Основы биотехнологии и биомедицины
Трансгенные животные
Лекция
4
Трансгенез: введение генов в эукариотический организм путем генетической трансфекции или переносом ядер соматических клеток (неполовым путем)
Горизонтальный перенос генов
Три способа получения трансгенных животных
1.Прямая инъекция ДНК в пронуклеусы оплодотворенных яйцеклеток
2.Использование рекомбинантных вирусов для заражения эмбриональных клеток зародыша
3.Использование эмбриональных стволовых клеток (ES)
Трансфекция
ДНК
Заражение
эмбриональных стволовых клеток рекомбинантными
ретровирусами
Стратегии
получения
трансгенны
хживотных
Воплодотворенную
яйцеклетку
Микроинъекции
ДНК
В ранний эмбрион (бластоцист)
Получение трансгенных мышей путем микроинъекции ДНК
Лишь 15%
выживших
потомков
содержат
Прямая инъекция ДНК в пронуклеус оплодотворенной яйцеклетки мыши
Оплодотворенная яйцеклетка фиксирована удерживающей пипеткой. Справа игла, содержащая ДНК
Инъекция раствора ДНК в пронуклеус
сопровождается увеличением его объема
Ретровирусные
векторы
HI
V
Строение ретровирусной частицы
Цикл размножения ретровирусов
Строение генома ретровируса и продуктов его экспрессии
Длина генома 7000- 10000 nt