Тема 20. ВАЛИДАЦИЯ ФАРМАКОПЕЙНЫХ МЕТОДОВ

Определение валидации

Одним из аспектов формирования гармонизированных требований к качеству лекарственных средств является внедрение валидированных методик.

Валидация метода ( Method validation ) − это подтверждение обоснованности выбора метода для определения показателей и норм качества фармацевтической продукции по каждому разделу нормативной документации

(НД).

Валидация выполняется с целью гарантировать, что аналитическая методология является точной, специфичной, воспроизводимой и правильной в пределах диапазона, в котором анализируется объект − (лекарственное средство (ЛС). Валидация − это “процесс обеспечения обоснованного доказательства, что данный метод делает то, для чего он предназначен.” Валидация аналитического метода проводится с целью подтверждения его адекватности цели использования.

Параметры валидации ( основные понятия и термины)

Правильность (точность) аналитического метода характеризует близость результатов испытаний, полученных данным методом, к истинному значению.

При количественном определении лекарственного вещества этот параметр может быть установлена путем применения аналитического метода к анализируемому объекту с использованием стандарта известной степени чистоты или путем сравнение результатов, полученных предлагаемой аналитической методикой, с результатами, которые получены другой независимой методикой, правильность которой известна.

В случае количественного определения вещества в лекарственной форме правильность аналитической методики устанавливается по результатам ее применения к анализу модельной смеси, включающей все компоненты лекарственной формы.

Правильность методики количественного определения идентифицированных примесных соединений устанавливается по результатам анализа методом добавок. При отсутствии образцов примесных соединений или в тех случаях, когда структура их не установлена, правильность предлагаемой ме-

643

тодики их определения должна быть подтверждена результатами анализа другой аналитической методикой с охарактеризованной правильностью.

Правильность должна быть оценена на основе не менее 9 определений на минимум 3 уровнях концентраций в пределе аналитической области (например, 3 повторности определения для 3 аналитических концентраций).

Воспроизводимость аналитического метода характеризует степень совпадения результатов индивидуальных испытаний при многократном его использовании. Она выражается величиной стандартного отклонения, коэффициентом вариации и доверительным интервалом и устанавливается при количественном определении не менее 9 аликвот образца, позволяющем статистически рассчитать эти параметры.

Воспроизводимость определяется в процессе разработки методики и характеризует надежность анализа в выбранных параметрах метода. Если измерения подвержены вариациям в условиях анализа, в методику должно быть включено соответствующее примечание.

Воспроизводимость хроматографических методик должна гарантироваться параметрами пригодности системы.

Межлабораторная воспроизводимость аналитического метода пока-

зывает степень воспроизводимости результатов испытаний, выполненных в различных лабораториях на соответствующем оборудовании, разными аналитиками в разное время.

Специфичность аналитического метода определяется его способностью достоверно определять лекарственное вещество в присутствии примесных и вспомогательных веществ.

Специфичность оценивается при валидации методов, применяемых для идентификации лекарственных веществ, определения примесей, установления количественного содержания вещества в образце и лекарственной форме.

Специфичность методик, применяемых для каждого из этих испытаний, достигается использованием стандартных образцов и может быть дополнительно подтверждена методом добавок соответствующих количеств лекарственного вещества и/или примесей, вспомогательных веществ. В тех случаях, когда примесные соединения не идентифицированы, специфичность предлагаемой методики должна быть обоснована результатами определений другим, независимым валидным методом.

Предел обнаружения выражается минимальным содержанием анализируемого вещества в образце, которое может быть обнаружено с помощью данной методики. Эта величина характеризует способность аналитической методики определять концентрации вещества выше и ниже требуемого уров-

644

ня. Предел обнаружения обычно выражается как концентрация анализируемого вещества (например, в процентах или долях на миллион - ppm) в образце и используется главным образом для испытаний на чистоту.

Для неинструментальных методов предел обнаружения устанавливается визуально. В случае использования инструментальных методов, имеющих фоновый сигнал, устанавливается минимальная концентрация, при которой анализируемое вещество может быть достоверно обнаружено. В таких случаях соотношение аналитического сигнала анализируемой пробы и фона составляет 2:1 или 3:1.

Предел обнаружения для инструментальных методов может быть установлен расчетным путем с использованием величине стандартного отклонения и угла наклона калибровочной кривой.

