1. Качественные реакции на адреналин:

а. Реакция с FeCI₃

ХОД работы: в пробирку вносят 3 кап адреналина + 1 кап FeCI3-1%- появляется изумрудно-

зеленое окрашивание, которое при добавлении 1 кап. NaOH 10% приобретает вишнево-красный

цвет

б. Диазореакция

ХОД работы: в пробирку вносят 2-3 кап адреналина + 2 кап. раствора KIO3 + 2 кап СН₃СООН 10% перемешивают и слегка нагревают - жидкость окрашивается в красно-фиолетовый цвет.

2. Открытие 17-кетостероидов в моче

ХОД работы: в пробирку вносят 5 кап мочи +5 кап NaOH 30%+ 5 кап раствора метадинитробензола. Содержимое пробирки смешивают и оставляют стоять неск. мин- появляется красное окрашивание

3. Диазореакция на эстрон/фолликулин/

ХОД работы: получают диазореактив-для этого в пробирке смешивают 3 кап. 1% -

сульфаниловой кислоты + 3 кап. 5% NaNO₂. К диазореактиву + 3 кап. масляного раствора

фолликулина + 2 кап. 10% Na₂CO₃ Пробирку встряхивают и наблюдают желтое окрашивание.

Литература:

1. Алдашев А.А. и соавт., Биохимия человека, Бишкек, 2013 г стр. 88-111

2. Комов В.П., Шведова В.Н. Биохимия. – М.: Дрофа, 2008, стр. 132-170

3. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф., Биологическая химия. – М.: «Медицина»,

1990, стр. 177-191, 222-267, 2007,стр. 248-296

4. Николаев А.Я. 1989, стр.368-395, 2004, стр. 380-386, 404-41

5. Лекции

Занятие- 12 пед-2017 год.

Тема: Биологическое окисление

Теоретические вопросы:

1.Биологические виды энергии. Тканевое дыхание и биологическое окисление

2.Характеристика ферментов и коферментов биологического окисления,

их клеточная локализация:

а)строение и механизм действия коферментов НАД/НАДФ

ФМН, ФАД, их механизмы действия.

б)компоненты ЦПЭ/ цепи переноса электронов/, понятие об их строении и

механизм действия. Роль цитохромоксидаз.

3.Организация и функционирование дыхательной цепи и локализация трех пунктов

фосфорилирования. Укороченная дыхательная цепь

4. Окислительное фосфорилирования и синтез АТФ (по Митчеллу).

5. Конечные продукты тканевого дыхания, их роль.

6. Регуляция тканевого дыхания (дыхательный контроль, конц. АТФ, АМФ, тироксин)

^{Практическая работа:}

1.Количественное определение каталазы крови.

ХОД работы: свежую разведенную кровь /1:100/ взбалтывают, наливают по 1мл в две колбы приливают по 7мл дист. воды в опыт + 2мл -Н₂О₂1%, в контроль +5мл H₂SO₄.10% Колбы оставляют при комнатной температуре на 30 мин. Затем приливают в опытную + 5 мл 10 % Н₂SO_4, в контроль + 2 мл Н₂О₂.1% Содержимое каждой колбы титруют 0,1н KMnO₄ до розовой окраски.

Рассчитывают каталазное число (КЧ) по формуле:

КЧ=(А-В) х 1,7

где: А - количество KMnO₄, пошедшее на титрование контрольной пробы, в мл.

В – количество KMnO₄, пошедшее на титрование опытной пробы, в мл.

Полученную разность умножают на 1,7 и получают каталазное число для исследуемой крови. В норме каталазное число колеблется от 10 до 15 единиц.

Клинико-диагностическое значение:

Имеет значение для диагностики рака, анемии, туберкулеза. При этих заболеваниях содержание каталазы в крови снижается.

Литература:

1. Алдашев А.А. и соавт., Биохимия человека, Бишкек, 2013, стр. 130-140

2. Комов В.П., Шведова В.Н. Биохимия 2008, стр. 189-208

3. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф., Биологическая химия. – М.: «Медицина»,

1990,стр. 177-191, 222-267, 2007,стр. 298-316

4. Николаев А.Я.,1989, стр.199-223, 2004, стр.380-386, 404-41

5. Лекции

Занятие-13 пед -2017 год

Тема: Обмен углеводов. Переваривание и всасывание углеводов. Синтез и распад гликогена.

Теоретические вопросы:

1.Роль углеводов в жизнедеятельности человека, основные углеводы пищи,

источники глюкозы крови. Гипо - гипер и нормоглюкеземии.

2.Этапы переваривания углеводов в пищеварительном тракте. Механизм всасывания

моносахаридов, роль Na и АТФ.

3.Пути превращения глк-6-ф в клетке (схема). Реакция активирования глюкозы.

4.Механизм синтеза гликогена.

5.Схема гормональной регуляции распада гликогена, роль аденилатциклазы и ц - АМФ.

6.Гликолиз основной путь окисления глюкозы в тканях. Тканевая и внутриклеточная локализация ферментов гликолиза.

