Частная микра учебное пос-е и тд

371

а б Рисунок 4.81 - Положительная (а) и отрицательная (б) реакция агглютинации.

Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Для постановки реакции агглютинации используют коммерческий диагностикум туляремийный жидкий для РА.

Для определения титра антител используется эритроцитарный туляремийный антигенный диагностикум, а для выявления антигенов – диагностикум эритроцитарный туляремийный иммуноглобулиновый (рисунок 4.82).

а б Рисунок 4.82 - Диагностикум эритроцитарный туляремийный антигенный (а) и

диагностикум эритроцитарный туляремийный иммуноглобулиновый (б). Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Антитела в крови больных появляются на 10-15 день заболевания в титре 1:50-1:100, а в последующем нарастают до титра 1:400-1:800. Диагностическим титром считается 1:100 и выше. Для подтверждения заболевания обязательно должно выявляться нарастание титра антител. У привитых против туляремии лиц антитела обнаруживаются через 2-3 недели после вакцинации, затем нарастают до титра 1:160-1:320, в последующем незначительно снижаются и сохраняются в течение 5-7 лет.

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) является более чувствительной, чем реакция агглютинации. Она используется как для ранней, так и для ретроспективной диагностики, а также с целью определения иммунологического состояния привитых лиц. У больных туляремией антитела обнаруживаются через 1-2 недели после заболевания, через 1-1,5 месяца их титр достигает максимальных показателей (1:10000-1:20000), после чего титр антител снижается и длительное время сохраняется на уровне 1:100-1:200. У привитых лиц количество антител повышается через 1-1,5 месяца до титра 1:2000-1:5000, а затем снижается и

372

сохраняется в течение нескольких лет на уровне 1:20-1:80. РПГА проводят с эритроцитами, сенсибилизированными туляремийным антигеном (диагностикум эритроцитарный туляремийный антигенный жидкий).

Для диагностики туляремии и определения состояния иммунитета у вакцинированных используют иммуноферментный анализ (ИФА). Этот метод позволяет обнаруживать специфические антитела через 6-10 дней после заболевания. Для постановки ИФА применяют иммуноферментную диагностическую тест-систему (рисунок 4.83).

Рисунок 4.83 - Тест-система диагностическая для выявления возбудителя туляремии с помощью иммуноферментного анализа. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Выявление туляремийных антител происходит за счет взаимодействия антигена туляремийного микроба, адсорбированного на носителе (планшете), с туляремийными антителами сыворотки крови. Образовавшийся комплекс “антиген+антитело” выявляют с помощью конъюгата и субстрата (конъюгат - антиглобулиновые антитела, меченые ферментом; субстрат или хромоген – соединение, изменяющее окраску под действием фермента).

Для раннего выявления туляремии или ретроспективной диагностики ставят кожную аллергическую пробу с тулярином, так как состояние аллергии возникает рано (на 3-5 день болезни) и сохраняется длительное время (несколько лет). Аллергическая проба проводится внутрикожно (для ранней диагностики туляремии) или накожно (для определения иммунитета у привитых лиц).

Для внутрикожной пробы используют тулярин (аллерген туляремийный), представляющий собой взвесь туляремийных бактерий вакцинного штамма, убитых нагреванием при 70ОС в течение 1 часа. Взвесь готовят на 3% глицерине. В 1 мл препарата содержится 500 млн. убитых бактерий. Препарат выпускается в ампулах, содержащих 1 мл взвеси (10 человеко-доз). Вводится 0,1 мл (100 млн. микробных клеток) препарата строго внутрикожно в области предплечья. Результаты учитываются через 24-48 часов. Положительная реакция проявляется формированием инфильтрата (уплотнения) и гиперемии диаметром не менее 0,5 см. Положительная аллергическая проба отмечается во время болезни, у переболевших лиц, а также у привитых против туляремии.

