диссертации / 56

101

Из приведенной таблицы видно, что данные не соответствуют нормальному распределению (тест Колмогорова-Смирнова), поэтому колоночный анализ проводим, используя непараметрический непарный t-

критерий с коррекцией Уэлша (табл. 3.21)

Таблица 3.21. Специфическое связывание эстрадиола и прогестерона в МНФК периферической крови пациенток в зависимости от возраста пациенток (фемтомоль/млн клеток).

Из таблицы видно, что статистической значимости различий рецепции эстрадиола и прогестерона в МНФК периферической крови достигнуто не было. Однако, обращает на себя внимание очевидная тенденция к снижению уровня РП у пациенток старшей возрастной группы, что перекликается с данными о снижении вероятности положительного результата ВРТ у этих пациенток.

В. Наружный генитальный эндометриоз (НГЭ).

Аналогичное разбиение на группы в зависимости от наличия в анамнезе диагноза «наружный генитальный эндометриоз». Описательная статистика данных представлена в таблице 3.22.

Таблица 3.22. Описательная статистика данных специфического связывания эстрадиола и прогестерона в МНФК периферической крови в зависимости от наличия в анамнезе пациенток диагноза «наружный генитальный эндометриоз».

Из приведенной таблицы видно, что данные не соответствуют нормальному распределению (тест Колмогорова-Смирнова), поэтому колоночный анализ проводим, используя непараметрический непарный t-

критерий с коррекцией Уэлша (табл. 3.23)

Таблица 3.23. Специфическое связывание эстрадиола и прогестерона в МНФК периферической крови в зависимости от наличия в анамнезе пациенток диагноза «наружный генитальный эндометриоз»

(фемтомоль/млн клеток).

103

Из таблицы видно, что статистической значимости различий специфического связывания эстрадиола и прогестерона в МНФК периферической крови достигнуто не было. Тем не менее, можно отметить тенденцию к повышению уровня обьема связывания прогестерона в МНФК у пациенток с эндометриозом, что вполне ожидаемо, так как эндометриоз является эстрогенозависимым заболеванием и развивается на фоне относительной гиперэстрогеногистии. В свою очередь, эстрадиол является фактором промотирующим экспрессию РП в ткани (в том числе на МНФК).

Г. Бесплодие неясного генеза (БНГ).

Аналогичное разделение на группы в зависимости от наличия в анамнезе диагноза «бесплодие неясного генеза». Описательная статистика данных представлена в таблице 3.24.

Таблица 3.24. Описательная статистика специфического показателей связывания эстрадиола и прогестерона в МНФК периферической крови пациенток в зависимости от наличия в анамнезе диагноза «бесплодие неясного генеза».

Из приведенной таблицы видно, что данные не соответствуют нормальному распределению (тест Колмогорова-Смирнова), поэтому колоночный анализ проводим, используя непараметрический непарный t-

критерий с коррекцией Уэлша (табл. 3.25)

Таблица 3.25. Специфическое связывание эстрадиола и прогестерона в МНФК периферической крови пациенток в зависимости от наличия в анамнезе диагноза «бесплодие неясного генеза» (фемтомоль/млн клеток).

105

Из таблицы видно, что статистической значимости различий специфического связывания эстрадиола и прогестерона в МНФК периферической крови достигнуто не было. Если ранее нами показано, что трубно-перитонеальный фактор ассоциируется с повышенной емкостью связывания прогестерона в МНФК, то вполне закономерны результаты о тенденции снижения рецепции прогестерона в МНФК при диагнозе

«бесплодие неясного генеза».

Корреляции между РП и РЭ в МНФК периферической крови пациенток, включенных в программу ВРТ.

Известно, что половые стероиды осуществляют контроль над метаболическими и пролиферативными процессами тканей-мишеней. При этом их взаимоотношения в различных системах (тканевой и клеточный контекст) варьируют от потенцирования до антагонизма. Именно поэтому в отношении динамических процессов более надежными (объективными)

показателями будут не столько абсолютные значения плотности рецепторов,

сколько их количественное соотношение или наличие корреляционной связи.

Поэтому для оценки стабильности (предсказуемости, управляемости)

системы мы использовали корреляционный анализ. Результаты анализа приведены в таблице 3.26.

Таблица 3.26. Результаты корреляционного анализа соотношения специфического связывания рецепторов эстрадиола и прогестерона в МНФК у пациенток включенных в длинный протокол ЭКО в зависимости от причины бесплодия.

106

Из приведенных данных видно, что относительная стабильность

(положительная корреляция между РП и РЭ) наблюдается только у пациенток с трубным бесплодием. Тенденция к лучшей управляемости системы выявлена у пациенток более молодого возраста и у пациенток с четко определенной причиной бесплодия. Эти результаты соответствуют литературным данным о факторах риска низкой эффективности ВРТ. Такое соответствие дополнительно подтверждает адекватность выбранного нами в качестве маркера прогноза эффективности ВРТ – плотность рецепторов прогестерона в МНФК.

