1. Ферментативный гидролиз крахмала амилазой слюны при комнатной температуре.

ХОД РАБОТЫ: готовят 6 индикаторных пробирок 2мл H2O+ 1 кап I2 , в отдельную пробирку наливают 5мл 0,5% крахмала + 5 кап слюны, перемешивают и из этого раствора 2кап вносят в пробирку №1, через 20сек в пробирку №2, через 40 сек в пробирку №3 и т.д. Если жидкость в пробирке №2 окрасилась в синий цвет, то время внесения надо удлинить.

индикаторные пробирки 2мл Н2О+ 1 кап I2	время забора проб. в сек.	окраска с I2	Название промежуточных продуктов
1 2 3 4 5 6	0 сек 20 сек 40 сек 60 сек 80 сек 100 сек

Гидролиз крахмала считают законченным, когда в одной из пробирок желтый цвет раствора I₂ не изменится. Из пробирки отбирают 10 кап смеси и проделывают реакцию Троммера: 10 кап NaOH10% + 5кап CuSO₄ – 1% нагревают. выпадает осадок. СuSO4______Cu (OH)₂ альдозы Сu2О оранж.

2.Специфичность действия амилазы слюны.

ХОД РАБОТЫ: в 2 пробирки приливают по 1мл слюны, разведенной в 5 раз (1:5). В первую приливают 5кап. 1% крахмала, во вторую 10 кап. 1% сахарозы. Обе пробирки ставят на 10 минут при температуре 37^оС , после чего с содержимым их проделывают реакцию Троммера: приливают по

10 кап. NaOH 10% + 5кап. 1% СuSO₄ и нагревают.

ВЫВОДЫ:

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекции

2. Березов, Коровкин 1983 с. 114-144, 1990 с. 95-112

3. Николаев1989с.52-76

4. А.А.Алдашев и др. Биохимия человека. 2013г

Занятие № 6 пед-2017г

Тема: Активаторы и ингибиторы ферментов. Энзимология.

Теоретические вопросы:

1. Проферменты. Механизм активирования проферментов на примере пепсина и HCL.

2. Активаторы и ингибиторы (обратимые, специфические, неспецифические). Типы ингибирования: конкурентный и неконкурентный.

3. Механизм регуляции активности ферментов: фосфорилирование, дефосфорилирование, обратная отрицательная связь. Регуляция синтеза ферментов в клетке.

4. Энзимология. Направления энзимологии:

1) Энзимопатология. Виды энзимипатии и причины.

2)Энзимодиагностика. Изоферменты. Органоспецифические ферменты. Их значение в энзимодиагностике. Трансаминазы, изоформы ЛДГ и креатинкиназы, их значение в клинике и диагностике.

3) Энзимотерапия.

5. Контрольная работа по ферментам.

Лабораторные работы:

1)Влияние температуры на активность фермента амилазы слюны.

ХОД РАБОТЫ: берут два ряда пробирок по 4шт, в 1-4 капают по 10кап 0,5% крахмала, в 5-8 по 10 кап слюны, разведенной в 10 раз. Пробирки оставляют на 10минут в следующих условиях:

Пробирки	Температура	Окраска с I2
1 и 5	00С лед
2 и 6	200С комнатная t
3 и 7	370С водяная баня
4 и 8	1000С кип. вод. баня

Через 10мин сливают содержимое пробирок 1 и 5, 2 и 6, 3 и 7, 4 и 8. Перемешивают, снова оставляют на 10 мин в тех же условиях и проделывают реакцию с I₂

ВЫВОДЫ: