографический тест

6Посевы на питательные среды с TCH, PNB, натрий салициловокислым

7 Температурный тест роста культуры

8Культуральная характеристика роста на плотной питательной среде

Г. Выбор метода определения лекарственной чувствительности

1Лекарственная чувствительность МБТ на основе ПЦР-диагно- стики в диагностическом материала

2Лекарственная чувствительность МБТ на основе ПЦР-диагно- стики из выделенной культуры

3Лекарственная чувствительность МБТ на жидких питательных средах к ПТП первого ряда

4Лекарственная чувствительность МБТ на жидких питательных средах к ПТП второго ряда

5Лекарственная чувствительность МБТ на плотных питательных средах к ПТП первого ряда

6Лекарственная чувствительность МБТ на плотных питательных средах к ПТП второго ряда

Д.Необходимые процедуры внутреннего контроля качества

исследований

1Посев штамма H37Rv на питательные среды с TCH, PNB, натрий салициловокислым

2 Контрольный положительный препарат по микроскопии

3 Контрольный отрицательный препарат по микроскопии

4 Контроль стерильности питательной среды

5 Посев штамма H37Rv на жидкие питательные среды с ПТП

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ

691

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ

6

Посев штамма H37Rv на плотные питательные среды с ПТП

7

Посев лабораторного штамма МБТ с широкой (экстенсивной)

 

лекарственной устойчивостью на жидкие питательные среды с

 

ПТП

8Посев лабораторного штамма МБТ с широкой (экстенсивной) лекарственной устойчивостью на плотные питательные среды с ПТП

9Использование контрольных штаммов H37Rv и с широкой (экстенсивной) лекарственной устойчивостью при проведении ПЦР-диагностики ЛЧ.

Задача №3.

В приемное отделение ПТУ поступил ребенок «Ж» в возрасте 5-и лет с туберкулезом внутригрудных лимфоузлов. В анамнезе семейный контакт с больным туберкулезом легких с множественной лекарственной устойчивостью возбудителя.

Задание: провести лабораторную диагностику туберкулеза. Дать рекомендации по выбору эффективных препаратов для химиотерапии пациента.

А. Выбор информативного диагностического материала для микробиологических исследований

1 Мокрота

2 Моча

3 БАЛ

4 Биоптат/операционный материал

5 Ликвор

Б. Выбор метода диагностики бактериовыделения

1 Микроскопия

2 Посев на плотные питательные среды

3 Посев на жидкие питательные среды

4 ПЦР-диагностика

В. Выбор метода идентификации выделенных культур

1 Микроскопия по ЦН

2 Микроскопия люминесцентная

3 Окраска по Граму

4 Посев на кровяной агар

5 Иммунохроматографический тест

6Посевы на питательные среды с TCH, PNB, натрий салициловокислым

7 Температурный тест роста культуры

692

8Культуральная характеристика роста на плотной питательной среде

Г. Выбор метода определения лекарственной чувствительности

1Лекарственная чувствительность МБТ на основе ПЦР-диагно- стики в диагностическом материала

2Лекарственная чувствительность МБТ на основе ПЦР-диагно- стики из выделенной культуры

3Лекарственная чувствительность МБТ на жидких питательных средах к ПТП первого ряда

4Лекарственная чувствительность МБТ на жидких питательных средах к ПТП второго ряда

5Лекарственная чувствительность МБТ на плотных питательных средах к ПТП первого ряда

6Лекарственная чувствительность МБТ на плотных питательных средах к ПТП второго ряда

Д.Необходимые процедуры внутреннего контроля качества исследований

1Посев штамма H37Rv на питательные среды с TCH, PNB, натрий салициловокислым

2 Контрольный положительный препарат по микроскопии

3 Контрольный отрицательный препарат по микроскопии

4 Контроль стерильности питательной среды

5 Посев штамма H37Rv на жидкие питательные среды с ПТП 6 Посев штамма H37Rv на плотные питательные среды с ПТП

7Посев лабораторного штамма МБТ с широкой (экстенсивной) лекарственной устойчивостью на жидкие питательные среды с ПТП

8Посев лабораторного штамма МБТ с широкой (экстенсивной) лекарственной устойчивостью на плотные питательные среды

с ПТП

9Использование контрольных штаммов H37Rv и с широкой (экстенсивной) лекарственной устойчивостью при проведении ПЦР-диагностики ЛЧ.

Задача № 4.

На BACTEC MGIT 960 получена культура из мокроты больного, время до получения роста составило 3 дня, ПЦР IS6110 отрицательна, посев на кровяной агар отрицателен, в мазке культуры с окраской по Ziehl-Neelsen обнаружены КУБ.

