Международная классификация шигелл

Группа	Вид	Серовар			Подсеровар
A	Shigella dysenteriae	1	10
B	Shigella flexneri	1 2 3 4 5 x-вар y-вар			1a 1b 2a 2b 3a 3b 4a 4b 5a 5b
C	Shigella boydii	1	15
D	Shigella sonnei

4. Возбудители кишечных эшерихиозов: таксономия, морфология и тинкториальные свойства, факторы вирулентности, устойчивость к действию физических и химических факторов, способы заражения и клинические проявления болезни у человека, иммунитет, методы лабораторной диагностики, препараты для терапии и профилактики.

Род Escherichia назван в честь немецкого ученого Т. Эшери­ха, который в 1885 г. выделил из фекалий человека и описал ки­шечную палочку - Escherichia coli. В этот род входят условно-па­тогенные кишечные палочки, являющиеся постоянными обитателями кишечника человека и животных, а также патогенные для человека варианты, в том числе энтеропатогенные.

С-во: Enterobacteriaceae

Род: Escherichia

Вид: Escherichia coli

Морфология, культуральные, биохимические свойства. Эшерихии представляют собой короткие толстые палочки, в препаратах распо­лагаются беспорядочно. Спор не образуют, некоторые варианты об­разуют в организме микрокапсулу. Есть варианты подвижные (перит­рихи), есть неподвижные. Грамотрицательны.

Факультативные анаэробы, растут на простых питательных сре­дах при рН 7,2-7,8, оптимум для роста 37^оС. Штаммы E. coli, вы­деленные от человека и теплокровных животных, развиваются и при 43-35^оС, а кишечные палочки рыб и холоднокровных животных при такой температуре не размножаются. Это различие используют для определения санитарного состояния воды, так как только обнаруже­ние E. coli теплокровных свидетельствует о фекальном загрязне­нии.

На дифференциально-диагностических средах Эндо (малиновый цвет с металлическим блеском), Левина (черно-синие колонии), Плоскирева кишечные палочки образуют окрашенные колонии, так как разлагают лактозу.

Они обладают выраженными сахаролитическими свойствами: ферментируют с образованием кислоты и газа лактозу, глюкозу и другие углеводы и протеолитическими свойс­твами - разлагают белки до индола. Не продуцирует сероводород. Желатин не разжижают. Некоторые варианты разлагают сахарозу.

Вид	Ферментация углеводов							Образование
	лактоза		глюкоза	маннит	сахароза			индола		Н2S
Escherichia coli	КГ		КГ	КГ	КГ			+		-
Salmonella typhi			К	К
Salmonella paratyphi A	-		КГ	КГ	-			-		-
Salmonella paratyphi B (shottmuelleri)	-		КГ	КГ	-			-		+
Shigella dysenteriae	-		К	-	-			ё		-
Shigella flexneri			К	К				ё
Shigella boydii			К	К	К			ё
Shigella sonnei	К медлен- но		К	К	К медленно			-		-

Антигены. Кишечные палочки имеют О-антиген, который являет­ся основным для установления серовара, в частности, при диагнос­тике кишечных эшерихиозов. К-антиген - это общее обозначение всех поверхностных антигенов, среди которых есть термолабильные и термостабильные. У возбудителей кишечных эшерихиозов это тер­молабильный В-антиген. Он расположен более поверхностно, чем О-антиген, поэтому для выявления О-антигена в лаборатории разру­шают В-антиген путем кипячения исследуемой культуры. Н-антигены имеются у подвижных вариантов кишечной палочки, при типировании не определяются. Антигенную структуру штаммов эшерихиий записы­вают в виде формулы, например, E. coli О111:К58:Н12.

Токсинообразование. Имеют эндотоксин, цитотоксин.

Факторы патогенности: токсины, пили, факторы адгезии

Устойчивость. В воде, в почве кишечные палочки месяцами ос­таются живыми. При 60^оС погибают через 15 минут, при кипячении - немедленно. Чувствительны к дезинфицирующим веществам.

