- •1. Антибиотики, вырабатываемые микроорганизмами- эубактериями:
- •2. Микроорганизмами Actinomycetales.
- •5. Классификация по механизму ингибирующего действия на микробную клетку
- •2. Основные принципы химиотерапии инфекционных заболеваний.
- •4. Требования, которым должны отвечать антибиотики:
- •6. Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам:
- •8. Типы лекарственной устойчивости бактерий.
- •Плазмиды и их функции
- •Основные этапы инфекционного процесса:
- •Факторы, играющие роль в возникновении заболевания: входные ворота, вирулентность, патогенность, инфицирующая доза.
- •Динамика развития инфекционного заболевания:
- •Формы инфекции:
- •Биологический (экспериментальный) метод исследования
- •Учение об иммунитете. Реакции иммунитета. Реакция агглютинации и её разновидности. Основные направления в иммунологии.
- •Фагоцитирующие клетки
- •Методы изучения фагоцитоза
- •Гуморальные факторы неспецифич. Иммунитета:
- •Цитокины
- •Комплемент
- •Клетки иммунной системы
- •Плазматические клетки.
- •Процесс в лимфатич.Узле
- •Антигены
- •Антигенная структура бактерий:
- •1) Структурные:
- •Антитела (иммуноглобулины).
- •I. Простая радиальная иммунодиффузия в геле по Манчини:
- •II. Нефелометрия:
- •Гуморальный иммунный ответ
- •II. Активация в-лим.:
- •Реакция агглютинации
- •Факторы, способствующие развитию аллергии.
- •Гнт II типа (цитотоксический)
- •Гиперчувствительность замедленного типа (гзт) IV
- •Г ранулема-скопление эпителиоидных макрофагов.
- •III. Применение дополнительных методов исследования: Клинические пробы.
- •Лабораторные тесты.
- •Торможение миграции макрофагов
- •Аллергическая альтерация лейкоцитов
- •IV. Оценка полученных данных и выдача заключения («аллергический паспорт»).
- •II Методы выявления сенсибилизации in vitro.
- •Современные методы, применяемые для in vitro-диагностики аллергических заболеваний
- •1. Специфические методы лечения.
- •2. Неспецифические.
- •Вакцины и сыворотки. Использование антител и микробных антигенов в медицинской практике.
Методы изучения фагоцитоза
Прямой =микробы смешиваются с фагоцитами в пробирке или в животном, через 15 и 120 мин. -микропрепараты и окрашиваются по Романовскому-Гимзе. Микроскопически подсчитывается число фагоцитирующих клеток и фагоцитированных микробов. Расчет показателей:
• фагоцитарный показатель = кол-во фагоцитирующих фагоцитов: кол-во всех фагоцитов (N = 40-60%);
• фагоцитарное число (ФЧ) = кол-во фагоцитированных микробов : кол-во фагоцитрующих фагоцитов (N = 4-7);
• показатель завершенности фагоцитоза
Непрямой=изучается функциональная акт. фагоцитов на различных стадиях фагоцитоза: определение хемотаксической акт., определение адгезивных свойств, переваривающей способности.
Механизм презентации:
1) поглощение АГ АПК и заключение его в везикулу;
2) ферментативное расщепление (процессинг) АГ;
3) связывание АГ пептидов с ГКГС II;
4.1) транспортировка комплекса на пов. мембр., распознавание наивными Т-хелперами (CD4 + -лимф.)=комплекс иммунных реакций.
4.2) Презентация АГ, которые находятся в цитозоле в комплексе с ГКГС I. Распознаются Т-киллерами (CD8 + -лимфоцитами)= лизис только одной клетки
Гуморальные факторы неспецифич. Иммунитета:
Липидные медиаторы (эйкозаноиды) - продукты арахидоновой кислоты= простагландины, лейкотриены, тромбоксаны.
Антимикробные пептиды: дефенсины(нейтрофильные и эпителиальные, моноцитами, лимфоцитами, индуцибельно кератиноцитами,моноцитами, дендритными, тучными)
Кателицидины-противомикробный, ак. хемотаксиса и дегрануляции тучных.
Цитокины
Продуценты= моноциты/макрофаги и Т-лимфоциты (CD4).
Свойства: плейотропизм, полифункциональность, «цитокиновая сеть»= взаимосвязь, акт. в низких конц., перекрываемость.
-интерфероны –гамма= противовирусная и иммуномодуляция(лифц., фибробласты, НК),противоопухолевая и иммуномодулирующая
-интерлейкины (ИЛ1-ИЛ18)– опосредуют межлейкоцитарные взаимодействия; Продуцируют: ДК, макрофаги, НК, Т-В-лимф.
