8. Вирусологический метод исследования
1 Этап – заражение чувствительной модели
Подготовка пробы: Проводится в ранние сроки заболевания при соблюдении правил, предотвращающих контаминацию материала посторонней микрофлорой и инфицирование медицинского персонала. Для предупреждения инактивации вирусов при транспортировке материала, он помещается в вирусную транспортировочную среду (ВТС), состоящую из сбалансированного солевого раствора, антибиотиков и сывороточного альбумина. Транспортируется материал в специальном контейнере с термоизоляцией и закрытыми пластиковыми пакетами, содержащими лед. При необходимости материал хранят при -20˚С. Каждый образец материала для исследования должен иметь маркировку и этикетку с указанием фамилии больного, типа материала, даты его забора, развернутый клинический диагноз и другие сведения. |
|
|
|
Методы индикации вирусов при различных способах культивирования |
||
1 - обнаружение у животных признаков инфекционного заболевания, 2 - регистрация их гибели, 3 - изучении характера патоморфологических и патогистологических изменений в тканях и органах |
1 - гибель эмбриона 2 - положительной РА на стекле с аллантоисной или амниотической жидкостью 3 – образования «бляшек» на хорион-аллантоисной оболочке |
1 - ЦПД, 2 - обнаружение внутриклеточных включений, 3 - положительная реакция гемадсорбции (РГАдс), 4 - феномен бляшкообразования, 5 - цветная реакция Солка 6 - РИФ |
|
|
|
3 ЭТАП ИДЕНТИФИКАЦИЯ
Изучаемые характеристики вирусов |
||
Антигенная структура вирусов (серогруппа, серотип)
|
||
А
Б
В
2
ЭТАП ИНДИКАЦИЯ
9. Зарисуйте в тетради и подпишите составные части куриного эмбриона на рис. 3.
Рис.3
10. Объясните механизм и условие использования реакции гемагглютинации (рга) для индикации вирусов.
РГА основана на том, что некоторые виды вирусов обладают способностью адсорбироваться на поверхности эритроцитов разных видов животных (и птиц), вызывая их склеивание и образование агглютината.
11. Виды культур клеток и их характеристика (источник, количество пассажей)
А. первичные (первично-трипсинизированные) – клетки почек обезьян, несколько пассажей;
Б. полуперевиваемые – клетки одного генотипа, 50-100 пассажей;
В. перевиваемые – HeLa получена из карциномы шейки матки, НЕр-2 ― из карциномы гортани; Детройт-6 ― из метастаза рака легкого в костный мозг; RН ― из опухоли почки человека
С какой целью при культивировании вирусов используются питательные среды? Как они называются?
Для обеспечения жизнедеятельности культивируемых клеток необходимы питательные среды. По назначению они делятся на ростовые и поддерживающие.
В ростовых питательных средах должно содержаться больше питательных веществ (альбумин), обеспечивающих активное размножение клеток и формирование монослоя.
Поддерживающие среды обеспечивают переживание клеток в уже сформированном монослое в период размножения в них вирусов (среда 199, Эрла, Хэнкса и др.).