Значение E. coli для человека.

1)Кишечная палочка - предс­тавитель нормальной микрофлоры толстой кишки, приносит пользу как антагонист патогенных бактерий и грибов, принимает участие в синтезе витаминов.

2)E. coli является санитарно-показательным микроорганизмом для определения фекального загрязнения воды, пи­щевых продуктов, оборудования пищеблоков, рук и спецодежды меди­цинского первсонала и т.д. E. coli при этом расценивается не как возбудитель заболевания, а как показатель загрязнения выделения­ми человека, которые могут содержать возбудителей кишечных забо­леваний.

3)Кишечные палочки как условно-патогенные микроорганиз­мы у людей с ослабленным иммунитетом могут вызвать гнойно-воспа­лительные процессы за пределами желудочно-кишечного тракта: пие­литы, циститы, холециститы. У пациентов с выраженным иммунодефи­цитом может развиться коли-сепсис. Гнойное воспаление ран, пос­тинъекционные абсцессы могут возникнуть в результате заражения извне. Кишечные палочки вызывают пищевые токсикоинфекции при на­коплении в большом количестве в пищевом продукте.

4)Энетеропато­генные кишечные палочки вызывают инфекционные острые кишечные заболевания - эшерихиозы. Они возникают как экзогенные инфекции. Источником являются больные люди или бактерионосители, механизм заражения - фекально-оральный. Болеют чаще дети, главным образом в возрасте до 2 лет.

Среди возбудителей эшерихиозов различают энтеропатогенные кишечные палочки (ЭПКП), энтероинвазивные кишечные палочки (ЭИКП), энтеротоксигенные кишечные палочки (ЭТКП), энтерогемолитические кишечные палочки (ЭГКП). Они различаются по антигенной структуре, по возрасту больных и по характеру заболе­вания.

Признак	Категория эшерихий
	ЭПКП	ЭИКП	ЭТКП	ЭГКП
Синдром	сальмонел- лоподобный	дизентерие- подобный	холероподо-бный	геморрагический энтерит с развитием почечной недостаточности
Возраст больных	дети до 1 года	взрослые и дети	взрослые и дети	преимущественно дети
Локализация	тонкий кишечник	толстая кишка	тонкий кишечник	тонкий кишечник
Антигены	сходны с шигеллами	сходны с сальмонел- лами
Пример сероваров	О26 О55 О11	О84 О124 О44	О1 О5 О6 О15 О148	О157

Энтерогемолитические кишечные палочки (ЭГКП), обнаруженные в последнее время, вызывают геморрагический колит и гемолитичес­кую уремию. Эти возбудители вырабатывают Шига-подобный токсин, который адсорбируется энтеральными клетками и вызывает токсине­мию. Описаны вспышки тяжелопротекающих пищевых токсикоинфекций, вызванных E. coli О157, среди детей.

Иммунитет. Устойчивость к эшерихиозам у детей раннего воз­раста создается бифидум-флорой кишечника и антителами грудного материнского молока. После перенесенного заболевания иммунитет слабо выражен, возможны повторные случаи.

Микробиологическая диагностика основана на выделении чистой культуры возбудителя и определения вида и серовара. При гнойно-воспалительных заболеваниях исследуемым материалом служат моча, желчь, гной из ран и из полости абсцесса, при сепсисе - кровь, при пищевых токсикоинфекциях - рвотные массы, промывные воды желудка, пищевые продукты.

Выделенные чистые культуры идентифицируют по биохимическим и антигенным свойствам.

При острых кишечных инфекциях исследуют испражнения. Посевы производят на дифференциально-диагностические среды, обычно на среду Эндо. Из выросших изолированных колоний кишечной палочки отбирают те, которые агглютинируются диагностическими ОВ-сыво­ротками. Пересевают их на скошенный агар, выделяют чистую куль­туру и затем определяют серовар в развернутой реакции агглютина­ции с живой культурой (В-агглютинация) и прогретой кипячением культурой (О-агглютинация ).