Для определения иммунитета у привитых против туляремии лиц применяют накожный тулярин, который содержит в 1 мл 10 млрд. убитых бактерий (20 человеко-доз). Каплю препарата наносят на кожу в области плеча и стерильным скарификатором производится две насечки. Затем тулярин тщательно втирают в

374

Вакцинация людей живой туляремийной вакциной приводит к формированию специфического и длительного гуморального и клеточного иммунитета. Такой же иммунитет формируется и у людей, переболевших туляремией.

В1956 г. культура штамма F. tularensis 15 НИИЭГ была передана в США. При посеве культуры было получено 2 типа колоний – голубые и серые. В дальнейшем на основе голубых колоний был получен вакцинный штамм LVS (Live Vaccine Strain).

Внастоящее время для приготовления вакцин против туляремии используются 2 штамма: в России – штамм F. tularensis 15 НИИЭГ, в США и странах Западной Европы – штамм F. tularensis LVS.

Вакцина на основе штамма F. tularensis 15 НИИЭГ применяется накожно и внутрикожно. Прививкам подлежит население, проживающее на энзоотичных по туляремии территориях. Ежегодно в России против туляремии прививают более 1,5 млн. человек. В частности, в 2012 г. было вакцинировано 275559 человек и ревакцинировано 1240626 человек.

Вцелях профилактики туляремии важное значение имеет контроль за природными очагами инфекции, истребление грызунов и переносчиков, охрана источников водоснабжения, складских помещений, жилищ от грызунов. При мониторинге за природными очагами туляремии проводят выделение культур возбудителя или выявление туляремийного антигена в объектах внешней среды. Обязательно периодически производится анализ заболеваемости людей туляремией, прогнозирование эпизоотической и эпидемической ситуации, обоснование объемов проведения профилактических мероприятий.

Лечение. Для лечения туляремии применяют антибиотики (стрептомицин, гентамицин, амикацин, нетилмицин, тетрациклин, доксициклин, левомицетин, рифампицин). Стрептомицин назначают по 1,0 г в сутки в течение 8-10 дней, тетрациклин – по 2,0 г в сутки, доксициклин – 0,2 г в сутки, левомицетин – 2-2,5 г в сутки, канамицин – по 0,5 г 4 раза в сутки, сизомицин – по 0,1 г 3 раза в сутки. Курс лечения антибиотиками продолжают до 5-7 дня нормальной температуры тела. Наряду с антибиотиками используют дезинтоксикационные средства, антигистаминные и противовоспалительные препараты, витамины.

Вопросы для контроля усвоения материала

1.История открытия и изучения возбудителя туляремии.

2.Таксономия возбудителя туляремии.

3.Морфологические и тинкториальные свойства туляремийного микроба.

4.Культуральные свойства возбудителя туляремии.

5.Антигенная структура туляремийного микроба.

6.Устойчивость туляремийного микроба во внешней среде, резистентность к физическим и химическим факторам.

7.Эпидемиология туляремии (источник инфекции, механизмы и пути заражения человека туляремией).

8.Факторы патогенности возбудителя туляремии.

375

9.Патогенез и клинические формы туляремии.

10.Принципы и методы лабораторной диагностики туляремии.

11.Специфическая профилактика туляремии.

12.Основные принципы лечения туляремии.

Тренировочные тесты

1.Возбудитель туляремии выделен (один правильный ответ): 1.1 Д.И. Ивановским 1.2 И.И. Мечниковым

1.3 Д. Мак-Коем и Ч. Чепиным 1.4 Л. Пастером 1.5 Р. Кохом

2.Возбудитель туляремии относится к (один правильный ответ): 2.1 прионам 2.2 бактериям 2.3 вирусам 2.4 грибам 2.5 риккетсиям

3.Возбудитель туляремии относится к роду (один правильный ответ): 3.1 Yersinia

3.2 Brucella

3.3 Francisella

3.4 Escherichia

3.5 Bacillus

4.Возбудитель туляремии по морфологии представляет собой (один правильный ответ):