-хемокины
-ФНО (фактор некроза опухоли)
-ФТР (трансформирующие ростовые факторы) – регуляция воспаления и ангиогенеза;
-CSF (колониестимулирующий фактор)
Классификация по биологической акт.:
1. регуляторы воспалительных реакций: провосп. (ФНОα, ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-17, ИЛ-18), противо. (ТРФβ, ИЛ-10, ИЛ-4)
2. регуляторы клеточного ответа (ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-12, ИЛ-10, ИФНγ, ТРФβ).
3. регуляторы гуморального ответа (ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ- 10, ИЛ13, ИФНγ, ТРФβ).
Белки острой фазы(реактанты воспаления)
Секретируются гепатоцитами при тяжелых острых воспалительных процессах и в ответ на повреждение:
-положительные (продукция при воспалении усиливается). Пентраксины(С-реактивный белок, сывороточный амилоид А, пентраксин 3).
- отрицательные (снижается).
ФФ: растворимые PRR, запускают комплемент, уч. в опсонизации микроорганизмов, акт. нейтрофилы, моноциты/макрофаги, регулируют синтез цитокинов.
Комплемент
– комплекс сывороточных белков, опосредующих воспалительные реакции при участии гранулоцитов и макрофагов.
Синтезируются гепатоцитами, макрофагами и инейтрофилами.
ФФ: бактериолиз, цитолиз, стимул фагоцитоза, участие в аллергических реакциях немедленного типа, индукция синтеза медиаторов воспалительного ответа(ИЛ-1), реакции свертывания крови, способствуют межклеточным взаимодействиям для АПК.
Из 9 белковых компонентов (фракций) – от С1 до С9. На три блока:
I блок – распознающий (С1 с подфракциями);
II блок – активирующий (С2 – С4);
III блок – мембраноатакующий (С5 – С9).
Для субкомпонентов и продуктов расщепления добавляют строчные латинские (dq, C3b). Активированные компоненты - чертой над литерой, инактивированные - буквой «i» (iC3b). 4 фактора: B, D, H, P; регуляторные белки: С1-ингибитор, С3b-активатор.
В норме неакт. Появление микробов\продуктов → акт. комплемента по типу каскадной протеолитической реакции.
Пути всегда заканчиваются обр. мембраноатакующего комплекса.
Классический путь комплексами АгАТ
1)Инициатор активации = иммунный комплекс «антиген + антитело Ig M и G»+ субкомпонент С1q и присоединение C1r, C1s=комплекс С1 q r s.
2)протеолиз С4 до а и б фрагментов. С4б + С2= расщепление С2 на а и б. С2а+С4б=С3-конвертаза. Протеолиз С3 в а и б =акт. компонент С5-конвертаза(С4б2ф3б-протеаза)
3) С5 прикрепляется к мембране клетки-мишени=обр. литического комплекса (С5Ь, С6, С7, С8 и С9)= мембраноповреждающий (мембраноатакующий) комплекс
4)Мембраноатакующий блок обр. в мембране мишени поры= выход содержимого и гибели.
Лектиновый путь запускается пов. полисахаридами бактерий и грибов с маннозой:
1)Манноза распознается маннозосвязывающим лектином и ассоциированной с ним сериновая протеаза.
2) белок акт. С4-С2 фракции комплемента.
3) совпадает с классическим.
Альтернативный путь акт. полисахаридами микробных клеток=без антитела и С1, С4 и С2. Факторы пути= сывороточные белки: В, D и пропердин (Р).
- связывание C3 с полисахаридом клеточной стенки = распад;
- C3b взаимодействует с D= расщепление B (на Ba и Bb);
- C3b с Bb = C3bBb= С3-конвертаза;
- связывание с P (пропердин) стабилизирует С3-конвертазу;
- С3-конвертаза расщепляет еще С3, усиливая;
- С3-конвертаза (C3bBb) может присоединять С3b= C3bBbС3b= С5-конвертазой;
▪ краткая запись: С3+ЛПС→C3 ⇒ C3b+D→B ⇒ Bb+C3b+P→C3 ⇒ … ⇒ C3b’Bb’С3b.
Общие завершающие этапы:
С5-конвертаза расщепляет С5 на С5a и С5b. C5b связывает С6- С9= мембраноатакующий комплекс (С5bC6C7C8C9). С9 – белок-перфорин= пора.
Эффекты: усиление фагоцитоза; индукция острого воспаления (дегрануляция тучных клеток и базофилов):анафилотоксины: С5а, C3a, C4a; 21 ; участие в аллергических реакциях (за счет гранул тучных); цитолитическое (за счет С9); удаление иммунных комплексов антиген-антитело из организма; регуляция иммунного ответа (взаимодействия лимфоцитов с рецепторами).