Профилактика и лечение. Профилактика эшерихиозов - это, в первую очередь, соблюдение правил личной гигиены. Это выполнение санитарно-гигиенических правил в родильных домах, молочных кух­нях, в детских садах, в стационарах, на предприятиях пищевой промышленности и общественного питания, постоянный надзор за ка­чеством пищевых продуктов и воды.

Для лечения эшерихиозов применяют препараты из микробов-ан­тагонистов: бифидумбактерин, лактобактерин. Кишечные палочки чувствительны к антибиотикам (левомицетин, тетрациклин, полимик­син), к нитрофурановым препаратам. Но эффективность лечения сни­жается из-за распространения лекарственноустойчивых эшерихий, приобретающих устойчивость путем передачи R-плазмид.

5. Возбудители пищевых токсикоинфекций (сальмонеллезных гастроэнтеритов) таксономия, морфология и тинкториальные свойства, факторы вирулентности, устойчивость к действию физических и химических факторов, способы заражения и клинические проявления болезни у человека, иммунитет, методы лабораторной диагностики, препараты для терапии и профилактики.

Токсономия. Возбудители относятся к роду Salmonella , семейству Enterobacteriaceae, отделу Gracilicutes. а сальмонеллезы - S. typhimurium, S. enteritidis, S. heidelberg, S. newport, S. haifa, S. derby, S. suipestifer, S. anatum, S. lоndon и др. (чаще всего - первыми четырьмя видами).

Морфологические и тинкториальные свойства. Сальмонеллы мелкие (1-3 х 0,6-0,8 мкм) палочки, перитрихи, спор, капсул не образуют; грамотрицательны.

Культуральные свойства. Факультативные анаэробы; не требовательны к питательным средам. На МПА образуют средне-мелкие прозрачные слегка выпуклые S-формы колонии (S. schottmuelleri на периферии колонии формирует слизистый вал); на МПБ - равномерное помутнение. На дифференциально-диагностических средах Эндо, Левина, Плоскирева растут в виде бесцветных колоний, т. к. не расщепляют лактозу, входящую в состав среды. На висмут-сульфитном агаре образуют черные колонии с черной окраской среды под ней (кроме S. paratyphi).

Сахаролитические свойства: расщепляют глюкозу, маннит, мальтозу до кислоты и газа, а S. typhi только до кислоты. Все сальмонеллы не ферментируют лактозу и сахарозу. Протеолитические свойства: расщепляют белки с образованием H2S (за исключением S. paratyphi); индол не образуют; желатин не разжижают. Оксидаза-отрицательны, каталаза-положительны.

Антигенная структура. Сальмонеллы содержат два антигенных комплекса: 1) О-антиген - липополисахариднопротеиновый комплекс термостабильный, инактивируется формалином; известно 67 антигенных факторов, обозначаемых арабскими цифрами, 2) Н-антиген - жгутиковый, белковой природы, термолабильный, инактивируется спиртом, фенолом, но устойчив к формалину. Некоторые сальмонеллы имеют Vi-антиген, локализованный в микрокапсуле (например у S. typhi). Сальмонеллы, имеющие общую фракцию О-антигена, объединены в одну группу. Таких групп в настоящее время известно 50, они обозначаются прописными буквами латинского алфавита: А, В, С, Д, Е… Н-антигены имеют две фазы: 1) первая - специфическая (обозначаемая строчными буквами латинского алфавита), по которой различаются серовары внутри одной О-группы; 2) вторая - неспецифическая, обозначаемая арабскими цифрами, реже - латинскими буквами. Сочетание различных О- и Н-антигенов определяет антигенную структуру культур и название серовара. В 1992 году зарегистрировано 2324 серовара сальмонелл и ежегодно описывается 40-80 новых. Установление антигенной структуры возбудителя необходимо для его идентификации и постановки диагноза заболевания.