7. Реакции гликолиза. Ключевые реакции, их значение.

8.Конечные продукты. Биологическое значение анаэробного гликолиза. Субстратное фосфорилирование. Энергетический эффект процесса гликолиза.

^{Практическая работа:}

1.Выделение гликогена из печени.

Ход работы: Сухую печень опускают в стакан с кип. NaCI изотонический раствор, через

10-15 мин. Сливают верхний слой, к осадку +3мл ТХУ 5% и растирают в ступке в теч. 10 мин.

затем к экстракту + 3мл дист. воды, суспензию перемешивают и фильтруют через смоченный

бумажный фильтр в чистую пробирку.

С полученным фильтратом выполняют качественные реакции:

1. в пробирку с фильтратом + 1мл дист. воды + 1-2 кап. раствора Люголя и отмечают окраску

2. в две пробирку + по 10 кап. фильтрата: в первую + 10 кап. 10% ацетата свинца, во вторую + насыпают порошок сульфата аммония до полного насыщения и наблюдают окрашивание.

препарат	Реактивы
	Раствор Люголя	Ацетат свинца	Сульфат аммония
печень	Красная окраска	Белый осадок	Интенсивное помутнение.

Литература:

1. Алдашев А.А. и соавт., Биохимия человека, Бишкек, 2013 г стр. 141-171.

2. Комов В.П., Шведова В.Н. Биохимия. – М.: Дрофа, 2008. стр. 222-254.

3. БерезовТ.Т., Коровкин Б.Ф., Биологическая химия. – М.: «Медицина»,

1990,стр. 177-191, 222-267, 2007, стр. 319-359

4. Николаев А.Я. Биохимия , 1989, стр. 368-379, 2004, стр. 380-386, 404-41

5. Лекции

Занятие-14 пед- 2017г

Тема: Спиртовое брожение. Обмен галактозы и фруктозы.

Теоретические вопросы:

1. Схема включения фруктозы в процесс гликолиза в печени, сердце, мышцах. Фруктозурия и причины.

2. Схема включение галактозы в процесс гликолиза. Галактоземия, причина.

3. Спиртовое брожение: пируватдекарбоксилазная и алкогольдегидрогеназная реакции.

4. Глюконеогенез - биосинтез глюкозы из неуглеводов

5. а) реакции образования фосфоенолпирувата из пирувата,

6. б) механизм транспорта оксалоацетата из митохондрии в цитоплазму,

7. в) обходные реакции глюконеогенеза с участием специфических ферментов.

8. Контрольная работа по гликолизу, синтезу и распаду гликогена.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА:

1.Количественное определение концентрации глюкозы в крови глюкозооксидазным методом.

ХОД работы: Определение без депротеинирования – без осаждения белков анализируют сыв. и плазму крови, мочу.

Приготовить опытную пробу по след схеме:

Компоненты в мл	опытная
Рабочий р-р реактивов	2,0
Исследуемый образец	0,02

Перемешать и выдержать в теч. 20 мин. при 37 ⁰С. Через 15 мин после начала

инкубации содержимое пробирки вновь перемешать. Раствор следует предохранять

от прямого действия света. Измерить оптич. плотность раствора опытной пробы против дист.

воды при длине волны 500-560 нм кюветы 0,5см.

Еп

Расчет по формуле: С=--------х 10,0

Ек

Где. Е_П-оптич: плотность исслед. пробы.

Е_К-оптич: плотность калибров. пробы, Ек=0,5

10,0 – сод.глюкозы в ммоль/ л, калибратр

Нормальные величины: в цельной крови, натощак- 3,4- 5,5 ммоль/л

в сыв. плазме - 4,2- 6,1 ммоль/л

Литература:

1. Алдашев А.А. и соавт., Биохимия человека, Бишкек, 2013 г стр. 141-171.

2. Комов В.П., Шведова В.Н. Биохимия. – М.: Дрофа, 2008. стр. 222-254.

3. БерезовТ.Т., Коровкин Б.Ф., Биологическая химия. – М.: «Медицина»,

1990,стр. 177-191, 222-267, 2007, стр. 319-359

4. Николаев А.Я. Биохимия , 1989, стр. 368-379, 2004, стр. 380-386, 404-41

5. Лекции

Занятие-15 пед-2017г

Тема: Аэробный метаболизм пирувата. Цикл Кребса. Челночные механизмы.

Теоретические вопросы:

1.Строение пируватдегидрогеназного мультиферментного комплекса: ферменты и коферменты,

их локализация в клетке.

2. Механизм окислительного декарбоксилирования пирувата, конечные продукты.

3. Цикл Кребса, биологическое значение. Последовательность реакций окисления ацетил-КоА.

Субстратное фосфорилирование в цикле Кребса, его значение.

4. Глицерофосфатный и малатаспартатный челночный механизмы, их биороль.

5. Полный энергетический эффект окисления глюкозы до СО₂ и Н₂О в печени, сердце и

мышцах.

^{Практическая работа:}