- •1.История развития методов культивирования изолированных клеток, тканей и органов растений
- •2.Культура растительных клеток и тканей как основа биотехнологии растений
- •3.Условия асептики при культивировании растительных обьектов in vitro
- •4.Методы стерилизации растительного материала при введении в культуру in vitro
- •5.Типы питательных сред для культивирования растительных клеток и тканей клеток in vitro
- •6.Фитогормоны как природные регуляторы роста и развитиях растений
- •7. Получение in vitro каллусных культур растений
- •8.Типы каллусных культур их характеристика
- •9.Основные направления использования каллусных культур растений в биотехнологии
- •10.Способы получения суспензионных культур растений
- •11. Типы клеточных суспензий растений
- •1. Пакетная культура
- •2. Непрерывная культура
- •12.Способы культивирования клеточных суспензий растений
- •13.Методы выращивания in vitro одиночных клеток растений
- •14.Методы выращивания протопластов растительных клеток
5.Типы питательных сред для культивирования растительных клеток и тканей клеток in vitro
По происхождению
Натуральные - среды, которые состоят из продуктов животного или растительного происхождения. К таким средам относятся овощные или фруктовые соки, молоко, отвары или экстракты, полученные из природных растительных и животных субстратов и т.д. На натуральных средах хорошо развиваются многие микроорганизмы, поскольку такие среды содержат большинство компонентов, необходимых для их роста и развития.
Полусинтетические – среды, главными компонентами которых являются соединения известного химического состава - углеводы, соли аммония, фосфаты и т.д., а натуральные природные компоненты содержатся в небольших количествах. Это может быть дрожжевой автолизат, почвенный экстракт или гидролизаты молока, казеина и т.п.
Синтетические - это среды, в которые входят лишь соединения определенного химического состава, взятые в точно указанных количествах. Они имеют стабильный химический состав, но не всегда обладают хорошими ростовыми свойствами, поскольку невозможно полностью и в нужном количестве внести все необходимые ростовые вещества в чисто химическом виде.
По назначению
Общего назначения - эти среды пригодны для культивирования большого количества известных микроорганизмов. На таких средах способны развиваться бактерии, актиномицеты, грибы, дрожжи.
Элективные - предназначены для выделения микроорганизмов из мест их естественного обитания. Они обеспечивают преимущественное развитие определенной группы микроорганизмов, для которой характерна общность физиологических свойств. Применяют их в процессе идентификации для получения так называемых «накопительных культур».
Дифференциально-диагностические - дают возможность быстро отличить одни виды микроорганизмов от других или выявить некоторые их особенности. При их составлении учитываются характерные питательные потребности конкретного микроорганизма. Дифференциально-диагностические среды особенно широко применяются в санитарной и медицинской микробиологии для быстрой идентификации определенных групп микроорганизмов.
По физическому состоянию
Жидкие - состоят на 90-98% изводы. Нашли широкое применение в лабораторной практике и в промышленном производстве для изучения физиолого-биохимических особенностей микроорганизмов, для накопления биомассы или продуктов обмена, а также поддержания и хранения многих микроорганизмов, плохо развивающихся на плотных средах.
Сыпучие – основу их составляют зерно, жмыхи, разваренное пшено, отруби и другие подобные вещества. Применяют их главным образом в промышленной микробиологии для культивирования некоторых продуцентов физиологически активных соединений, а также в коллекциях для сохранения культур микроорганизмов.
Плотные - среды, получаемые из жидких путем добавления к последним уплотняющих компонентов. Для уплотнения сред применяют агар-агар или желатин.
6.Фитогормоны как природные регуляторы роста и развитиях растений
Фитогормоны — соединения, с помощью которых осуществляется взаимодействие клеток, тканей и органов и которые в малых количествах необходимы для запуска и регуляции физиологических и морфогенетических программ растений (В. В. Полевой, 1989). Выделяют пять групп фитогормонов (рис. ):
ауксины,
гиббереллины,
цитокинины,
абсцизины,
этилен.
Общие черты Фитогормонов:
это сравнительно низкомолекулярные органические соединения,
действие проявляют в очень низких концентрациях (10 —10 моль/л);
как правило, образуются в одной части растения, а действуют в другой, куда транспортируются;
регулируют крупные морфогенетические и физиологические программы и подпрограммы;
регулируют синтез эндогенных вещества негормональной природы: фузикокцины, полиамины, бугатастины, фенолы и терпеноиды, производные мочевины, витамины и др.
Каждая клетка способна синтезировать все группы гормонов. Однако в системе целого растения на биосинтетические функции клеток накладывается ряд запретов.
Все регуляторные соединения
синтезируются из АК или ОК;
их биосинтез происходит из продуктов фотосинтеза и дыхания;
как стимуляторов, так и ингибиторов имеют общих предшественников (хорезмовая, мевалоновая кислоты).
Фитогормоны полифункциональны, регулируют многие физиологические процессы, физиологическое действие их на растение зависит от следующих факторов:
специфики объекта — видовых, органных, тканевых, возрастных и других особенностей растительного объекта, определяющих его восприимчивость к фитогормону;
концентрации фитогормона — активирует или ингибирует данный физиологический процесс или функцию;
соотношения данного фитогормона с другими;
обеспеченности растительного объекта необходимыми факторами минерального и углеродного питания;
напряженности факторов внешней среды (свет, температура, вода и др.), создающих необходимые условия для действия фитогормона.