Резистентность. Сальмонеллы относительно устойчивы во внешней среде: месяцами сохраняются при низкой температуре в воде и льду; в копченом и соленом мясе до 2 месяцев; в пищевых продуктах (мясных, молочных) способны размножаться, не изменяя их органолептических свойств; длительно сохраняются в пыли, устойчивы к высыханию (наиболее устойчива S.typhimurium: остается жизнеспособной на тканях и бумаге до года). Однако чувствительны к высоким температурам (погибают при кипячении), дезинфицирующим веществам (2-5% раствору фенола, 3-10% раствору хлорамина).

Источником возбудителей сальмонеллезов являются различные животные (крупный рогатый скот, овцы, свиньи, лошади, собаки, кошки, грызуны, домашние птицы), реже люди, больные и здоровые бактерионосители. Основной источник заражения (до 50%) - домашняя птица (особенно куры и водоплавающие птицы) и яйца.. Механизм передачи инфекции - фекально-оральный. Пути передачи - пищевой, водный, контактно-бытовой. при сальмонеллезах - пищевой (факторы передачи инфекции - недостаточно термически обработанные инфицированное мясо и яйца; кондитерские изделия с использованием сырых яиц, реже - рыба, овощи, фрукты инфицированные в процессе кулинарной обработки на загрязненных столах. Внутрибольничная сальмонеллезная инфекция передается также воздушнопылевым путем. Брюшным тифом и паратифами болеют люди 15-30лет, сальмонеллезами - чаще дети первых лет жизни,особенно до года.

Патогенез, клиника сальмонеллезов. Сальмонеллы попадают в организм через рот и, пройдя через желудок, очень быстро внедряются в ткани 12-перстной и тонкой кишки, где происходит их размножение. В стенке кишки они подвергаются фагоцитозу макрофагами, в которых сальмонеллы также размножаются, а фагоциты гибнут, освобождая медиаторы воспаления (гистамин, серотонин, кинины и др.) Процесс накопления сальмонелл в организме сопровождается их гибелью, распадом и значительным выбросом токсинов, что означает конец инкубационного периода и начало заболевания. Токсины сальмонелл (эндотоксин, энтеротоксин, цитотоксин) оказывают прямое повреждающее действие на клетки слизистой оболочки, нарушают проницаемость клеточных мембран и обуславливают диарею, обезвоживание, интоксикацию организма. Повышенная проницаемость клеточных мембран способствует распространению сальмонелл по лимфатическим путям и проникновению их в мезентериальные лимфоузлы. Если ифекционный процесс дальше не распространяется, он приобретает локализованную форму. При глубоких нарушениях барьерной функции лимфатического аппарата кишечника происходит генерализация процесса, возникает длительная бактериемия, что клинически соответствует генерализованным формам сальмонеллеза.

Инкубационный период 12-24 часа (6 часов -2 суток). Различают следующие формы сальмонеллезной инфекции: I. Гастроинтестинальная (желудочно-кишечная) встречается наиболее часто. Протекает в виде: а) гастрита, б) гастроэнтерита в) гастроэнтероколита. а) Гастрит встречается редко. Признаки: боли в эпигастральной области, тошнота, рвота, поноса не бывает. б) Гастроэнтерит встречается часто. Признаки: острое начало, тошнота, обильная неукротимая рвота, стул жидкий, обильный. в) Гастроэнтероколит часто напоминает острую дизентерию, температура повышается, стул частый, жидкий со слизью, иногда кровью; могут быть тенезмы, ложные позывы. Нередко поражается нервная система, наблюдается головная боль, головокружение, обморочное состояние, в тяжелых случаях - токсический энцефалит (воспаление головного мозга). Поражается сердечно-сосудистая система - падает артериальное давление, вплоть до коллапса (резкое падение сосудистого тонуса). Может быть острая почечная недостаточность.

II. Генерализованные формы: а) Тифоподобные варианты сальмонеллеза. Напоминают брюшной тиф и особенно паратифы - с гастроэнтеритом, поражениями ЦНС и сыпью. б) Септикопиемические варианты. Признаки: потрясающий озноб и профузный пот. Клиническая картина зависит от локализации метастатических гнойных очагов, которые могут возникать во всех органах. Характеризуется длительным тяжелым течением. Возможен летальный исход.

