Биобезопасность / кр 2 4
.docxОтнесение патогенов к группам опасности согласно ВОЗ
1. Патогенность МО
2. Способ передачи и спектр хозяев в регионе; уровень иммунизации населения; плотность населения, интенсивность передвижения; наличие стандартов гигиены
3. Доступность защитных мер (иммунизация, вакцинация, контроль переносчиков)
4. Доступность эффективного лечения
Классификация микроорганизмов по группам риска
Группа риска 1 микроорганизмы, которые потенциально не являются возбудителями болезней
Группа риска 2 Патогенный микроорганизм, который может вызвать заболевание человека или животных, но не представляет серьезного риска
Группа риска 3 Патогенный агент, который обычно вызывает заболевание человека или животных, существует возможность проведения лечебно-профилактических мероприятий. Не распространяется от больного к здоровому.
Группа риска 4 Патогенный агент, который вызывает серьезные заболевания у человека или животных. Передается от больного к здоровому прямо или опосредованно. В большинстве случаев отсутствуют эффективные лечебно-профилактические мероприятия.
Объекты, на которых используются биологические агенты
микробиологические лаборатории, музейные коллекции, научные центры, производства, образовательные учреждения
Принципы выбора мер для обеспечения безопасности работы с различными штаммами микроорганизмов:
1. Классификация микроорганизмов по группам риска на основании таксономического определения
2.Формулирование рекомендованных для каждой из этих групп риска мер физической защиты
В промышленности могут использоваться штаммы микроорганизмов, отнесенные к низшим 1-ому или 2-ому уровням биобезопасности, а также штаммы, отнесенные к категории GRAS (generally recognized as safety).
Уровень BSL-1 требует базового уровня защиты и пригоден для штаммов микроорганизмов, которые, по имеющейся информации, не вызывают заболеваний у обычных, здоровых людей.
BSL-2 пригоден для работы со штаммами, контакт с которыми связан с невысоким риском излечимых заболеваний незначительной тяжести.
В России основой нормативной базы для работы с патогенными микроорганизмами являются периодически обновляемые Санитарные правила работы с возбудителями заболеваний IV- I групп патогенности.
Порядок учета, хранения, передачи и транспортировки микроорганизмов I-IV групп патогенности
Для работы с непатогенными штаммами оценка микроорганизмов по уровню допустимой концентрации клеток в рабочей зоне
Различные санитарные и ветеринарные правила
Перечень вредных производственных факторов
В СП РФ отсутствуют:
Положения о комиссии по контролю за соблюдением требований ББ в учреждении
Используемые средства и методы дезинфекции
Режимы обеззараживания различных объектов
Требования к исследованию сточных вод на патогенную микрофлору
Универсальные защитные приёмы
- Ничего не помещать в рот
- Не допускать образование аэрозолей
- Защищать от поражения кожу и сводить к минимуму риск образования колотых ран
- Предотвращать образование брызг и капель
- Не переносить, не передавать, не трогать какой-либо инфицированный материал незащищенными руками
Рабочие зоны лаборатории
1. Порядок и чистота
2. Рабочие поверхности дезинфицировать
3. Все материалы должны быть деконтаминированы перед удалением из лаборатории
4. Упаковка и транспортировка согласно нормам и правилам.
5. Открывающиеся окна снабжены сетками.
Медицинский контроль и наблюдение за здоровьем
Проведение иммунизации
Обеспечение ранней диагностики лабораторной инфекции
Отстранение от лабораторной работы повышенной опасности высокочувствительных лиц
Обеспечение персонала средствами и мерами защиты. Категории отходов 1. Неконтаминированные отходы, 2. Контаминированные «колющие предметы» 3. Контаминированные материалы, предназначенные для деконтаминации и повторного использования 4. Контаминированные материалы, предназначенные для автоклавирования и удаления 5. Контаминированные материалы, подлежащие сжиганию. Изолированная лаборатория 3-го уровня
Применим кодекс практики с изменениями:
международные знаки и символы, предупреждающие о биологической опасности
Специальная одежда для работы в лабораториях
Открытая манипуляция проводиться в боксах или первичных изоляционных.
Для работы с инфицированными животными защитные респираторные приспособления
лаборатория уровень биологической безопасности 4
Лаборатория с использованием изолирующих средств индивидуальной защиты.
- раздевалки и зона деконтаминации
- отдельные душевые кабины с внутренней и внешней раздевалками.
