Правила забора материалов для исследования от больных и бактерионосителей.

При взятии материала для лабораторного исследования от больных или бактерионосителей необходимо соблюдать определенные правила:

1) материал следует брать до применения антибиотиков или других химиотерапевтических препаратов;

2) забор материала производить с учётом стадии заболевания, патогенеза инфекционного процесса и наиболее вероятной локализации возбудителя;

3) материал нужно брать в достаточном количестве, соблюдая правила асептики, чтобы предупредить возможность загрязнения его микроорганизмами окружающей среды и нормальной микрофлоры организма человека;

4) исследуемый материал нужно доставить в лабораторию в возможно короткие сроки в стерильной посуде или в специальных контейнерах при соблюдении первоначальной температуры или в замороженном виде (в зависимости от свойств предполагаемого возбудителя);

5) любой материал, направляемый в лабораторию, должен сопровождаться направлением, в котором лечащий врач указывает фамилию, имя, отчество больного, вид материала, дату его взятия, предварительный клинический диагноз.

Испражнения собирают в стерильные картонные тарелки; используют также судна, обработанные дезинфицирующим раствором и тщательно промытые горячей водой. Мочу берут стерильным катетером. Рвотные массы собирают в стерильные банки, мокроту в стерильные банки с пробкой или в чашки Петри. Гнойное отделяемое ран берут стерильным ватным тампоном или исследуют тампоны, извлеченные из ран при перевязках. Соскобы со слизистых оболочек зева и носа - стерильным ватным тампоном на проволоке.

Специальные приемы используются при коклюше (метод кашлевых пластинок), при исследовании на менингококковое носительство (носоглоточный тампон).

Кровь для посева берут с соблюдением правил асептики, предварительно протерев кожу 70% спиртом, стерильным шприцем из локтевой вены в количестве 5-10 мл и сразу же засевают во флакон с жидкой питательной средой, количество которой должно быть в 10 раз

Правила транспортировки материалов в лабораторию.

• Транспортировку материала в лаборато­рию следует проводить в максимально корот­кие сроки, чтобы исключить гибель неустой­чивых видов микробов, или помещать его в специальные транспортные среды;

• к материалу прилагают сопроводитель­ный документ, содержащий основные сведе­ния, необходимые для проведения микробио­логического исследования (Ф.И.О. больного, номер истории болезни, клинический диа­гноз и т. д.).

• в процессе транспортировки материал следует оберегать от действия света, тепла, холода, механических повреждений, чтобы исключить гибель микробов и контаминацию материала посторонней микрофлорой. Лучше всего доставлять материал в специальных ме­таллических изотермических контейнерах, которые легко очищать и обеззараживать. Нельзя отправлять материал в лабораторию с больными или со случайными людьми.

Классификация семейства энтеробактерий.

• p. Escherichia, в. E. coli

• p. Salmonella, в. S. typhi, S. paratyphi A, S. paratyphi B, S. enteritidis, S. typhimurium, S. anatum, S. infantis, S. Haifa, S.panama

• p. Shigella, в. S. dysenteriae, S. sonnei, S. flexneri, S. boydii

• p. Klebsiella, в. K. pneumoniae, K. rhinoscuromatis, K. ozaenae

• p. Proteus, в. P. vulgaris, P. mirabilis

• p. Yersinea, Y. pestis, Y. enterocolitica, Y. psevdotuberculosis

Условно-патогенные токсико-пищевые инфекции:

• p. Citrobacter

• p. Enterobacter

• p. Hafnia

Общая характеристика бактерий кишечной группы. Эволюционные связи бактерий кишечной группы.

• Единство морфологии – короткие палочки, не обра-зующие спор, способные образовывать капсулы и жгутики.

• Грамотрицательные микроорганизмы.

• Факультативные анаэробы.

• Растут на простых питательных средах.

• Ферментируют углеводы с образованием кислоты или кислоты и газа.

• Алиментарный (реже воздушно-капельный) путь передачи.

Семейство Enterobacteriaceae является самым многочисленным семейством патогенных и условно-патогенных бактерий. Объединяет более 20 родов. Центральное положение занимает род Escherichia (50—52 % ГЦ-пар), который являет¬ся типовым родом семейства. Близкородственное к нему положение занимают роды Shigella (50—52 % ГЦ-пар) и Salmonella (50-53 % ГЦ-пар).

Морфология и физиология. Семейство энте­робактерий представлено грамотрицательными палочками, размером 1-н5х0,4н-0,8 мкм. Могут быть подвижными за счет перитрихиальных жгутиков. Некоторые образуют капсулу. Спор не образуют. Растут на простых питательных средах, большинство хорошо культивируется при 37 °С, некоторые (род Yersinia) наибольшей метаболической активностью обладают при 25-30 °С. Факультативные анаэробы. Обладают дыхательным и бродильным метаболизмами. Оксидазаотрицательны. Каталазаположительны.

