Частная микра учебное пос-е и тд

481

Профилактика. Для специфической профилактики с целью создания искусственного активного иммунитета используют “Секстанатоксин”, в состав которого входят столбнячный анатоксин, ботулинические анатоксины типов А, В и Е, а также анатоксины C. perfringens и C. novyi.

Вопросы для контроля усвоения материала

1.Таксономическое положение клостридий.

2.Представители клостридий – возбудители анаэробной инфекции.

3.Морфологические, культуральные и биохимические свойства клостридий.

4.Факторы патогенности возбудителей клостридиальной анаэробной инфекции.

5.Патогенез клостридиальной анаэробной инфекции.

6.Клиника клостридиальной анаэробной инфекции.

7.Принципы диагностики, профилактики и лечения клостридиальной анаэробной инфекции.

Тренировочные тесты

1.Возбудителями анаэробной инфекции являются представители семейства:

1.1 Coxiellaceae

1.2 Campylobacteraceae

1.3 Clostridiaceae

1.4 Corynebacteriaceae

1.5 Chlamydiaceae

2.По морфологии возбудители клостридиальной анаэробной инфекции являются: 2.1 грамположительными спорообразующими палочками 2.2 грамотрицательными палочками 2.3 стрептококками 2.4 стафилококками 2.5 извитыми формами

3.Клостридии являются:

3.1грамотрицательными палочками

3.2грамположительными палочками

3.3грамотрицательными кокками

3.4грамположительными кокками

3.5извитыми формами

4. Возбудителями газовой гангрены являются:

4.1C. perfringens

4.2C. tetani

4.3C. botulinum

4.4C. histolyticum

4.5C. septicum

482

5. Для выращивания клостридий используют среду:

5.1Эндо

5.2Китта-Тароцци

5.3Левина

5.4Плоскирева

5.5Вильсона-Блера

6. Клостридии являются:

6.1спорообразующими анаэробными палочками

6.2спорообразующими аэробными палочками

6.3неспорообразующими бактериями

6.4извитыми бактериями

6.5кокками

7. Для развития газовой анаэробной гангрены необходимы условия:

7.1травматический некроз тканей

7.2анаэробиоз

7.3наличие клостридий в ране

7.4проникновение клостридий в кровь

7.5доступ в рану кислорода

8. Заражение человека клостридиями газовой анаэробной гангрены происходит при:

8.1контакте с больным человеком

8.2употреблении инфицированных продуктов

8.3загрязнении ран почвой

8.4внутривенном введении лекарств

8.5переливании инфицированной крови

9.Локализация возбудителя при клостридиальной анаэробной инфекции: 9.1 спинномозговая жидкость 9.2 входные ворота инфекции 9.3 кровь 9.4 паренхиматозные органы

9.5 лимфатические узлы

10.Для специфической профилактики клостридиальной анаэробной инфекции используется:

10.1 живая вакцина

10.2 инактивированная вакцина

10.3 анатоксин

10.4 антитоксин

10.5 антибиотики

Правильные ответы: 1.3; 2.1; 3.2; 4.1, 4.4, 4.5; 5.2, 5.5; 6.1; 7.1, 7.2, 7.3; 8.3; 9.2; 10.3.

483

7. Грамположительные палочки неправильной формы

7.1. Коринебактерии

Коринебактерии объединяют большую группу прямых или изогнутых неподвижных аспорогенных грамположительных палочек. Они относятся к типу

(филуму) Actinobacteria, классу Actinobacteria, порядку Corynebacteriales, семейству Corynebacteriaceae, роду Corynebacterium, включающему в настоящее время 89

видов, из них 53 вида имеют медицинское значение. К видам коринебактерий, имеющим медицинское значение, относятся C. amycolatum, C. auris, C. glucuronolyticum, C. jeikeium, C. minutissimum, C. propinquum, C. pseudodiphtheriticum, C. pseudotuberculosis, C. striatum, C. ulcerans, C. urealyticum, C. xerosis и др. Многие виды коринебактерий выделяются от животных, птиц и из внешней среды (воды, пищевых продуктов, окружающих предметов).