вход в лабораторию производится через воздушный шлюз, снабженный воздухонепроницаемыми дверьми.
Отличия между вентиляционными системами
Лаборатория с использованием изолирующих средств индивидуальной защиты
- отдельная вентиляционная система; резервные вытяжные вентиляторы.
система контроля разности давлений в рабочей зоне лаборатории и между самой лабораторией и смежными зонами,
подвод воздуха через HEPA-фильтры, а также дезинфицирующие души, воздушные шлюзы и тамбуры.
отвод воздуха через двойные HEPA-фильтры.
HEPA-фильтры
это высокоэффективные фильтры, главная цель которых – удалять из воздуха мелкодисперсные частицы, в том числе PM2.5 и PM10.
От 10 нм до 2.5 мкм
Существует две основных модели НЕРА фильтров:
# НЕРА−фильтры (High Efficiency Particulate Air); современные модели обеспечивают очистку 99,99% для частиц размером 0,3 микрон
# ULPA−фильтры (Ultra Low Penetration Air); современные модели обеспечивают очистку 99,999% для частиц размером 0,12 микрон
Основа любого HEPA-фильтра – хаотично расположенные волокна разной толщины, примерно 0,5-5 мкм. Расстояние между волокнами – порядка 5-50 мкм. Диаметр мелкодисперсных частиц – в пределах нескольких микрон или даже нескольких долей микрона
Боксы биологической безопасности III класса
цельносварной каркас и абсолютно герметичную конструкцию
работа осуществляется с помощью герметичных перчаток, встроенных в переднюю панель бокса.
обязательно поддерживается пониженное давление
поступающий воздух проходит очистку ULРА фильтром
воздушный поток на выходе проходит очистку ULРА фильтром и прокаливается.
наличие шлюза, который позволяет переносить материалы в рабочую зону бокса.
Выходящий поток поступает непосредственно в лабораторию, однако возможно подключение бокса и к общекомнатной вытяжке.
Боксы этого класса пригодны для работы в лабораториях с уровнями биобезопасности 3 и 4.
Система тройной упаковки, которая применяется для транспортировки инфекционных и потенциально инфекционных материалов.
Эта система упаковки состоит из трех слоев:
- первичный контейнер – водонепроницаемый и герметичный, наличие адсорбирующего материала
- вторичная упаковка – водонепроницаемая и герметичная, наличие адсорбирующего материала
- внешняя упаковка.
Принципы надлежащей лабораторной практики (Good Laboratory Practice, GLP) – это международная система правил и требований к лабораториям, которые занимаются изучением воздействия новых химических веществ на окружающую среду и здоровье человека. Главная цель GLP - обеспечить получение надежных результатов путем реализации системы качества организационного процесса и условий, при которых планируются, проводятся и контролируются неклинические исследования безопасности продукта, документируются и архивируются данные и составляются отчеты
Одной из первых в России сертификат GLP получила лаборатория биологических испытаний
– требования к: – организации испытаний; – личному составу исследователей; – помещениям, в которых проводятся испытания и содержатся животные; – качеству животных, условиям их содержания и кормления; – лабораторному оборудованию и к его калибровке; – испытуемому и контрольному веществу; – составлению и проведению подробной стандартной методики экспериментальных работ и к порядку проведения испытаний; – регистрации данных и оформлению отчета; – службе контроля за качеством испытаний; – стандартные методики экспериментальных работ.
Виварий (vivarium, от лат. vivus — «живой») — здание или отдельное помещение при медикобиологическом учреждении (научноисследовательском институте, лаборатории), предназначенное для содержания лабораторных животных, которые используются в экспериментальной работе или в учебном процессе. Виварий - медико-биологическая клиника
Надлежащая лабораторная практика РФ Настоящий стандарт идентичен международному документу OECD, Guide 1:1998* "Принципы надлежащей лабораторной практики"
Одним из основных требований GLP, предъявляемым к экспериментальнобиологическим лабораториям (вивариям), является правильное содержание, использование и гуманное обращение с животными.
