Порядок работы с иммерсионной системой

1. Выбирают объектив с увеличением х90 или х100.

2. Поднимают конденсор и открывают диафрагму.

3. Наводят свет под малым увеличением сухой системы (х8).

4. На препарат наносят небольшую каплю иммерсионного (кедрового) масла и, глядя сбоку, под контролем глаза, иммерсионный объектив осторожно опускают, погружая его в масло.

5. Тубус очень медленно поднимают, вращая сначала макро-, а затем микрометрический винт, при помощи которого настраивается ясное изображение объекта (микровинт поворачивают не более чем 0,5 оборота в ту или другую сторону). Препарат просматривают в нескольких полях зрения.

6. После просмотра препарата масло с иммерсионного объектива удаляют чистой марлевой салфеткой и переводят револьвер на объектив малого увеличения (х8).

Темнопольная микроскопия позволяет наблюдать живые бактерии.

При микроскопии этим методом лучи освещающие объект, не попадают в объектив микроскопа, поле зрения остается темным, а объект на его фоне кажется светящимся. Эффект темного поля создается при помощи специального конденсора (параболоид или кардиоид).

Для наблюдения в темном поле свет устанавливают и центрируют как

для светлого поля, и, заменив конденсор на специальный, прибавляют свет до максимума. Препараты для исследования в темном поле готовят на очень чистых предметных и покровных стеклах определенной толщины: предметные – не более 1,2 мм, покровные – 0,17 мм.

Фазово-контрастная микроскопия позволяет изучать живые и неокрашенные объекты за счет повышения их контрастности. Распространение световых волн в прозрачных однородных объектах не сопровождается потерей интенсивности света.

При прохождении света чрез неокрашенные объекты изменяется фаза

световой волны, что и используется в фазово-контрастной и интерференционной микроскопии. Меняется скорость прохождения света через объект по сравнению со скоростью света в окружающей среде. Она будет большой или меньшей в зависимости от того будет ли показатель светопреломления объекта соответственно больше или меньше, чем в окружающей среде. Эти колебания, называемые фазовыми, так как при них меняется только фаза колебания прошедшего света характерны для большинства биологических объектов.

Глаз человека не способен воспринимать фазовые изменения света. По-

этому неконтрастные (фазовые) объекты при обычном микроскопическом исследовании остаются невидимыми. Zernike предложил специальное устройство конденсора и объектива, которые регулируют изменения фазы световых волн и превращают разность фаз в разность интенсивностей, благодаря чему детали строения объекта становятся доступными для глаз.

Для работы по методу фазового контраста нужно, кроме обычного био-

логического микроскопа, иметь еще специальное устройство. Установку устройства производят следующим образом. Кондерсор и объектив заменяют фазовыми. Основным условием является оптимальная освещенность, которая достигается установкой света по Келлеру. Фазовый конденсор поворотом револьверного диска устанавливают на 0. Это положение соответствует обычному светлопольному конденсору. Только после этого устаналивают револьверный диск на то число, которое соответствует выбранному объективу. Используют объективы апохроматы. Окуляр обычного светового микроскопа заменяется на вспомогательный, который настраивают на изображение двух колец (кольцевая диафрагма конденсора и фазовая пластинка). Для повышения контрастности фазовые кольца покрывают металлом, поглощающим прямой свет, не влияя на сдвиг фазы. Центрировочным устройством конденсора добиваются совмешения колец. Заменив вспомогательный окуляр на обычный можно производить исследование препарата.

Поляризационная микроскопия позволяет получить изображение неокрашенных анизотропных структур; интерференционная микроскопия, объединяющая принципы фазово-контрастной и поляризационной микроскопии применяется для получения контрастного трехмерного изображения неорашенных обектов. Специальная интерференционная оптика (оптика Номаркского) нашла применение в микроскопах с дифференциальным интерференционным контрастом.

Контрольные вопросы:

1. Назначение и принцип устройства бактериологической лаборатории.

2. Правила поведения и работы в лаборатории.

3. Правила взятия и пересылки патологического материала.

4. Методы микробиологического исследования.

5. Принцип работы с иммерсионной системой микроскопа.