Методы диагностики инфекционных болезней рыб

Диагноз на инфекционные болезни ставят комплексно, учитывая эпизоотологические данные, клинические признаки, патологические изменения в органах и тканях и результаты лабораторных исследований.

Методы лабораторных исследований

При лабораторном исследовании материала, содержащего микроорганизмы, используют бактериологический, серологический и молекулярно-генетический методы.

I. Бактериологический метод включает:

1. Бактериоскопию – просмотр препаратов с помощью различных микроскопов для изучения морфологических особенностей микроорганизмов: (формы, размера, особенностей внутренней структуры, расположения в мазках, подвижности, наличия спор и капсул) и их тинкториальных свойств (способности воспринимать ту или иную окраску, отношения к растворам спиртов, кислот, щелочей).

2. Собственно бактериологический метод исследования (метод чистых культур) – посев исследуемого материала на питательные среды, культивирование микроорганизмов, получение чистой культуры и изучение её биохимических свойств с целью идентификации.

3. Биологический метод (биопробу) – заражение биомоделей выделенной культурой микроорганизма с целью изучения её вирулентности, для подтверждения того, что в медицинской или ветеринарной лаборатории выделен и идентифицирован именно микроорганизм, вызвавший болезнь.

II. Серологический метод – использование иммунологического принципа взаимодействия специфических антигенов и антител, в результате чего с помощью серологических реакций можно идентифицировать микроорганизм или обнаружить антитела к нему в сыворотке крови исследуемых животных или людей.

III.Молекулярно-генетический метод– выявление в исследуемом материале фрагментов ДНК, строго специфичных для каждого вида микроорганизмов (полимеразная цепная реакция (ПЦР)).

Устройство биологического светового микроскопа и правила работы с ним

Разрешающая способность человеческого глаза составляет 80 мкм и выше, а размеры микроорганизмов находятся в пределах 2-10 мкм, поэтому их обнаружение и изучение невозможно без микроскопа.

Основные и наиболее важные части светового микроскопа – объективы и окуляры.

Объективы подразделяются на сухие и иммерсионные. Данные об увеличении каждого объектива обозначены на его оправе: х8, х40, х90, х100, два последние (х90 и х100) являются иммерсионными и имеют дополнительный буквенный индекс ОИ, или МИ, а также черную маркировочную линию, в нижней части объектива. В микробиологии их применяют наиболее часто. Фронтальная передняя линза иммерсионных объективов очень мала, т.к. вследствие короткого фокусного расстояния имеет большую кривизну. Во избежание потери световых лучей при работе с иммерсионным объективом между ним и препаратом на предметное стекло помещают каплю иммерсионного (кедрового) масла, или другой жидкости, показатель преломления, которой близок к показателю преломления стекла.

Иммерсионная система требует особенно осторожного обращения.

Вторая очень важная часть микроскопа - окуляры. Они состоят из двух линз: глазной и собирательной. На оправе окуляров обозначено увеличение х5 (22 мм), х7 (18 мм), х10 (13 мм), х15 (11 мм).

Общее увеличение микроскопа определяют произведением от увеличений объектива и окуляра. (Например, увеличение объектива - х90, а окуляра - х10, следовательно, увеличение микроскопа составляет 90 х 10 = 900 раз.

Чтобы микроскоп работал безотказно, его следует содержать в чистоте и предохранять от механических повреждений.

Правильное освещение препарата является одним из основных условий

успешной микроскопии. Лучший способ освещения основан на системе Кё-

лера и осуществляется в определенной последовательности (см. справочные материалы по общей микробиологии)