- •Список литературы
- •2.0Бзор литературы
- •2.1. Общие представления по этологии пчел.
- •2.3. Некоторые аспекты микробиологического состояния пчелиной семьи.
- •Признаки болезни.
- •2.5. Микрофлора здоровой пчелиной семьи .
- •2.6. Почему болеют пчелы.
- •2.7. Хитозан и его значение
- •2.8. Источники и способы получения хитозана
- •2.9. Основные этапы получения хитозана
- •2.10. Основные источники хитозана Ракообразные
- •2.11. Пчела как потенциальный источник хитозана
- •3.Экспериментальная часть
- •3.1.Объекты и методы исследования.
- •3.1.1. Объекты исследования.
- •3.1.2. Методы исследования.
- •Отбор проб и смывов для микробиологического анализа.
- •Подготовка к анализу.
- •3.1.2.3. Идентификация микрофлоры.
- •3.1.2.3.2.Идентификация микроорганизмов.
- •3.1.2.4. Определение чувствительности микроорганизмов к бактерицидным веществам.
- •3.1.2.5.2. Методы получения хитозана. Щелочной гидролиз
- •1. Жесткий щелочной гидролиз
- •2. Мягкий щелочной гидролиз
- •3.1.2.8. Определение динамической вязкости
- •3.1.2.9. Кондуктометрическое определение степени деацетилирования хитозана
- •3.2. Результаты и обсуждение.
- •Изучение микрофлоры ульев здоровых пчелиных семей в зависимости от годичного цикла.
- •3.2.1. Изучение особенности годичного цикла жизни пчелиной семьи.
- •3.2.2. Происхождение и роль микрофлоры здоровой пчелиной семьи.
- •3.2.3.Микрофлора ульев здоровой пчелиной семьи.
- •3.2.4.Влияние гигиенических условий углекислого газа в гнезде на семьи пчел.
- •3.2.5. Защитные свойства внешних покровов пчел от микрофлоры.
- •3.2.6. Получение хитозана из подмора пчел.
- •3.2.6.1.Характеристика подмора пчел.
- •3.2.6.2 Депротеинирование
- •3.2.6.3. Деацетилирование
- •3.2.6.4. Ферментативный гидролиз хитозана
- •3.2.7.Технология переработки подмора пчел.
- •3.2.8.Технология введения пчелозана (хитозана) в зубные пасты.
- •3.2.9.Клинические испытания зубной пасты «Пчелка».
- •5. Список литературы.
2.8. Источники и способы получения хитозана
Хитин и хитозан обладают рядом уникальных свойств, обуславливающих возможность их широкого применения в различных отраслях промышленности. Развитие производства хитина и хитозана стимулируется не только ценностью их как уникальных биополимеров, но и наличием богатой сырьевой базы различных ракообразных, ростом их промысла, в том числе за счет аквакультуры, а также необходимостью переработки панцирьсодержащих отходов (ПСО) и предотвращения загрязнения окружающей среды. Россия располагает большими сырьевыми ресурсами ракообразных для производства хитозана: антарктический криль (вылов его резко сократился до нескольких тыс.т. в год); креветки и крабы (годовой вылов достигал 80тыс.т): гаммарус озер Западной Сибири (возможные объемы вылова - свыше ЮОтыс.т); тихоокеанский криль Охотского моря; талетриды Черного моря; углохвостая креветка Баренцева моря и др.(Быков В.П.,1995). В последнее время особенно важным фактором стала загрязненность панцирей тяжелыми металлами, ядохимикатами и другими ядовитыми отходами ряда производств. Кроме того, получение хитина из ракообразных может быть рентабельным только при условии одновременного получения всех полезных веществ, которые содержаться в панцире. Перспективными источниками хитинсодержащего сырья, в настоящее время, являются мицелиальные грибы (Fungi), Chidari
a(Нус1го1с1еа), водоросли (диатомовые) и насекомые (личинки мух, куколки шелкопряда и др.) (Феофилова Е.П.,1999).
Хитин в природных материалах всегда присутствует в сочетании с другими веществами, и выделение его в чистом виде основано на удалении сопутствующих ему веществ. В связи с этим при заготовке хитинсодержащего сырья необходимо стремиться к максимальному освобождению его от сопутствующих веществ: белков, липидов, минеральных элементов (Биденко М.С.,1985).
Хитин, являясь нерастворимым полимером, не поддается выделению из панциря напрямую. Для его получения необходимо последовательно отделить белковую и минеральную составляющие панциря, т.е. перевести их в растворимое состояние и удалить. Для получения хитина и его модификаций стандартного качества необходимо исчерпывающее удаление белковой и минеральной составляющих панциря.
В литературе описано достаточно много способов получения хитина, которые можно разделить на две группы:
а) получение хитина из различного сырья химической обработкой (кислотами, щелочами, комплексонами и др.)
б) получение хитина на основе применения ферментных препаратов (Немцев С.В.,1997).
2.9. Основные этапы получения хитозана
Деминерализация - процесс удаления минеральных веществ путем обработки сырья соляной кислотой. Оптимальные параметры процесса: концентрация НС1 - от 1,5 до 6% (в зависимости от вида сырья), соотношение сырья и раствора
HCl - от 1 :(5-6) до 1 :(6-8), продолжительность деминерализации - от 90 до 240 мин. (Сафронова Т.М.,1995).
- Депротеинирование - процесс удаления белковых веществ обработкой раствором гидроксида натрия. Оптимальные параметры процесса: концентрация NaOH - от 1 до 10%, соотношение сырья и раствора NaOH - от 1:3 до 1 :(7-8), продолжительность депротеинирования - от 90 до 180 мин.
Щелочные и кислотные гидролизаты после деминерализации и депротеинирования смешивают, доводят pH до полного осаждения белка и реализуют в виде белковой кормовой пасты, предварительно отделив влагу, или в виде гидролизатов в качестве кормовой добавки для сельскохозяйственных животных.
Деацетилирование - реакция отщепления от структурной единицы хитина - N-ацетил-Д-глюкозамина ацетильной группировки под действием концентрированных растворов гидроксида натрия. Реакция деацетилирования наряду, с отщеплением ацетильных групп сопровождается одновременным разрывом гликозидных связей полимера. Таким образом, хитозан представляет собой полидисперсный по молекулярной массе полимер Д-глюкозамина, содержащий некоторое количество ацетамидных групп (Немцев С.В.,1997). Оптимальные параметры процесса: концентрация NaOH - 45 - 50 %, продолжительность - от 90 до 120 мин.
