- •Тема № 1 Правила работы и техники безопасности на кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии
- •Устройство бактериологической лаборатории
- •Оборудование бактериологической лаборатории
- •Взятие и пересылка исследуемого материала для проведения бактериологического исследования
- •Методы диагностики инфекционных болезней рыб
- •Методы лабораторных исследований
- •Устройство биологического светового микроскопа и правила работы с ним
- •Порядок работы с иммерсионной системой
- •Тема № 2 Приготовление прижизненных препаратов
- •Определение подвижности у микробов
- •Прижизненная окраска микробов
- •Жгутики и механизмы движения
- •Контрольные вопросы:
- •Тема№3 Изучение микроорганизмов в окрашенных, фиксированных мазках
- •Методы фиксации мазков
- •Приготовление красящих растворов
- •Морфология микроорганизмов
- •Многоклеточные бактерии
- •II. Величина микроорганизмов.
- •IV. Особенности внутренней структуры.
- •V. Подвижность микроорганизмов.
- •Тема № 4 Простые и сложные методы окраски
- •Окраска мазков по Граму
- •Окраска кислото-спирто-щелочеустойчивых микроорганизмов
- •Люминесцентная микроскопия
Взятие и пересылка исследуемого материала для проведения бактериологического исследования
При взятии и пересылке руководствуются соответствующими инструкциями, а также следующими правилами. Исследуемый материал берут стерильными инструментами в стерильную посуду.
Больных или подозрительных по заболеванию инфекционными и инвазионными болезнями рыб доставляют в лабораторию в живом виде.
1. Рыб перевозят в емкостях, предназначенных для перевозки живой рыбы, заполненных на 3/4 объема водой из того же водоема, откуда взята рыба. Рыба, доставленная в лабораторию в бумаге, марле и др. упаковочных материалах, для исследования непригодна.
При отсутствии возможности доставить живую рыбу, у крупных рыб берут кусочки пораженных органов и тканей, помещают их в стерильную стеклянную посуду (жабр, печени, почек, селезенки, сердца, головного мозга ), заливают стерильным 40%-ным водным раствором глицерина, закрывают пробкой, составляют сопроводительный документ и направляют с нарочным в лабораторию.
Мелких рыб (мальки, сеголетки) можно отправлять и фиксировать целиком.
Кишечник перед фиксацией осторожно вскрывают или делают на нем несколько надрезов, чтобы фиксирующая жидкость проникла в его полость.
2. Жидкий патологический материал (кровь, экссудат и др.) доставляют в лабораторию в запаянных стерильных пастеровских пипетках, или в шприцах, пробирках, тупферах.
Кровь для исследования берут из хвостовой артерии или из сердца. Чешую на месте взятия крови слущивают скальпелем, кожу вытирают от слизи и дезинфицируют 70%- ным спиртом. Кровь насасывают в пастеровскую пипетку.
Кровь для исследований берут пастеровской пипеткой из хвостовых сосудов (артерии и вены) или из сердца с соблюдением правил асептики и антисептики (рис. 1). Взятую кровь используют для посева, приготовления мазков, гематологических и биохимических исследований. Цельную кровь стабилизируют гепарином (1000 ЕД/мл) или лимоннокислым натрием. Сыворотку крови получают общепринятым методом, помещают в стерильные запаянные ампулы, а летом консервируют 5%-ным раствором фенола (1—2 капли на 1 мл сыворотки) или тиомерсалом из расчета 10 мг препарата на 10 мл сыворотки. Отобранные жидкие материалы перевозят в термосе со льдом.
Рис.1. Места взятия крови из хвостовых сосудов карпа:
1 - у сеголетков; 2 - у карпов старшего возраста.
Правила фиксации мелких рыб (мальки и сеголетки) после вскрытия брюшной полости фиксируют целиком, а от крупных берут органы или кусочки органов размером 2х3 см и толщиной 0,5-1,0 см. Независимо от степени поражения берут кусочки из различных органов, фиксируют 40%-ным водным раствором глицерина, солевым раствором и кусочками льда.
3. Отбор проб воды из больших водоемов производится в нескольких местах. Пробы, берут на глубине 10-15 см от поверхности и не менее 10-15 см от дна.
Способы отбора проб воды могут быть различными, но обязательным условием является соблюдение асептики и взятие материала в стерильную посуду. Пробы воды в количестве 500 мл отбирают в стерильную посуду с притертой пробкой. Наполняют флаконы с таким расчетом, чтобы при транспортировке не замочить пробку. Посуду и батометры стерилизуют, завернутыми в бумагу и разворачивают их непосредственно перед взятием проб воды.
Пробы воды исследуют не позднее, чем через 2 ч после отбора. При невозможности выполнения этих условий допускается проведение анализа не позднее, чем через 24 ч после отбора проб, сохраняя их при температуре от 1 до 5°С . Посуду с пробами упаковывают в сумки--холодильники.
Отобранные пробы сопровождаются документом, содержащим следующие сведения:
- точное месторасположение водоема;
- дату отбора;
- количество отобранных проб и место их отбора;
- цель исследования: сделан ли отбор в порядке текущего санитарного надзора или по особым показаниям (сигналы об эпизоотологическом неблагополучии и т.д.);
4. Грунт для исследования берут в количестве 2 кг с поверхности дна водоема дночерпателем Экмана и Кирпичникова, соблюдая правила асептики (Рис.2). На исследуемый материал по специальной форме составляют сопроводительный документ и посылают в лабораторию с нарочным. Обследуют до и после проведения оздоровительных мероприятий в частности дезинфекции и др.
Пробы отбирают выше предпологаемого источника загрязнения, в месте поступления сточных вод и на различном расстоянии в нескольких точках ниже места выпусков стоков на течении и в застойных зонах(ямах,низинах). Грунт высушивают на воздухе, растирают в ступке, просеивают через мелкое сито и упаковывают в банки или полиэтиленовые мешочки по 50 гр.
5. Планктон собирают планктонной сеткой, фильтруя такое количество воды, которое необходимо для получения около 50 г живой массы планктона.
Материал для исследования отправляют комиссионно, весь материал (пробы воды, грунта, планктона и рыб) упаковывают в водонепроницаемую тару, составляют акт и сопроводительный документ и отправляют в лабораторию с нарочным.
Рис. 2. Приспособления для взятия проб грунта и планктона: Л — скребок; Б — дночерпатель; В — планктонная сетка.