Предел количественного определения − это минимальное содержание анализируемого вещества, которое может быть количественно определено с приемлемой точностью и воспроизводимостью. Предел количественного определения выражается как концентрация анализируемого вещества в образце (в процентах, ppm). Данный параметр характеризует методику количественного определения низких концентраций вещества в образце, например, примесей в лекарственном веществе или лекарственных формах.

Установление предела количественного определения может проводиться визуально как для инструментальных, так и для неинструментальных методов, а также расчетным путем на основании величины стандартного отклонения и угла наклона калибровочной кривой.

Линейная зависимость устанавливается на основании результатов испытаний, которые пропорциональны концентрации анализируемого вещества в образце в пределах аналитической методики. Линейность результатов может быть представлена графически в виде зависимости аналитических сигналов от концентрации вещества (не менее 5).

Аналитическая методика должна быть охарактеризована следующими параметрами для подтверждения линейности: коэффициент регрессии, угол наклона линии регрессии и остаточная сумма площадей.

Аналитическая область методики в пределах которой соблюдается линейная зависимость, охватывает интервал между верхним и нижним пределами анализируемого вещества (включая эти пределы), в интервале которых данная методика обеспечивает его определение с требуемыми воспроизводимостью и точностью.

645

Аналитическая область обычно выражается в тех же единицах, что и результаты испытаний, полученных с помощью данной методики: процентах, миллионных долях.

Аналитическая область методики составляет:

−для количественного содержания анализируемого вещества в образце или лекарственной форме - 80-120% от определяемой величины;

−для показателя “однородность дозирования по содержанию” − 70130% от определяемой величины;

−для показателя “Растворение” - +/-20% от предела, регламентированного НД;

−для содержания примесных продуктов − 50-120% от регламентированных норм.

Для фармакологически активных или токсичных примесей предел количественной оценки должен быть соразмерен уровню, на котором примесь должна контролироваться. Если установление количественного содержания и контроль примесей выполняются одновременно и при этом используется 100%-ный стандартный образец, линейность должна охватывать область “от установленного уровня до 120% от уровня ее содержания”, регламентированного НД.

Пригодность системы − это интегральная часть многих аналитических методик, которая показывает надежность анализа в заданных условиях его проведения. Параметры пригодности системы обеспечивают соблюдение валидности метода в тех случаях, когда в процессе анализа возможны некоторые внутрилабораторные изменения условий анализа. Например, для метода высокоэффективной жидкостной хроматографии в наибольшей степени подвергаются изменениям стабильность аналитических растворов, рН подвижной фазы, ее состав, различные серии колонок, температура, скорость потока.

Область применения

Валидация фармакопейных методов проводится на этапе подготовки нормативных документов на новые лекарственные средства или при пересмотре их в дальнейшем.

Валидации подвергаются аналитические методы, применяемые для:

1)идентификации лекарственного вещества;

2)установления пределов содержания примесей родственных соединений, тяжелых металлов, остаточных органических растворителей;

3)количественного определения:

646

а) лекарственного вещества; б) лекарственного вещества (веществ) в составе лекарственных форм;

в) индивидуальных примесей и суммы примесных продуктов; г) консервантов.

Ревалидация необходима в случаях, когда произошли изменения в: а) синтезе лекарственного вещества; б) составе лекарственного средства; в) аналитической методике.

Степень значимости каждого параметров валидации

647

АЛФАВИТНЫЙ УКАЗАТЕЛЬ

А

Адреналин

−гидротартрат

−гидрохлорид

Азатиоприн

Азидотимидин

Аллопуринол

Алпрозалам

Амброксол

Аметоптерин

Амидопирин

Амикацин

−сульфат

Аминазин

Аминалон

Аминоптерин

Амлодипин Аммония хлорид Амоксициллин

−тригидрат

Ампициллин

−натриевая соль

−тригидрат

Амфетамин

Анальгин

Анаприлин

Андрокур

Анестезин

Антигриппин

Антипирин

Апоморфин

−гидрохлорид

Апорфин

Апрофен

Арбидол

Атенолол

Атровент

Атропин

−сульфат

АТФ

Аценокумарол

Ацетилдигитоксин

648

Ацикловир

Б

Бактрим

Бария

−сульфат

−сульфат для рентгеноскопии Барбитал Барбитал-натрий Бария сульфат Бендазола гидрохлорид