3.4.2. Сравнительный анализ рецепции эстрадиола и прогестерона в

МНФК и цитозоле эндометрия.

Показатели рецепции половых стероидов в МНФК (фемтомоль/млн кл.)

и цитозоле эндометрия (фемтомоль/мг белка) значительно варьируют.

Средние значения в МНФК: РП 4,49 фемтомоль/млн кл., РЭ - 2,53

фемтомоль/млн.кл. и РП/РЭ = 1,77; в цитозоле РП= 113 фемтомоль/мг белка,

РЭ= 82 фемтомоль/мг белка; РП/РЭ = 1,38. Тем не менее, сравнительный анализ позволил выявить достоверную положительную корреляцию между рецепцией прогестерона в указанных объектах (МНФК и цитозоле эндомнтрия): для РП коэффициент корреляции Спирмена r = 0,71 (P=0,0032, alpha=0,05). В то же время не обнаружено корреляции в рецепции эстрадиола, что может быть следствием недостаточности объема выборки для данного параметра.

Учитывая, что рецепция половых стероидов в эндометрии используется рядом исследователей в качестве предиктора эффективности имплантации

[38], выявленная нами тесная положительная корреляция между рецепцией

107

прогестерона в эндометрии и МНФК может служить основанием для предложения в качестве аналогичного маркера использовать параметры стероидной рецепции в мононуклеарных клетках периферической крови.

Насколько предложенный маркер будет чувствителен можно определить в сравнительном исследовании рецепции и исходов программы ЭКО у конкретных пациенток.

Таким образом, нами выдвинута рабочая гипотеза: специфическое связывание прогестерона в МНФК может служить косвенным критерием функциональной активности (готовности к имплантации) эндометрия.

3.4.3. Сравнительный анализ специфического связывания прогестерона

иэстрадиола МНФ клеток периферической крови пациенток,

включенных в программу ЭКО до начала стимуляциии гормонального

статуса.

Анализ всего массива данных не позволил выявить наличия взаимосвязи между исследуемыми параметрами. Индивидуальный анализ и разделение пациенток на группы в зависимости от успеха ЭКО продемонстрировал некоторые закономерности, представленные в таблице

3.27

Таблица 3.27. Описательная статистика значений уровня половых стероидов в плазме крови и специфического связывания эстрадиола и прогестерона в МНФК пациенток, включенных в программу ЭКО в зависимости от успеха имплантации.

Единственная достоверная тесная отрицательная корреляция выявлена между уровнем эстрадиола-17-бета в крови и плотностью рецепторов прогестерона в МНФК ( r = -0,62, р = 0,008).

И вновь наиболее достоверным параметром выступает рецепция прогестерона в МНФК. Следовательно, ни параметры уровня половых стероидов, ни сравнительный анализ количества гормонов и рецепторов, не могут служить надежным критерием эффективности программы ЭКО.

3.5 Результаты проведенного цикла ЭКО и ПЭ.

3.5.1 Cравнительный анализ клинических характеристик двух групп пациенток по основным параметрам цикла ЭКО и ПЭ.

Суммарная доза гонадотропинов щироко варьировала от 1000 до 4200

МЕ на цикл. Трансвагинальная пункция яичников производилась через 11-16

дней от начала стимуляции. Было получено от 2 до 43 ооцитов (в среднем –

13), у 10-ти пациенток (20%) возник синдром гиперстимуляции яичников

(СГСЯ) легкой степени, не потребовавший лечения, а у 1-й пациентки (2%) –

средней степени тяжести, что потребовало проведения инфузионной терапии,

госпитализации и динамического наблюдения. В 27 наблюдениях оплодотворение произошло в результате инсеминации ооцитов, частично (в 9

случаях) или полностью (в 14 случаях) было произведено ИКСИ. В

результате оплодотворения было получено от 1 до 18 эмбрионов и на 2-6

сутки после пункции в полость матки были перенесены от 1 до 3 эмбрионов: 6 пациенткам (12%) был перенесен 1 эмбрион, 29 (58%) – 2 эмбриона, 15 (30%) пациенткам – 3 эмбриона. Показанием к переносу 3-х эмбрионов

110

являлся поздний репродуктивный возраст, 2 и более неудачные попытки ЭКО в анамнезе. Поддержкe лютеиновой фазы всем пациенткам осуществляли одинаково: с 1-го дня после пункции назначался препарат Утрожестан ежедневно в суточной дозе 600мг (200мг 3р/д) интравагинально до анализа крови на ХГ, который проводили через 12-14 дней после переноса эмбрионов.

Таблица 3.28 Клинические характеристики пациенток в цикле ЭКО и

ПЭ.

Как видно из таблицы 3.28, пациентки обеих групп достоверно не отличались по следующим параметрам: суммарной введенной дозе гонадотропинов (p>0,05), длительности стимуляции (p>0,05), количеству полученных при пункции яичников ооцитов (p>0,05), доле циклов с проведением ИКСИ (p>0,05), количеству 2рn зигот (p>0,05), количеству перенесенных в полость матки эмбрионов (p>0,05), суткам переноса (p>0,05),