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ

693

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ

А. Какие выводы должен сделать врач противотуберкулезной лаборатории

а) получена M.tuberculosis;

б) получена смесь M.tuberculosis и неспецифической микрофлоры;

в) получена неспецифическая микрофлора г) получена культура нетуберкулезных микобактерий; д) получена культура M.avium.

Б. Какие дополнительные исследования должен провести врачбактериолог

а) еще раз посеять полученную культуру на BACTEC MGIT 960; б) провести идентификацию культуры до вида молекулярно-ге-

нетическими методами; в) никаких дополнительных исследований проводить не нужно;

г) посеять культуру на плотную среду Левенштейна-Йенсена; д) переобработать повторно диагностический материал, из кото-

рого была получена культура, и посеять на жидкую питательную среду в системе BACTEC MGIT 960.

В. Что необходимо сделать после подтверждения принадлежности полученной культуры к какому-либо виду НТМБ

а) выдать результат анализа врачу с запросом на повторную сдачу мокроты от этого же больного;

б) исследование полностью завершено. Больше ничего не требуется;

в) провести полный набор традиционных бактериологических и биохимических тестов для подтверждения результата идентификации;

г) провести внеплановую санитарную обработку помещений и оборудования;

д) определить оптимум роста культуры при разных температурах на плотных питательных средах.

Г. Назовите методы идентификации полученной культуры до вида

а) ПЦР в режиме реального времени со специфическими для разных видов микобактерий праймерами;

б) ИФА; в) иммунохроматографический тест, выявляющий антиген

MPT64;

г) бактериологические тесты (оптимум роста при разных температурах, рост на средах, содержащих различные препараты и т.д.) и биохимические реакции;

694

д) ПЦР IS6110

Д. Какой тест необходимо провести после того, как больному будет поставлен диагноз микобактериоз

а) тест на определение ЛЧ к противотуберкулезным препаратам и антибиотикам широкого спектра действия (определение минимально ингибирующих концентраций);

б) молекулярно-генетические идентификационные тесты; в) бактериологические идентификационные тесты;

г) тест на определение ЛЧ к противотуберкулезным препаратам и антибиотикам широкого спектра действия (определение критических концентраций)

д) никаких исследований больше проводить не нужно.

Задача № 5

На базе противотуберкулезной бактериологической лаборатории решено развернуть молекулярно-генетическую лабораторию для постановки анализов методом ПЦР в режиме реального времени.

А. Какие дополнительные помещения понадобится выделить

а) комната для проведения электрофореза; б) комната для выделения ДНК из диагностического материала;

в) комната для проведения амплификации в термоциклере с оптическим модулем;

г) чистая комната для раскапывания ПЦР-смеси; д) никаких дополнительных помещений не требуется.

Б. В какой зоне (комнате) должны храниться реагенты для постановки амплификации

а) зона для проведения электрофореза; б) зона для выделения ДНК;

в) зона для первичной предобработки диагностического материала;

г) зона для проведения амплификации; д) зона для раскапывания ПЦР-смеси.

В. Результат качественной ПЦР в режиме реального времени с праймерами, специфичными для МБТК, позволит сделать вывод

а) о наличии/отсутствии ДНК микобактерий туберкулезного комплекса в исследуемом образце;

б) о количестве микобактериальных клеток в исследуемом образце;

в) о наличии/отсутствии неспецифической микрофлоры в исследуемом образце;

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ

695

г) о наличии/отсутствии нетуберкулезных микобактерий в исследуемом образце;

д) о спектре лекарственной устойчивости МБТК.

Г. Использование пластиковых наконечников с фильтром при постановки ПЦР-анализа предотвращает:

а) инфицирование сотрудников лаборатории; б) контаминацию образцов; в) дезактивацию ДНК-полимеразы; г) денатурацию ДНК;

д) заброс содержимого наконечника в дозатор переменного объема.

Д. Выделение ДНК из диагностического материала необходимо проводить

а) на столе с металлическим покрытием при горящей спиртовой горелке;

б) в ламинарном шкафу I класса биологической безопасности; в) в ламинарном шкафу II класса биологической безопасности; г) в ламинарном шкафу III класса биологической безопасности; д) в вытяжном шкафу.

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ

696

Примерный вариант

БЛАНК ОТВЕТОВ НА ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЙ ТЕСТ к циклу тематического усовершенствования "Лабораторная диагностика туберкулеза"

слушатель ________________________________________________

Блок A (Необходимо выбрать один или несколько правильных вариантов ответа, которые отмечают в трафарете крестиком)

№ тестового

 

 

Варианты ответов

 

 

задания

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

а

б

 

в

 

г

д

 

 

 

 

 

 

 

 

1

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

3

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

4

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

5

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

6

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

7

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

8

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

9

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

10

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

11

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

12

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

13

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

14

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

15

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

16

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

17

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

18

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

19

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

20

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

21

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

22

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

23

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

24

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

25

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

26

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

27

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

28

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ

697