4.1 микрококки

4.2 тетракокки

4.3 коккобактерии

4.4 стрептококки

4.5 стафилококки

5. По типу дыхания возбудитель туляремии является (один правильный ответ):

5.1строгим аэробом

5.2строгим анаэробом

5.3микроаэрофилом

5.4факультативным анаэробом

5.5аэробом и микроаэрофилом

6. Особенность возбудителя туляремии (один правильный ответ):

6.1растет при отсутствии кислорода

6.2оптимальная температура выращивания – 36-38ОС

376

6.3оптимальная температура выращивания – 41ОС

6.4хорошо растет на МПА

6.5быстро растет

7.Для культивирования возбудителя туляремии используют среды (один правильный ответ):

7.1 универсальные

7.2 Эндо и Плоскирева

7.3 теллуритовые

7.4 картофельно-глицериновые

7.5 желточные среды с цистеином, кровью

8.Для выращивания туляремийного микроба используют (несколько правильных ответов):

8.1 желточную среду Мак-Коя

8.2 среду Левина

8.3 среду Фрэнсиса

8.4 висмут-сульфитный агар

8.5 среду Китта-Тароцци

9.Факторами патогенности возбудителя туляремии являются (несколько правильных ответов):

9.1 эндотоксин

9.2 нейраминидаза

9.3 капсула

9.4 плазмокоагулаза

9.5 экзотоксин

10.Особенностями патогенеза туляремии являются (несколько правильных ответов):

10.1 проникновение возбудителя в ликвор

10.2 уход возбудителя из фагосомы

10.3 сенсибилизация организма

10.4 формирование гранулемы

10.5 продуцирование экзотоксина

11. Источник инфекции при туляремии (несколько правильных ответов):

11.1водяные крысы

11.2больной человек

11.3зайцы

11.4бактерионосители

11.5водоплавающая птица

12. Переносчики возбудителя туляремии (несколько правильных ответов):

12.1вши

12.2слепни

377

12.3клещи

12.4комары

12.5пчелы

13.Пути передачи инфекции при туляремии (несколько правильных ответов): 13.1 контактный 13.2 воздушно-пылевой 13.3 алиментарный 13.4 трансмиссивный 13.5 половой

14.Клинические симптомы туляремии (несколько правильных ответов):

14.1мигрирующая эритема

14.2везикулезная сыпь

14.3бубон

14.4повышение температуры до 41ОС

14.5профузный понос

15.Материал для исследования при диагностике туляремии (несколько правильных ответов):

15.1 фекалии

15.2 пунктат бубонов

15.3 кровь

15.4 желудочный сок

15.5 ликвор

16.Лабораторную диагностику на туляремию осуществляют (несколько правильных ответов):

16.1 в лабораториях крупных лечебных учреждений

16.2 в лабораториях медицинских ВУЗов

16.3 в лабораториях медицинских училищ

16.4 в противочумных институтах

16.5 в лабораториях, имеющих специальное разрешение

17. Тулярин представляет собой (один правильный ответ):

17.1живой авирулентный штамм возбудителя

17.2фильтрат бульонной культуры вирулентного штамма

17.3лизат бульонной культуры вакцинного штамма

17.4убитую нагреванием культуру возбудителя туляремии

17.5убитую УФО культуру возбудителя туляремии

18. Чистая культура возбудителя туляремии выделяется (один правильный ответ):

18.1посевом на мясо-пептонный агар

18.2посевом на кровяной агар

18.3посевом в жидкую среду

378

18.4заражением лабораторных животных с последующим высевом на желточную среду

18.5заражением клеточных культур

19. Экспресс-метод диагностики туляремии (один правильный ответ):

19.1бактериологический

19.2РИФ

19.3бактериоскопический

19.4аллергический

19.5биологический

20. В трупах грызунов антиген возбудителя туляремии определяют с помощью реакции (несколько правильных ответов):