III. Субклиническая форма (бактерионосительство) характеризуется отсутствием симптомов при выделении сальмонелл из испражнений, мочи, желчи. Иммунитет при брюшном тифе и паратифах прочный, пожизненный. Рецидивы и формирование бактерионосительства связаны с индивидуальным несовершенством иммунной системы. При сальмонеллезах иммунитет нестойкий непродолжительный. Лабораторная диагностика сальмонеллезов. Основным методом лабораторной диагностики является бактериологический. Исследуют рвотные массы, промывные воды желудка, дуоденальное содержимое, (желчь) кровь, мочу, фекалии, гной или экссудат из воспалительных очагов, пищевые продукты. Засевают на среды обогащения (селенитовый или 20% желчный бульон), а затем на висмут-сульфит агар (высокоселективная среда), Плоскирева (среднеселективная) Эндо, Левина. Схема микробиологических исследований аналогична таковым при выделении и идентификации гемо-и копрокультуры при брюшном тифе. Из серологических методов применяют реакцию агглютинации с О- и Ндиагностикумами, иногда с аутоштаммами бактерий, выделенными от больных; более чувствительна РНГА с эритроцитарными диагностикумами. Возможно использование биологического метода путем вскармливания белых мышей зараженными пищевыми продуктами. S. enteritidis и S. typhimurium вызывают гибель мышей через 1-2 суток. Посевы крови из сердца и материала из внутренних органов дает рост сальмонелл. Для экспресс-диагностики применяют иммунофлюоресцентный метод исследования (обнаружение антигенов возбудителя с помощью иммунных сывороток, обработанных флюорохромами).

Специфическая профилактика при сальмонеллезах не разработана. Основными профилактическими мероприятиями являются ветеринарно-санитарный надзор на бойнях и пищевых предприятиях, выявление и санирование бактерионосителей.

6. Пищевые интоксикации: определение понятия, возбудители, клинические проявления, особенности лабораторной диагностики, лечения, профилактики.

Пищевая интоксикация (токсикоз) - это острое кишечное заболевание, вызываемое употреблением в пищу продуктов, в которых накопились бактериальные токсины (экзотоксины), самого возбудителя может не быть.

Ботулизм - пищевая токсикоинфекция (отравление) - тяжелое заболевание, при котором поражается ЦНС. Название болезни произошло от латинского слова botulus - колбаса или колбасное отравление. Характеристика возбудителя. Возбудитель ботулизма — С1. botulinum относится к отделу Firmicutes, роду Clostridium.

Морфология: крупные палочки с закругленными краями, перитрихи (имеют жгутики расположенные по всей поверхности клетки), капсулы нет. Образуют споры, расположенные субтерминально, поэтому клетка имеет вид теннисной ракетки.

Тинкториальные свойства: грам «+». Культуральные свойства: строгий анаэроб, на кровяном агаре образует прозрачные колонии, окруженные зоной гемолиза, в глубине агара образуют колонии, напоминающие пушинки или комочки ваты. В среде Китта-Тароцци дает помутнение и газообразование. Культура издает запах прогорклого масла. Биохимические свойства выражены хорошо, обладает сахаролитическими и протеолитическими свойствами.

Антигенная структура: имеет общие О- и Н-антигены. неоднородна антигенная структура экзотоксина, по которой выделяют 7 сероваров: А, В, С, D, Е, F, С, из которых наиболее опасны для человека А, В, Е.

Факторы патогенности: выделяет экзотоксин (ботулинический яд), самый сильный из всех биологических ядов. Смертельная доза для человека 0,3 мкг. Экзотоксин имеет 2 компонента: нейротоксин и гемагглютинин. Экзотоксины всех сероваров обладают одинаковым патогенетическим действием на организм. Экзотоксин выделяется при размножении клостридий в пищевых продуктах, на питательных средах, в организме человека и животных.