Среди коринебактерий выделяют патогенные и непатогенные для человека и животных виды. Типичными патогенными для человека коринебактериями являются C. diphtheria, C. ulcerans, C. pseudotuberculosis. Они вызывают у человека дифтерию и дифтериеподобные заболевания. Выделяют также недифтерийные или условно-патогенные коринебактерии, которые могут входить в число нормальных обитателей кожи, слизистых оболочек зева, носоглотки, глаз, дыхательных путей, уретры и половых органов человека. У лиц с нарушениями иммунитета они могут вызывать гнойно-септические заболевания.

Коринебактерии, близкие по морфологическим и биохимическим свойствам возбудителю дифтерии, часто называются коринеформными бактериями или дифтероидами. Они широко распространены в почве, воздухе, на пищевых продуктах. Термин “дифтероиды” в настоящее время не употребляется, так как большинство видов коринеформных бактерий не имеет сходства с возбудителем дифтерии.

В цитоплазме коринебактерий часто обнаруживаются зерна волютина, а в клеточной стенке – миколовые кислоты. По способности к биотрансформации жиров коринебактерии подразделяются на липолитические и нелиполитические. Большинство видов коринебактерий являются нелиполитическими бактериями. В свою очередь нелиполитические коринебактерии подразделяются на ферментирующие и неферментирующие виды. К ферментирующим коринебактериям относится возбудитель дифтерии.

Дифтерия - это острое инфекционное заболевание, характеризующееся общей интоксикацией организма и образованием в месте входных ворот инфекции пленчатых налетов беловато-серого цвета. Название заболевания происходит от греч. diphthera - пленка, перепонка, кожа. Образование плотной пленки, спаянной с подлежащими тканями, характерно для этого заболевания. Дифтерия относится к

антропонозным инфекциям.

Историческая справка. Дифтерия известна с глубокой древности. Еще древнеримский философ и врач А. Каппадокийский (рисунок 7.1) называл дифтерию сирийской и египетской болезнью, сопровождающейся “злокачественными язвами на миндалинах, ведущими к удушению”.

487

Возбудитель дифтерии обладает полиморфизмом: в препаратах могут встречаться нитевидные, ветвящиеся, кокковидные, дрожжеподобные формы. Дифтерийные палочки неподвижные, спор не образуют, имеют микрокапсулу и пили (рисунок 7.9).

Рисунок 7.9 – Клетки C. Diphtheriae, электронная микроскопия: ЦМ – цитоплазматическая мембрана, КС – клеточная стенка, МК – микрокапсула (Мотавкина Н.С., Артемкин В.Д., 1976).

Коринебактерии дифтерии легко окрашиваются анилиновыми красителями. По Граму они окрашиваются в фиолетовый цвет, то есть являются грамположительными (рисунок 7.10).

Рисунок 7.10 - C. diphtheriae, окраска по Граму. Заимствовано из Интернетресурсов.

При окраске препаратов щелочным метиленовым синим или по методу Нейссера на полюсах коринебактерий обнаруживаются зерна волютина (зерна Бабеша-Эрнста). Количество зерен волютина у дифтерийной палочки не превышает 6, непатогенные коринебактерии содержат 18-20 зерен. По химической природе волютин представляет собой полиметафосфаты, которые служат для микробной клетки запасными питательными веществами. При окраске по Граму зерна волютина не выявляются.

При использовании щелочного метиленового синего тело клетки окрашивается в голубой цвет, а зерна волютина – в темно-синий (темно-бордовый) или черный цвет (рисунок 7.11).