Бензатина бензилпенициллин Бензилпенициллин

−N,N’-дибензилэтилендиаминовая соль

−калиевая соль

−натриевая соль

−новокаиновая соль

Бензобамил

Бензонал

Бенфотиамин

Беродуал

Бициллин Бромгексина гидрохлорид Бромкамфора Бромокриптин Букарбан Бутадион

В

Валидол

Верапамил

Викасол

Винпоцетин Висмута нитрат основной Витамин А Витамин В1 Витамин В2 Витамины группы В12 Витамин Д1 Витамин Д2 Витамин Д3 Витамин Е Витамины группы Р Вода

649

−дистиллированная

−для инъекций

−очищенная Водорода пероксид

−раствор 3%

−раствор концентрированный (пергидроль)

−раствор 30%

Г

Гадодиамид Гадопентетата димеглумин для инъекций Галактоза Галотан

Гексаметилентетрамин

Гексамидин

Гексенал

Гентамицин

−сульфат

Гидроксикобаламин Гидроксихлорохина сульфат Гидрокортизон

−ацетат

Гидроперит

Глибенкламид

Глицерин

−раствор 10 % для инъекций Глюкоза

−раствор 10 %

−раствор 20 % Гоматропина гидробромид

Д

Дезоксикортикостерон − ацетат

Дексаметазон

Декстроза

Депонит Депо-провера Дермазин Дибазол Дигидрокверцитин

Дигидрострептомицин

Дигидроэргокальциферол

650

Дигидроэрготамин Дигиланид С Дигитоксин Дигоксин Димедрол Дипразин Дипрофиллин

Дифтордихлорметан [хладона-12] Дихлотиазид Диэтиламид никотиновой кислоты Диэтилстильбэстрол Доксициклин

− гидрохлорид Дофамин Дротаверина гидрохлорид Дэфедрин

Ж

Железа

−глюконат

−сульфат

−фумарат

И

Изадрин Известь хлорная Изониазид Изопреналин

−гидрохлорид

Индометацин

Иод

−раствор спиртовой

−раствор спиртовой

К

Калия

−ацетат

−бромид

−иодид

−хлорид

−хлорид-гипохлорит Кальция

651

−глюконат

−лактат

−сульфат

−сульфат жженый

−хлорид

Кальциферол

Каметон

Камфора

Канамицин

−моносульфат

−сульфат

Карбенициллин

−динатриевая соль Карбидопа Кислота

−аскорбиновая

−ацетилсалициловая

−бензойная

−борная

−глутаминовая

−карболовая

−мефенамовая

−налидиксовая

−никотиновая

−оксолиниевая

−салициловая

−сульфокамфорная

−фолиевая

−хлористоводородная Карбенициллина динатриевая соль Кверцетин Клонидина гидрохлорид Клофелин Кобамамид Кодеин

−фосфат

Кокаин − гидрохлорид

Кокарбоксилазы гидрохлорид Колларгол Коргликон Кордиамин Кортизон

652

− ацетат Кофеин

Кофеин-бензоат натрия Крахмал Ксантинола никотинат Ксероформа

Л

Лактоза

Ламивудин

Леводопа

Левомицетин

−стеарат

−сукцинат растворимый Лидокаин Лития карбонат Ломефлоксацин

М

Магния

−сульфат − раствор 25 %

−оксид

−пероксид

Масло

−вазелиновое

−какао

−печени акулы

−эвкалиптовое Меди сульфат

Медроксипрогестерона ацетат Мезапам Ментол Меркаптопурин Местранол Метазид

Метамизол-натрий Метандиенон Метандриол Метандростендиол Метандростенолон Метациклин

−гидрохлорид

653

Метенамин

Метилдофа

Метиландростендиол Метилметионинсульфония хлорид Метилтестостерон Метилурацил Метилэргометрин Метионин Метициллин Метотрексат Метронидазол Мономицин Морфин

− гидрохлорид

Н

Налтрексон

Нандролона

−деканоат

−фенилпропионат

Натрия

−бромид

−бензоат

−гидрокарбонат

−гидрокарбоната раствор для инъекций 5 %

−диклофенак

−иодид

−нитрит

−пара-аминосалицилат

−раствор 0,9 %

−салицилат

−тетраборат

−тиосульфат

−фторид

−хлорид

−цитрат

−цитрат раствор для инъекций Неодикумарин Неомицин Неулептил Ниаламид Никардипин Никотинамид

654

Нитразепам

Нитроглицерин Нитрогранулонг Мите Нитродерм ТТS Нитродиск Нитро-дур Нитрокор Нитроксолин