Резистентность: значительной устойчивостью во внешней среде обладает экзотоксин и споры. Споры выдерживают кипячение 3-5 часов. Экзотоксин разрушается лишь через 10-15 мин. после кипячения, этот яд устойчив к действию соляной кислоты и ферментов желудочного сока.

Эпидемиология ботулизма. Возбудитель ботулизма широко распространен в природе. Его обнаруживают в организме животных, рыб, ракообразных, откуда он попадает в почву и воду, где долго сохраняется в виде спор. Попадая в анаэробные условия, споры прорастают - в пищевых продуктах, в консервах - образуются вегетативные формы, которые размножаются в анаэробных условиях и образуют экзотоксин. Путь передачи инфекции - пищевой. Чаще всего фактором передачи инфекции являются консервы (грибные, овощные, рыбные, мясные).

Патогенез и клиника. Входные ворота — пищеварительный тракт (употребление продуктов, содержащих экзотоксин или возбудителя). Основную роль в развитии заболевания играет ботулинический экзотоксин. Попав в желудочно - кишечный тракт, токсин всасывается через стенку кишечника в кровь и обусловливает длительную токсинемию. Токсин поражает ядра продолговатого мозга и блокирует передачу импульсов через нервно - мышечные синапсы. В результате происходит паралич мышц гортани, глотки, дыхательных мышц, что приводит к нарушению глотания и дыхания, наблюдаются изменения со стороны органов зрения. Клиническая картина. Инкубационный период 6-24 ч до 2-6 дней. Заболевание начинается остро, но температуры не повышается. В одном случае наблюдается сухость во рту, тошнота, рвота, понос. В другом случае больной жалуется на туман перед глазами и двоение. В дальнейшем в результате паралича мышц гортани появляется осиплый голос, а затем голос пропадает. Больные могут погибнуть от остановки дыхания или от остановки сердца. Заболевание может осложниться острой пневмонией, токсическим миокардитом, сепсисом. Летальность при ботулизме 15-30%. Без лечения смертность бывает в 85% случаев.

Иммунитет не формируется. Лабораторная диагностика. Исследуемый материал: промывные воды желудка, рвотные массы, остатки пищи, испражнения, кровь.

Методы диагностики: 1) бактериологический метод (направлен на обнаружение возбудителя) - выделение чистой культуры по общей схеме выделения культур анаэробных бактерий; 2) биологический метод заражение белых мышей, которым подкожно или внутрибрюшинно вводят экстракт исследуемого материала, заболевание и гибель - через 1-4дня; 3) серологический метод — обнаружение в пищевых продуктах экзотоксина и установление его серовара при помощи реакции нейтрализации: фильтрат исследуемого материала смешивают с антитоксическими противоботулиническими сыворотками А, В, С, Е и т.д. и заражают белых мышей; если в материале имеется экзотоксин, выживает та мышь, которой введен токсин, нейтрализованный антитоксической сывороткой соответствующего серовара.

Лечение. Больные с подозрением на ботулизм обязательно госпитализируются в инфекционный стационар. Всем больным проводят промывание желудка. Для специфического лечения (для нейтрализации экзотоксина) применяют лечебные мововалентные противоботулинические сыворотки, что наиболее эффективно в 1-3 сутки болезни. Если еще не установлен серовар экзотоксина, вводят сыворотки поливалентные противоботулинические сыворотки 3-х типов (А, В, Е). При тяжелых формах первые дозы сыворотки вводят внутривенно, а также применяют гомологичные иммуноглобулины.

Профилактика. Специфической профилактика: ограниченно применяют тетра-, пента- и секстанатоксины, в состав которых входят ботулинические анатоксины типов А, В, Е. Экстренная профилактика осуществляется с помощью противоботулинической сыворотки. Неспецифическая профилактика: соблюдение определенных правил приготовления продуктов и домашних консервов.

Стафилококки относятся к отделу Firmicutes, сем. Micrococcaceae, роду Staphylococcus.