metodichka_2
.pdfМикробиота мочеполового тракта.
До недавнего времени считалось, что почки, мочевой пузырь, матка, простата
– стерильны. В настоящее время в моче здоровых женщин идентифицированы 45
родов бактерий с преобладанием лактобактерий и бактероидов. В моче здоровых мужчин обнаружены 72 рода бактерий с доминированием коринебактерий, стреп-
тококков и лактобактерий. В мочевом пузыре могут присутствовать до 14 родов бактерий с преобладанием лактобактерий.
Микробиота влагалища и ее значение для становления микробиоты но-
ворожденных.
Микробиота влагалища представляет собой динамическую экосистему. Влага-
лище при рождении стерильно. Затем, в течение нескольких дней заселяется пре-
имущественно грамположительной флорой (анаэробные бактерии, стафилококки,
коринебактерии). В это период рН влагалища нейтральна – 7,0. В период полового созревания под влиянием половых гормонов (эстрогенов) вагинальный эпителий утолщается и накапливает гликоген. Это, в свою очередь, стимулирует размноже-
ние лактобактерий, которые активно расщепляют гликоген с образованием молоч-
ной кислоты. рН влагалища снижается до 4,0. Подкисление лактобактериями вла-
галищного секрета и продукция ими перекиси водорода ведут к подавлению роста посторонней микрофлоры.
У женщин репродуктивного возраста молекулярно-генетическими методами выявлены более 265 видов бактерий. Микробный спектр влагалища отличается у женщин различных возрастных категорий и этнических групп. Основными (рези-
дентными) представителями микробиоты данного биотопа являются различные виды лактобактерий. Во влагалище в норме преобладают анаэробные микроорга-
низмы. Соотношение анаэробы/аэробы составляет 10/1. Анаэробы представлены бифидобактериями, бактероидами, пропионибактериями, пептострептококками и др., аэробы – коринебактериями, стафилококками, стрептококками и др. Реже в со-
ставе микробиоты обнаруживают гарднереллы (грамотрицательные анаэробные
14
коккобактерии), микоплазмы, мобилюнкусы (грамотрицательные палочки в виде полумесяца).
|
|
Гарднереллы |
Мобилюнкусы |
В период беременности бактериальное разнообразие уменьшается с преобла-
данием лактобактерий. Ребенок, проходя через родовые пути, контаминируется нормальными представителями микробиоты матери, что в дальнейшем положитель-
но влияет на формирование его микрофлоры.
Положительная роль нормальной микрофлоры для организма
1.Представители резидентной микрофлоры формируют своеобразную биопленку на поверхности кожи и слизистых оболочек. Это препятствует заселению их бо-
лезнетворными бактериями, попадающими извне. Способность нормальной мик-
рофлоры ограничивать рост патогенов называется колонизационной резистент-
ностью. В частности, для толстого кишечника колонизационную резистентность создают бифидо- и лактобактерии.
2.Обеспечивает иммуномодулирующую и иммуностимулирующую функции: ока-
зывает постоянное антигенное стимулирующее действие, что способствует раз-
витию лимфоидной ткани кишечника, синтезу секреторных IgА, активации фаго-
цитоза. Это приводит к формированию и нормальному функционированию им-
мунной системы.
15
3.Обладает анатагонистическим действием по отношению к болезнетворным бактериям. В частности, кишечная палочка является антагонистом возбудителей брюшного тифа и дизентерии.
4.Инактивирует токсические вещества и способствует их выведению из организма.
5.Участвует в энтеральном синтезе витаминов группы В, К, никотиновой кислоты.
6.Участвует в липидном, водно-солевом обмене, обмене желчных кислот.
7.Улучшает перистальтику кишечника и процессы всасывания питательных веществ в кишечном тракте.
Эубиоз и дисбиоз.
Организм человека и колонизирующие его микробы представляют единую экологическую систему, находящуюся в состоянии динамического равновесия.
Эубиоз – относительно стабильные видовые и количественные соотношения микробов, населяющих организм.
Дисбактериоз или дисбиоз – (от греч. dis – приставка отрицания и «bacteria») состояние микробного дисбаланса организма. Дисбактериоз не является болезнью, но может быть следствием какого-либо заболевания. В России под дисбактериозом обычно понимают дисбактериоз кишечника – это «клинико-лабораторный синдром, связанный с изменением качественного и/или количественного состава микрофлоры толстого кишечника» (Отраслевой стандарт «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника». ОСТ 915000.11.0004-2003, Приказ МЗ РФ №
231от 09.06.2003).
Вофициальных международных классификациях болезней (МКБ-10), заболевания с названием «дисбактериоз» не существует.
За рубежом существует диагноз «синдром избыточного бактериального роста». Он ставится при обнаружении в 1мл содержимого тонкой кишки >105 микроорганизмов и/или появлении в ней флоры, характерной для толстой кишки.
16
ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА
1. Выделение чистой культуры аэробов (продолжение).
III этап исследования. Через 24 часа на скошенном МПА обнаруживают одно-
родный рост в виде сплошного налета желтоватого цвета, а в МПБ – диффузно-
мутящий рост. С целью проверки чистоты выделенной культуры готовят мазок,
окрашивают по Граму и микроскопируют. Для оценки чистоты культуры необ-
ходимо просматривать не менее 10 полей зрения. Обнаружение в мазках со ско-
шенного МПА только гроздьевидно расположенных грамположительных кокков, а
в мазках из МПБ – грамотрицательных палочек свидетельствует о чистоте выде-
ленных культур.
Для биохимической идентификации грамотрицательных палочковидных бакте-
рий до вида используют набора реагентов «Мультимикротесты». Планшеты с тест-
системами помещают в термостат при температуре 370С на 24 часа.
IV этап исследования. Учет биохимических свойств выделенной культуры:
глюкоза |
лактоза |
маннит |
сахароза |
мальтоза |
индол |
сероводород |
|
кислота |
кислота |
кислота |
- |
кислота |
+ |
- |
|
газ |
газ |
газ |
газ |
||||
|
|
|
Вывод: из смеси бактерий выделены две культуры. Первая культура иден-
тифицирована как E.coli на основании морфо-тинкториальных (грамотрицательные палочки), культуральных (полупрозрачные, гладкие колонии средних размеров) и
биохимических свойств. Вторая культура идентифицирована как Staphylococcus spp.
на основании морфо-тинкториальных (грамположительные гроздьевидно располо-
женные кокки) и культуральных (гладкие выпуклые колонии золотистого цвета)
свойств.
2. Санитарно-бактериологическое исследование чистоты воздуха в бактериоло-
гической лаборатории.
I этап исследования. Производят посев воздуха аспирационным методом с по-
мощью аппарата Кротова. Для определения микробного числа воздух засевают в
17
объеме 100 л на чашку с МПА. Для определения санитарно-показательного микроба
(S.aureus) воздух засевают в объеме 250 л на чашку с ЖСА. Посевы инкубируют в термостате при температуре 37°С 24-48 часов.
II этап исследования. Подсчет выросших колоний и определение микробного числа и количества S.aureus в 1 м3 воздуха.
Микробное число = количество выросших колоний на МПА × 10
Количество S.aureus в 1 м3 воздуха = количество колоний, выросших на ЖСА × 4.
3. Микроскопия мазков чистых культур представителей микробиоты толстого кишечника: бифидобактерии, лактобактерии, бактероиды, эшерихии, энтеро-
кокки, стафилококки, клостридии, протей, клебсиеллы, кандиды.
18