- •2. Разделение альбуминов и глобулинов яичного белка методом высаливание.
- •4.Осаждения белков солями тяжелых металлов
- •Электрофореграмма белков сыворотки крови, их фракции и функции
- •1. Количественное определение кон-ции белка биуретовым методом.
- •2.Определение концентрации гемоглобина (унифицированный гемоглобинацидный метод)
- •Определение продуктов гидролиза нуклеопротеинов дрожжей
- •Ферментативный гидролиз крахмала амилазой слюны при комнатной температуре.
- •2.Специфичность действия амилазы слюны.
- •Занятие № 6 пед-2017г
- •1)Влияние температуры на активность фермента амилазы слюны.
- •2) Влияние реакции среды рН на активность фермента амилазы слюны.
- •3 Количественное определение витамина с с методом йодиметрического титрования.
- •Николаев, 1989, с. 60-70, 2004, с 434- 435
- •Березов, Коровкин , 1990, с. 147- 162, 2007, с 220- 240
- •Качественные реакции
- •Березов, Коровкин 1983, с.169-186, 1990, с.154-161, 138-146, 2007,с. 208-218
- •Николаев, 1989, с.167-172, 380-387, 444-445, 2004, с 68-77.
- •Занятие 10 пед - 2017 г
- •1. Качественные реакции на инсулин
- •2. Реакция Фоля
- •1. Качественные реакции на адреналин:
- •3. Диазореакция на эстрон/фолликулин/
- •1.Качественные реакции на субстраты цикла Кребса.
- •2. Реакция с альфа- нафтолом/
- •3. Качественная реакция на молочную кислоту (лактат).
- •2.Патологические составные части желудочного сока, их обнаружение и причины образования.
- •1.Количественное определение креатинина в моче.
2.Определение концентрации гемоглобина (унифицированный гемоглобинацидный метод)
Нормальные величины гемоглобина: у женщин: 120-140г/л 12,0-14,0г%
у мужчин: 130-160г/л 13,0-16,0г%
ХОД РАБОТЫ: 0,02мл крови приливают к 5,0 мл трансформирующего раствора, хорошо перемешивают. Через 10мин измеряют на ФЭКе, длина волны 540нм, зеленый светофильтр, кювета на 10мм, против дист. воды.
Расчет содержания гемоглобина производят по готовому калибровочному графику.
Выводы:
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ:
Снижение кон-ции гемоглобина может быть при - кровопотере, анемии, снижается до 6,8г%
Повышение -при эритроцитозах, аритмии, повышается до 18-21 г%. Новорожденным свойственно физиологическое увеличение содержания гемоглобина.
ЛИТЕРАТУРА:
1. ЛЕКЦИИ
2. БерезовТ.Т., Коровкин Б.Ф, 1990 с.22-27, 60-62, 1983 с.16-23
3. Николаев А.А, 1989, 2004
Занятие 4 пед-2017г
Тема: Сложные белки, их строение и биологические функции (продолж.)
ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ:
Фосфопротеины, их строение и биороль.
Липопротеины сыворотки крови. Строение и функции ЛПНП, ЛПОНП, ЛПВП и хиломикронов.
3.Строение и биологическая роль гликопротеинов. Гликозамингликаны, строение гиалуроновой кислоты.
4. Металлопротеины, их строение, биороль.
5.Нуклеопротеины (ДНП, РНП). Схема гидролиза нуклеопротеинов.
6.Нуклеиновые кислоты (ДНК, РНК), их химический состав, строение, виды и функции.
Строение мононуклеотидов, нуклеозидов.
7.Полифосфаты нуклеотидов и их функции. Строение АТФ, ее роль в организме.
8.Строение циклических монофосфатов ц- АМФ, ц- ГМФ, их роль.
9.Первичная, вторичная и третичная структуры НК.
10.Контрольная работа по сложным белкам.
Практическая работа:
Определение продуктов гидролиза нуклеопротеинов дрожжей
Студенты получают готовый гидролизат дрожжей и определяют в нем следующие продукты гидролиза: (предварительно нейтрализовать NaOH):
Белок /биуретовая реакция /: к 5кап. гидролизата + 10 кап. NaOH 10% + 2кап. CuSO4 1%,
появляется розово - фиолетовая окраска.
Фосфор / реакция с молибденовокислым аммонием/:
к10 кап. гидролизата + 20кап.молибденового реактива
и кипятят – появляется лимонно- желтый цвет /не
осадок/. Пробирки охладить под холодной водой, на
дне появляется кристаллический лимонно-желтый
осадок фосфорном - молибденового аммония.
Рибоза / дезоксирибоза / - дифениламин с d- рибозой дает синее окрашивание, а с рибозой -
зеленое:
10 кап гидролизата- 20 кап. 1% дифениламина и кипятят в вод. бане в теч. 15 мин.- образуется сине- зеленое окрашивание.
Реакция с альфа- нафтолом
/к 10 кап гидролизата + 5кап. 0,2% спиртового раствора альфа -нафтола + 20 кап. H2SO4 конц. –появляется розово-фиолетовое окрашивание.
ЛИТЕРАТУРА:
ЛЕКЦИИ
БерезовТ.Т., Коровкин Б.Ф, 1990 с.22-27, 60-62, 1983 с.16-23
Николаев А.А, 1989, 2004
А.А.Алдашев. Биохимия человека. 2012г.
Занятие № 5 пед – 2017г
Тема: Ферменты. Классификация.Механизм действия ферментов. Кинетика ферментативных реакий.
ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ:
Ферменты. Химическая природа ферментов. Отличия ферментов от неорганических катализаторов. Энергия активации.
Номенклатура и классификация ферментов. Характеристика каждого класса ферментов: оксидоредуктазы, трансферазы, гидролазы, лигазы, изомеразы. лиазы и примеры реакций.
Мультиферментые системы, их определение и функции, привести примеры.
Структурная классификация ферментов: простые и сложные ферменты. Что такое кофермент, кофактор, апофермент, субстрат.
Активный центр ферментов, его участки и функции. Аллостерический центр.
Механизм действия ферментов. Энергия активации. Образование фермент-сустратного комплекса и его значение. Механизм действия ферментов в реакциях анаболизма и катаболизма.
Специфичность ферментов. Виды специфичности, привести примеры. Теория соответствия Фишера и Кошленда
Кинетика ферментативных реакций.
1) Зависимость скорости ферментативной реакции от концентрации фермента.
2) Зависимость скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата. Уравнение Михаэлиса-Ментена.
3) Зависимость скорости ферментативной реакции от температуры.
4) Зависимость скорости ферментативной реакции от рН среды.
Практическая работа: