ГБОУ ВПО Первый МГМУ имени И.М. Сеченова. Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии Фармацевтический факультет
Раздел: « физиология микробов »
Занятие 5. Дата ______. Тема: «Принципы культивирования бактерий. Выделение и идентификация чистых культур бактерий. Культивирование анаэробов»
Таблица 3. Классификация питательных сред
|
Группа питательных сред |
Жидкие |
Плотные |
|
Основные (простые) | ||
|
Простые среды |
Мясо-пептонный бульон (МПБ) |
Мясо-пептонный агар (МПА) |
|
Специальные (сложные) | ||
|
А. Сложные специальные |
|
|
|
Б. Элективные или избирательные (преимущественно растет определенный вид микроорганизмов, другие не растут или растут плохо) |
|
|
|
В. Среды обогащения (всегда жидкие; используются для накопления микробов определенного вида. Рост сопутствующей микрофлоры подавляется ингибиторами) |
|
________ |
|
Г. Дифференциально-диагностические (применяются для первичной дифференциации бактерий преимущественно по биохимическим свойствам, а также для идентификации бактерий) |
|
|
|
Д. Хромогенные (всегда плотные; применяются для дифференциации бактерий по культуральным свойствам) |
________ |
|
|
Е. Транспортные (для доставки исследуемого материала в лабораторию) |
|
|
|
Синтетические | ||
|
|
-------- |
|
Протокол “выделение и идентификация чистых культур бактерий”
1 ЭТАП. Посев исследуемого материала на чашки Петри с плотной питательной средой (МПА) методом штриха.
Инкубация при37оС в течение 24 часов.
Примечание 1: в том случае, если в исследуемом материале содержится незначительное количество возбудителя, то его предварительно накапливают путем посева материала в жидкую питательную среду (см. среды обогащения), а затем после инкубации при 37оС производят пересев на плотную среду.
Примечание 2: выделение и идентификацию чистой культуры анаэробов производится в анаэробных условиях.
2 ЭТАП. Идентификация выделенной чистой культуры (чистых культур) по культуральным, морфологическим и тинкториальным свойствам. Для этого проводят:
а) макро- и микроскопическое исследование колоний, выросших на плотной питательной среде (культуральные свойства);
б) приготовление мазка из половины колонии каждого вида и окраску препарата по Граму (морфологические и тинкториальные свойства);
Примечание: микроскопия материала из колоний производится также с целью проверки чистоты культуры.
в) пересев оставшейся части колонии на скошенный агар для накопления выделенной чистой культуры.
Инкубация при37оС в течение 24 часов.
Таблица 4. Схема описания колоний
|
№
|
Размеры |
Форма |
Цвет |
Поверхность |
Края |
Консистенция |
Структура |
Морфология; Окраска по Граму |
Предполагаемый возбудитель |
|
1
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
2
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|