20.1непрямой гемагглютинации

20.2реакции нейтрализации антител

20.3термопреципитации

20.4иммуноферментного метода

20.5реакции связывания комплемента

21. Для серологической диагностики туляремии используют (несколько правильных ответов):

21.1реакцию Хеддельсона

21.2реакцию Кумбса

21.3опсоно-фагоцитарную реакцию

21.4РА

21.5РПГА

22. Для аллергической диагностики туляремии применяют (один правильный ответ):

22.1бруцеллин

22.2пестин

22.3антраксин

22.4тулярин

22.5туберкулин

23. Метод специфической профилактики туляремии (один правильный ответ):

23.1уничтожение грызунов

23.2уничтожение переносчиков

23.3вакцинация животных

23.4вакцинация всего населения

23.5вакцинация контингентов риска

24. Для специфической профилактики туляремии используют (один правильный ответ):

24.1живую вакцину Гайского-Эльберта

24.2убитую вакцину

24.3анатоксин

379

24.4вакцину СТИ

24.5вакцину EV

25. Туляремийную вакцину вводят (один правильный ответ):

25.1внутримышечно

25.2внутривенно

25.3подкожно

25.4накожно и внутрикожно

25.5внутрикожно и подкожно

Правильные ответы: 1.3; 2.2; 3.3; 4.3; 5.4; 6.2; 7.5; 8.1, 8.3; 9.1, 9.2, 9.3; 10.2, 10.3,

10.4; 11.1, 11.3; 12.2, 12.3, 12.4; 13.1, 13.2, 13.3, 13.4; 14.3, 14.4; 15.2, 15.3; 16.4, 16.5; 17.4; 18.4; 19.2; 20.1, 20.4; 21.4, 21.5; 22.4; 23.5; 24.1; 25.4.

5. Грамотрицательные анаэробные палочки

5.1. Бактероиды

Историческая справка. Бактероиды (греч. bakterion – палочка, eidos – вид, форма) представляют отдельный род грамотрицательных облигатных анаэробных палочек, не образующих споры. Они являются условно-патогенными микроорганизмами, входящими в состав нормальной микробиоты человека и животных.

Первое описание бактероидов принадлежит A. Veillon и A. Zuber, которые в 1898 г. из гноя при аппендиците выделили анаэробные микроорганизмы, не

380

образующие спор (Bacteroides fragilis). Родовое название Bacteroides было введено в 1919 г. A. Castellani и A. Chalmers.

Классификация. Бактероиды относятся к царству бактерий, типу

Bacteroidetes, классу Bacteroidia, порядку Bacteroidales, семейству Bacteroidaceae,

роду Bacteroides. Тип (филум, отдел) Bacteroidetes включает в себя следующих представителей, имеющих медицинское значение (таблица 5.1).

Таблица 5.1 - Представители типа Bacteroidetes, имеющие медицинское значение

состав рода Bacteroides, по морфологическим и биохимическим признакам, продукции жирных кислот, способности поражать те или иные органы и ткани подразделяются на группы, например, fragilis, melaninogenicus-oralis, asaccharolyticus. Клиническое значение имеют виды B. fragilis, B. thetaiotaomicron, B. vulgatus.

При классификации бактероидов выделяют особую группу Bacteroides fragilis, включающую в себя сам вид B. fragilis, а также B. distasonis, B. ovatus, B. thetaiotaomicron и B. vulgatus. Эти бактерии устойчивы к пенициллину за счет продукции бета-лактамаз, являются представителями нормальной микробиоты желудочно-кишечного тракта и преобладают при внутрибрюшной инфекции, при периректальных абсцессах, пролежнях.

Морфологические и тинкториальные свойства. Бактероиды представляют собой грамотрицательные палочки, которые отличаются высоким полиморфизмом. Клетки бактероидов могут быть кокковидной (коккобациллы), палочковидной или ветвящейся формы размером 1-3х0,5-0,8 мкм. В мазке располагаются одиночно, парами, небольшими цепочками (рисунок 5.1).