Способны восстанавливать нитраты за счет наличия нитратредукгазы.

Энтеробактериям присущи два типа ферментации глюкозы муравьино-кислым брожением. При смешанном типе, выявляемом реакцией с метил красным, образуется большое количество кислот, в некоторых случаях — газ. При бутандиоловом типе основными продуктами являются 2,3-бутандиол и этанол, выявляемые реакцией Фогеса—Проскауэра.

Энтеробактерии обладают широким спектром биохимической активности, который служит основой подразделения внутри семейства на роды, а внутри некоторых родов — на виды. Ключевыми тестами при идентификации энтеробактерий являются тесты на определение продуктов ферментации глюкозы (газообразование, реакции с метил красным и Фогеса—Проскауэра), способности продуцировать сероводород, индол, утилизировать цитрат на агареСиммонса, расщеплять мочевину, продуцировать фер-\менты, превращающие аминокислоты: декарбоксилазы лизина и орнитина, дезаминазуфенилаланина; а также способность исполь-\зовать различные моно-, олиго- и полисаха-риды и спирты в качестве энергетического материала. Биохимическая характеристика некоторых представителей семейства Enterеbacteriaceae представлена в табл. 16.9.

Распространение в природе. Патогенность.Энтеробактерииразнообразны по экологин и кругу хозяев. Они распространены повсеместно: в почве, воде, в составе микрофлора различных животных, человека. Могут вызывать заболевания у человека, животных, птиц:. насекомых, растений.

Представители родов Escherichia, ShigelkSalmonella вызывают у человека ОКИ, энтеро- патогенные иерсинии, Y. pseudotuberculosis к Y. enterocolitica — псевдотубкулез и кишечный иерсиниоз соответственно, a Y. pestis — чу¬му. Представители родов Klebsiella, Proteus. Providencia, Serratia являются возбудителямн внутрибольничных (нозокамиальных) инфек-ций, а некоторые из них вызывают пищевые токсикоинфекции, заболевания органов рес-пираторного и мочевыделительного трактов.

Факторы патогенности разнообразны и в различных комбинациях присутствуют в определенных видах. Все энтеробактерии содержат эндотоксин, который освобождается после разрушения микробных клеток. Некоторые представители семейства продуцируют белковые токсины, обладающие цитотоксичесюэ* и энтеротоксическим эффектами, могут вылелять гемолизины. Антифагоцитарная активность обеспечивается факторами, присущими определенным видам. К ним относятся капсула, ферменты супероксидцисмутаза и аденилатциклаза, поверхностные белки и специфи­ческие антигены. Начальные этапы инфекции опосредуются структурами, обеспечивающими взаимодействие с поверхностным эпителием. К ним относятся поверхностные структуры 5-го типа: фимбрии 3-го типа, фибриллярные эелки, белки наружной мембраны, 0-антиген. Установлено 4 типа механизмов взаимодейс-тзия возбудителей ОКИ с поверхностным эпи­телием кишечника (табл. 16.10).

Антигенная структура энтеробактерий пред­ставлена соматическим О-антигеном. Могут также встречаться жгутиковый Н-антиген и поверхностный (капсульный) К-антиген. Антигенной активностью обладают также эимбрии 3-го типа. Представители некоторых эолов, в частности рода Yersinia, имеют допол­нительные видоспецифические антигены.

Основу микробиологической диагностики инфекционных процессов, вызванных пред­ставителями семейства Enterobacteriaceae, со­ставляет бактериологический метод исследо­вания. Используются также серологический метод и ПЦР.

Родоначальником всех патогенных представителей этой группы является кишечная палочка, приспособившаяся в процессе эволюции к существованию в кишечнике животных и человека и обладающая наибольшей из всех видов этой группы микробов биохимической активностью. Е. coli, обладающая большой склонностью к изменчивости в зависимости от условий ее существования в организме животных и человека, постепенно теряла свою биохимическую активность и приобрела патогенные свойства. Так возникли новые виды, приспособленные к паразитическому существованию только в человеческом организме (S. typhosa, Sh. dysenteriae). При этом родоначальником тифозной группы бактерий были подвижные формы кишечной палочки, а дизентерийной группы — неподвижные формы.Доказательством единого происхождения кишечных бактерий является общность морфологических, тинкториальных и культуральных свойств. Все они хорошо растут на простых питательных средах, в присутствии и в отсутствие кислорода.