Помещения Общие положения ❏ Размеры, устройство и расположение помещений должны отвечать задачам исследования. Помещения должны быть устроены таким образом, чтобы влияние на ход исследований было минимальным. ❏ Помещения должны быть спланированы таким образом, чтобы было обеспечено максимально изолированное проведение каждого исследования различных видов (типов). ❏ при размещении вивария в лабораторном корпусе организации помещения вивария изолируют от помещений иного назначения, в том числе административных и бытовых помещений организации ❏ виварий оборудуют отдельным входом и автономными системами вентиляции ❏ при размещении вивария на верхних этажах здания организации оборудуют отдельный лифт или отдельную лестницу
Помещения для тест-систем ❏ В испытательном центре должно быть достаточное число помещений или зон, чтобы обеспечить изоляцию тест-систем и индивидуальных проектов, если известно, что они предусматривают использование веществ или организмов, относящихся к разряду биологически опасных. ❏ Для диагностирования, лечения и контроля заболеваний должны быть выделены подходящие помещения или зоны, чтобы обеспечить стабильность и сохранность тест-систем. ❏ В испытательном центре должны быть комнаты хранения или зоны для ресурсов и оборудования. Эти помещения должны быть изолированы от помещений или зон, содержащих тест-системы, в целях обеспечения им адекватной защиты от инвазии, загрязнения и/или заражения.
Помещения для обработки объектов испытаний и стандартных (контрольных) объектов ❏ Для предотвращения загрязнения в испытательном центре должны быть отдельные помещения или зоны для получения и хранения объектов испытаний и стандартных (контрольных) объектов и смешивания объектов испытаний с носителями. ❏ Хранилища для объектов испытаний должны быть изолированы от помещений или зон, содержащих тест-системы, и должны соответствовать требованиям по обеспечению идентичности, концентрации, чистоты и стабильности, а также безопасному хранению опасных веществ.
В составе «чистых» помещений предусматривают: – помещения приема, карантина и адаптации вновь поступающих животных; – помещения экспериментальных животных; – операционную с предоперационной для экспериментальных работ, требующих особых условий; – помещения хранения чистого инвентаря для ухода за животными (клеток, поилок, посуды для кормов, оборудования); – помещение манипуляционной для изучения обменных процессов, взятия проб для анализа; – помещения для хранения и приготовления кормов для животных; – диагностический кабинет; – помещение или оборудованная выделенная зона для испытуемых образцов (биологические материалы) и образцов сравнения.
В составе «грязных» помещений предусматривают: – помещения изоляторов, предназначенные для содержания подозрительных по инфекционным заболеваниям животных или больных животных; – помещение (или отделение) для мойки и дезинфекции оборудования и инвентаря; – холодильное помещение или холодильная камера для сбора и хранения трупов животных, отходов; – помещения для персонала вивария (душевая, туалет и гардеробная).
Оборудование, материалы и реагенты ➢ Оборудование, включая валидированные компьютеризированные системы, используемые для создания, хранения и поиска данных, а также для контроля параметров окружающей среды, по характеристикам и расположению должно соответствовать целям и задачам исследования. ➢ Должно быть предусмотрено периодическое техническое обслуживание оборудования, используемого в исследовании, включая регулярный периодический осмотр, уход, калибровку и поверку в соответствии со стандартными операционными процедурами. ➢ Оборудование и материалы, используемые в исследовании, не должны влиять на состояние тест-систем. ➢ Химические вещества и их смеси, реагенты и растворы должны иметь этикетки с указанием сведений о наименовании вещества, концентрации (в случае необходимости), даты окончания срока хранения и инструкцию по хранению.
Биологические тест-системы ● Для хранения, размещения, обработки и защиты биологических тест-систем должны быть созданы надлежащие условия, обеспечивающие достоверность получаемых результатов. ● Каждая новая поступающая тест-система животного и растительного происхождения должна быть изолирована для оценки состояния здоровья. При возникновении заболевания или смертности данную партию животных не используют в исследовании и, при необходимости, безболезненно подвергают эвтаназии. ● Данные об источниках тест-систем, датах их поступления и состоянии на момент поступления должны быть соответствующим образом зарегистрированы. ● Перед первоначальным введением объекта испытания или стандартного объекта биологические тест-системы должны пройти период акклиматизации, достаточный для адаптации к условиям проведения исследования. ● Вся информация, необходимая для надлежащей идентификации тест-системы, должна быть указана на входных дверях помещений или контейнерах. Отдельные тест-системы, которые в процессе исследования должны быть переведены из одного помещения в другое или из одного контейнера в другой, должны иметь соответствующую маркировку где это возможно. ● В течение использования, помещения или контейнеры для содержания тест-систем подлежат регулярной уборке и санитарной обработке. Материалы, контактирующие с тест-системой, не должны содержать загрязняющих веществ в количествах, способных повлиять на ход исследования. Подстилку для животных следует своевременно менять, как это требуется практикой работы с лабораторными животными. Все случаи использования пестицидов должны быть документированы.