На ранних этапах инфекции, когда нет комплексов Аг+Ат-лектиновым и альтернативным путём. По мере накопления антител - классический.
Регуляторные механизмы по происхождению (ферменты плазмы [1], неферментные белки плазмы [2] и белки мембран [3]), и по точкам приложения:
I. Регуляция начальных этапов акт.:
• С1-ингибитор [2] – инактивирует C1r, C1s (КП) и ассоциированные протеазы (ЛП);
• С4-связывающий белок [2] – присоединяет = С4 и связывает C4b из C4bC2a;
• фактор I [1] – инактивирует С3-конвертазы и С5-конвертазы;
• фактор Н [2] – кофактор фактора I;
• инактиватор анафилотоксинов [1] – разрушение C3a, C4a, C5a.
II. Защита клеток на начальных этапах:
• DAF [3] – препятствует образованию С3-конвертаз;
• MCP [3] – усиливает активность фактора I;
• CR1 (рецептор комплемента 1 типа на эритроцитах) – действие DAF + MCP.
III. Защита клеток на поздних этапах:
• S-белок [2] – связывает комплекс C5bC6C7;
• С8-связывающий белок [3] – ингибирует присоединение С8;
• CD59 [3] – ингибирует присоединение С9.
Дефекты (дефициты) компонентов системы комплемента: С1, С2, С4=АЗ, С3 – резкое снижение сопротивляемости. С5-С9 – тяжелое, генерализованное течение многих инфекций
Дефекты (дефициты) ингибиторов: С1-ингибитор –наследственный ангионевротический отек, DAF – внутрисосудистый гемолиз эритроцитов(пароксизмальная ночная гемоглобинурия)
Система интерферонов= фактор неспецифической резистентности.
ФФ: антивирусная, противоопухолевая, иммуномодулирующая и радиопротективная.
ИФН:
-а-ИФН синтезируют лейкоциты периферической крови
-р-ИФН синтезируют фибробласты;
-у-ИФН - стимулированные Т-лимфоциты, NK-клетки и макрофагов.
По способу образования:
-ИФН типа I (в ответ на обработку клеток вирусами, молекулами двухцепочечной РНК, полинуклеотидами)
-ИФН типа II (лимфоцитами и макрофагами, акт. индукторами; как цитокин).
ИФН видоспецифичны, не обладают вирусспецифичностью. Механизм антивирусного действия: индуцируют «антивирусное состояние» клетки (резистентность к проникновению или блокада репродукции вирусов).
Блокада репродуктивных процессов при проникновении вируса = угнетение трансляции. Взаимодействует с интактными неинфицированными клетками, препятствуя реализации репродуктивного цикла вирусов за счёт активации клеточных протеинкиназ.
ИФН I= подавление синтеза вирусных белков, отпочковывание дочерних популяций. Не влияют на ранние этапы репликативного цикла (адсорбцию, пенетрацию и «раздевание» вирусов) - противовирусное действие проявляется при заражении клеток инфекционными РНК. Не проникают в клетки, взаимодействуют с рецепторами (ганглиозиды или олигосахара).
ИФН II (рИФН) =акт. ИФН NO-синтетазы = пов. внутриклеточного оксида азота=ингиб. размножение вирусов. Акт. эффекторные NK-клеток, Т-лимфоцитов, моноцитов, тканевых макрофагов и гранулоцитов= антителозависимая и независимая цитотоксичность. Блокирует депротеинизацию («раздевание») вирусов, высвобождение зрелых частиц, нарушает метилирование вирусной РНК.
Приобретённые (индуцированные) факторы защиты проникновением инфекционного агента, обладающего признаками чужеродности (злокачественная клетка, трансплантат и др.)=специфич.реакции иммунной ист.
Главный комплекс гистосовместимости – MHC=гликопротеины, относятся к суперсемейству иммуноглобулинов:
Молекулы I и II классов: трансмембранные гликопротеины, контролируют иммунный ответ, распознаются поверхностными дифференцировочными CD-Аг клеток-мишеней =реакции клеточной цитотоксичности T-лимф.
• АГ I класса = тканевые Аг; Аг класса MHC I на пов. всех ядросодержащих клеток.
• Гены II класса контролируют ответ к тимусзависимым Аг; Аг класса II экспрессируются на мембранах иммунокомпетентных клеток, макрофаги, моноциты, В-лимф. и активированные Т-клетки.
Молекулы III класса: свободные белки (комплемента С2, С4, белки теплового шока, факторы некроза опухоли)- не участвуют в распознавании АГ.