Нитролингвал-аэрозоль Нитро мазь 2% Нитро-мак ретард Нитронг мазь Нитронг мите Нитронг форте Нифедипин Ницерголин Новокаин

−гидрохлорид

−раствор спиртовой 6 % Нозепам Нонахлазин Норадреналин

−гидротартрат

Норколут

Норсульфазол

Норфлоксацин

Норэтистерон Но-шпа

О

Оксафенамид

Оксациллин

−натриевая соль

−оксациллина натриевой соли кристаллогидрата Оксикобаламин Окситетрациклин

−гидрохлорид

−дигидрат

Ондансетрон

Офлоксацин

П

Пантоцид Папаверина гидрохлорид

655

Парацетамол

Пармидин

Пенициламин

Пенициллин

Пенталгин Пентаэритрит тетранитрат Пикамилон Пилокарпин

− гидрохлорид Пипекурония бромид Пирацетам Пиридитол Пиридоксальфосфат

Пиридоксина гидрохлорид Платифиллин Прегнин Преднизолон Преднизолона ацетат Преднизон Прогестерон Промедол Пропазин Пропифеназон Протаргол Протионамид

Р

Резерпин

Резорцин Релиф суппозитории Ретаболил Ретинол

−ацетат

−пальмитат

Рибоксин

Рибофлавин Рибофлавин-мононуклеотид Рингера раствор Риодипин Рутин Рутозид

С

Салазопиридазин

656

Салициламид

Сальбутамол

Сахароза Серебра нитрат

Серотонина адипинат Сибазон Синкумар Синтомицин Синэстрол Скополамин

−гидробромид

Солафур

Сонапакс Спирт этиловый

−раствор 40 %

−раствор 70 %

−раствор 90 %

−раствор 95 % Ставудин Стрептидин Стрептобиозамин Стрептомицин

−сульфат

Стрептоцид Строфантин К Сульфадиметоксин Сульфален Сульфацил-натрий

−раствор 30 % Сульфокамфокаин

−10% раствор для инъекций Суматриптана сукцинат Сусадрин Сускард Сустак мите Сустак форте Сустонит

Т

Темисал

Теобромин

Теофиллин

Терпингидрат

Тестостерон

657

−пропионат

−пропионат 1% и 5% масляные растворы Тетацин-кальция раствор для инъекций 10% Тетрациклин

−гидрохлорид

Тиамин

−бромид

−хлорид

Тизерцин

Тимол

Тимолол Тиопентал-натрий Тиреоидин L-тироксин Токоферола ацетат Трамал Трансдерм-нитро Триазолам Триамцинолон Трииодтиронин Тринитролонг Триптофан Трифтазин Трихомонацид Тровентол Тропафен Тропацин Трописетрон

У

Уросульфан

Ф

Феназепам

Фенилбутазон

Фенилсалицилат Фенилэфрина гидрохлорид Феназон Фенацетин Фенобарбитал Феноболин

Феноксиметилпенициллин

Фенол

Фенотерол

658

Фепромарон Флуметазона пивалат Флуоксетин Флуоцинолона ацетонид Форидон Формальдегида раствор Фосфотиамин Фталазол Фтивазид Фторафур Фторотан Фторурацил Фторфеназин Фурагин

− растворимый Фурадонин Фуразолидон Фурацилин Фуросемид

Х

Хингамин

Хинидин

Хинин

−дигидрохлорид

−дигидрохлорида раствор 50 % для инъекций

−гидрохлорид

−гидрохлорид раствор 3 %

−сульфат

Хинозол

Хинолин

Хлозепид

Хлоралгидрат Хлорамин Б Хлорбутанолгидрат Хлороформ Хлорохина фосфат Хлорхинальдол Хлорэтил Холекальциферол

Ц

Целанид

Цефалексин

659

Цефалоспорин С Цефалотин

− натриевая соль Цефокситина натриевая соль Цианокобаламин Циклоплатам Цинка

−оксид

−сульфат

Ципробай Ципротерона ацетат Ципрофлоксацин Цисплатин Цистеин Цитарабин

Э

Эмоксипин

Эноксацин

Энтеросептол

Эргокальциферол

Эргостерин

Эргометрин

Эрготамин

Эринит

Эстрадиол

−дипропионат Этакридина лактат Этаперазин Этилбискумацетат Этилморфина гидрохлорид Этинилэстрадиол Этионамид Этацизин Этмозин Эуфиллин Эфедрин

−гидрохлорид

Эфир

−диэтиловый

−для наркоза стабилизированный

−медицинский

660