Организация экспериментов на лабораторных животных Федерация европейских научных ассоциаций по лабораторным животным (FELASA) выделила четыре категории лиц, имеющих отношение к экспериментам на животных Категория A - лица, осуществляющие уход за животными Категория B - лица, проводящие эксперименты на животных Категория C - лица, ответственные за руководство экспериментами на животных Категория D - специалисты в области науки о лабораторных животных
Законодательное регулирование В первую очередь, деятельность вивариев и питомников регулируется федеральными законами, приказами и постановлениями правительства: 1. Федеральный закон №52-ФЗ от 30 марта 1999 г. «О санитарноэпидемиологическом благополучии населения», 2. Федеральный закон №89-ФЗ от 24 июня 1998 г. «Об отходах производства и потребления», 3. Федеральный закон №61-ФЗ от 12 апреля 2010 г. «Об обращении лекарственных средств», 4. Федеральный закон №7-ФЗ от 10 января 2002 г. «Об охране окружающей среды», 5. Федеральный закон №4979-1 от 14 мая 1993 г. «О ветеринарии». Основная цель этих правовых норм скорее не защита животных, а обеспечение противоэпидемических мер и недопущение превращение вивариев в источник зоонозов.
Общие положения и область применения СП 1. Санитарно-эпидемиологические правила устанавливают санитарноэпидемиологические требования к устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев), обеспечивающие условия труда, необходимые для сохранения здоровья работающих. 2. Правила обязательны для исполнения юридическими лицами и индивидуальными предпринимателями, деятельность которых связана с проектированием, строительством, реконструкцией и эксплуатацией экспериментально-биологических клиник (вивариев). 3. Контроль за выполнением правил осуществляется в соответствии с законодательством РФ органами, уполномоченными на осуществление федерального государственного санитарно-эпидемиологического надзора.
Требования к размещению и устройству ● Виварии размещаются в отдельно стоящих вивариев зданиях или отдельных помещениях организации с соблюдением СП требований. ● Содержание вредных веществ в атмосферном воздухе и почве, уровни шума, вибрации, инфразвука, ионизирующего излучения не должны превышать гигиенические нормативы, установленные для территории жилой застройки. ● Помещения вивария в лабораторном корпусе изолируются от помещений иного назначения. ● Виварий оборудуется отдельным входом и автономными системами вентиляции. ● При размещении вивария на верхних этажах здания организации оборудуется отдельный лифт или отдельная лестница. ● Помещения для земноводных животных и рыб, используемых в экспериментах, рекомендуется размещать в цокольных или подвальных помещениях, оборудованных вентиляцией.
Прием животных в виварий ● Прием животных в виварии производится из специализированных питомников при наличии ветеринарных свидетельств на каждую партию животных об отсутствии заболеваний, опасных для человека и животных. ● Вновь поступившие животные должны быть осмотрены ветеринарным врачом и изолированы в помещения для карантина. ● Помещения, предназначенные для содержания животных, должны иметь соответствующую маркировку. ● Доступ в помещения для содержания животных ограничивается определенным кругом лиц, закрепленных за данными помещениями.
Уборка и дезинфекция ● Мойка и дезинфекция инвентаря производится работниками вивария в специальном помещении (отделении) с применением моющих и дезинфицирующих средств. ● Методы и способы дезинфекции, дезинсекции и режим автоклавирования оборудования, инвентаря, помещений устанавливаются ветеринарным врачом с учетом специфики проводимых экспериментов. ● Уборка всех помещений вивария производится ежедневно. ● За каждым помещением с животными закрепляется уборочный инвентарь, который должен быть промаркирован. ● Помещения, в которых обнаружены животные с подозрением на инфекционные заболевания или больные животные, подвергаются заключительной дезинфекции в соответствии с указаниями ветеринарного врача
В случае возникновения массовых или инфекционных заболеваний, опасных для животных и человека, проводится необходимый комплекс противоэпидемических мероприятий по требованию ветеринарной службы. Решение о лечении или уничтожении больных животных в каждом конкретном случае принимается ветеринарным врачом. ● Трупы животных до их патологоанатомических исследований хранят не более суток. Трупы животных, являющиеся отходами, накапливаются и хранятся в специальной холодильной камере до вывоза на уничтожение в течение недели. ● Хранение трупов животных в клетках и на полу в помещениях для содержания животных не допускается.