489

По строению клеточной стенки коринебактерии отличаются от других грамположительных бактерий. В состав клеточной стенки возбудителя дифтерии входят специфичные только для коринебактерий липиды: эфиры коринемиколовой и коринемиколиновой кислот, димиколат трегалозы, фосфатиды маннозы и инозита (фосфатидилинозитол-маннозит). Миколовые кислоты являются фактором жгутообразования (корд-фактором) коринебактерий. Наличие липидов обусловливает скопление клеток в препарате (мазке). Клеточная стенка содержит также пептидогликан и арабиногалактан – полимеры полисахаридной природы. Поверхностная белковая структура C. diphtheriae представляет собой капсульную субстанцию - микрокапсулу (рисунок 7.14).

ABC

Рисунок 7.14 – Схема строения клеточной стенки C. diphtheriae.

Слой миколовых кислот и гликолипидов пронизан пориноподобными белками, образующими каналы. В микрокапсуле располагаются пили (фимбрии). У C. diphtheriae выделяют три типа пилей, различающихся по структуре: SpaA, SpaD, SpaH.

Геном C. diphtheriae представлен кольцевой молекулой ДНК. Некоторые штаммы C. diphtheriae содержат плазмиды в виде кольцевых молекул ДНК. Плазмиды детерминируют синтез белков. В составе бактериальной хромосомы имеется нуклеотидная последовательность гена tox (1683 п.о.), привнесенная бактериофагом. Указанная нуклеотидная последовательность полностью идентичная у коринефагов β, γ и ω.

Культуральные свойства. Коринебактерии - факультативные анаэробы, хорошо растут в аэробных условиях. Оптимальная температура роста - 35-37ºС. Возбудитель дифтерии не растет на простых питательных средах, так как не продуцирует протеазы, расщепляющие белки до аминокислот. Коринебактерии усваивают аминокислоты только из продуктов гидролиза белков, поэтому питательные среды для выращивания таких бактерий должны содержать аминокислоты. Кроме того в состав питательных сред должны входить органические источники энергии, соли магния, кальция, витамины, кровь или

490

сыворотка крови животных, теллурит калия. Элективными средами для выращивания C. diphtheriae являются:

-свернутая кровяная сыворотка (среда Ру);

-сыворотка с добавлением сахарного бульона (среда Ру-Лёффлера);

-кровяной агар (КА);

-кровяной теллуритовый агар (среда Клауберга II);

-теллурит-шоколадный агар Маклеода;

-хинозольная среда Бучина;

-цистин-теллурит-сывороточная среда Тинсдаля-Садыковой.

На этих средах рост коринебактерий отмечается уже через 10-12 часов. На кровяном агаре возбудитель дифтерии формирует мелкие серо-белые колонии, а на кровяных теллуритовых средах колонии окрашены в темно-серый или черный цвет

(рисунок 7.15).

а б Рисунок 7.15 – Характер роста возбудителя дифтерии на кровяном агаре (а) и на

кровяном теллуритовом агаре (б). Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Высокие концентрации теллурита калия подавляют рост посторонних микроорганизмов, не оказывая влияния на C. diphtheriae. Колонии возбудителя дифтерии на средах с теллуритом окрашиваются в темно-серый или черный цвет в результате восстановления теллурита до металлического теллура, который накапливается внутри бактерий в виде кристаллов.

На среде Бучина через 24-48 часов C. diphtheriae образует колонии синего цвета и на месте колоний среда также приобретает фиолетовый цвет.

На среде Тинсдаля-Садыковой C. diphtheriae образуют серые или темно-

коричневые колонии, окруженные темно-коричневым ореолом.

В настоящее время для выявления коринебактерий широко используется специальная питательная среда – коринебакагар. Эта среда содержит панкреатический гидролизат рыбной муки, стимулятор роста, натрия хлорид, глюкозу и агар. Перед использованием в среду добавляют теллурит калия. На этой среде коринебактерии образуют шероховатые колонии темно-серого цвета со складчатой поверхностью и неровными изрезанными краями (вид “маргаритки”) или темно-серые (серовато-черные) блестящие гладкие колонии с ровными краями

(рисунок 7.16).