● Работники вивария должны проходить предварительные (при поступлении на работу) и периодические медицинские осмотры в установленном порядке. ● Работники вивария должны прививаться в соответствии с календарем профилактических прививок по эпидемическим показаниям. ● При работе с микроорганизмами различных групп патогенности создаются условия, соответствующие требованиям при работе с возбудителями 1, 2, 3 и 4 групп патогенности. ● При работе с источниками ионизирующего излучения создаются условия, обеспечивающие требования радиационной безопасности, установленные санитарными правилами и нормативами
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ПО СОДЕРЖАНИЮ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ В ВИВАРИЯХ НАУЧНОИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИХ ИНСТИТУТОВ И УЧЕБНЫХ ЗАВЕДЕНИЙ ● Расстояние между отдельно стоящим зданием вивария и сооружениями научно-исследовательских учреждений должно быть не менее расстояния противопожарных разрывов, установленных действующими правилами пожарной безопасности в РФ. ● Отдельно стоящие здания вивариев должны быть огорожены глухим забором. Территория должна быть озеленена.
Основные правила содержания животных ● Лабораторные животные и птицы содержатся в клетках со сплошным дном на подстилке или в клетках с сетчатым дном - полом. ● Передача животных на опыты производится по разовым требованиям согласно годовой заявке от лабораторий, утвержденной руководителем учреждения. ● Работа с животными разрешается только в часы, предусмотренные распорядком дня вивария. ● Каждый случай падежа или вынужденного убоя животных должен быть зафиксирован. ● Рекомендуется содержать животных только одного вида в помещении. ● На каждой клетке должна быть этикетка с указанием данных о животном и сроках эксперимента
Обращение с животными в ходе экспериментов: ● Действия, которые могут причинить лабораторным животным боль , должны производиться с использованием наркотизирующих средств. Если по условиям эксперимента противопоказано применение анестезии, то действия необходимо проводить в максимально короткий срок. ● Сотрудник, проводящий эксперимент, должен соблюдать правила гуманного обращения с лабораторными животными. ● В случаях, когда предполагается хирургическое вмешательство или проведение эксперимента с болевым раздражением, анестезия должна проводиться до привязывания животного к станку. ● Если острый опыт должен закончиться гибелью животного, то экспериментатор обязан умертвить животное до окончания действия анестезирующего вещества. ● После окончания хирургического вмешательства животное должно быть перенесено в послеоперационное помещение на специальных носилках, исключающих возможность смещения тканей, расхождения швов и т.д. ● Экспериментатор должен предусмотреть возможность появления болевых ощущений у животного в послеоперационном периоде и назначить обезболивающие препараты.
Личная гигиена сотрудников ● Персонал вивария должен быть обеспечен спецодеждой, спецобувью, мылом и полотенцами в соответствии с действующими нормативами. ● Персонал вивария обязан: перед началом работы снять верхнюю одежду, обувь, надеть спецодежду, спецобувь; по окончании работы пройти обработку в санитарном блоке ; вешать домашнюю одежду и спецодежду только в разных отделениях индивидуального шкафа; периодически дезинфицировать свои индивидуальные шкафы; по окончании каждого этапа работы и перед приемом пищи мыть и дезинфицировать руки.
Система вентиляции в комнатах для содержания и ограждениях для животных должна соответствовать потребностям животных. Цель системы вентиляции - обеспечение достаточного объема свежего воздуха надлежащего качества и снижение концентрации запахов, токсичных газов, пыли и инфекционных агентов любого вида. Также система вентиляции должна обеспечивать удаление избыточного тепла и влажности.
Главной задачей применения принципов надлежащей лабораторной практики является обеспечение возможности полного прослеживания и восстановления всего хода исследования
Цель- получение данных о свойствах испытуемых объектов и об их безопасности
Контроль качества призваны осуществлять органы, инспектирующие лаборатории
Применяются при проведении неклинических испытаний
Администрация испытат.цент. гарантирует выполнение правил
Руководитель отвечает за отчет
Отв. Иссл. Ответственный за проведение в соотв с ГЛП
Персонал выполняет инструкции
Помещения организуются чтобы оказывать минимальное влияние на ход исследований
Спланированы так, чтобы разные исследования были изолированы
Реагенты должны иметь этикетки
Ведение рег.записей; обработка отбор проб и хранения для сохранения стабильности и предотв. Загрязнения
Организационная структура: орган мониторинга, регулирования, органа исполнительной влпсти, межведомственной комиссии