Определение резус-фактора крови
Для определения резус-принадлежности крови она направляется в гематологическую лабораторию. При направлении крови в гематологическую лабораторию врач заполняет специальный бланк (рис. 24).
Поскольку в эритроцитах исследуемой крови больного может отсутствовать Rh-антиген (кровь больного резус-отри-
цательная), но он мог быть сенсибилизирован Rh-антигеном при переливании ему резус-положительной крови (беременная женщина могла быть сенсибилизирована Rh-антигеном
плода) и в плазме его крови могут находиться rh-антитела, при заполнении этого бланка особое внимание уделяется гемотрансфузионному и сенсибилизационному анамнезу (ана-мнез гемотрансфузий и анамнез протекающих беременностей).
Если окажется, что кровь резус-отрицательная, то будет произведено исследование ее на наличие антител и определен их титр.
В гематологической лаборатории определение резус-фактора крови проводится с помощью цоликлона анти-D супер в желатиновой среде. Для этого в 2 пробирки помещают взвесь (0,02-0,03 мл) эритроцитов исследуемой крови и 2 капли (0,1 мл) 10% желатина. Затем в одну пробирку вносят 2 капли (0,1 мл) цоликлона анти-D, в другую (контрольную) – 2 капли (0,1 мл) физиологического раствора. Содержимое обеих пробирок встряхивают и помещают на 15 мин. в водяную баню или термостат при температуре +46 – +480С. По истечении указанного времени в обе пробирки добавляют 5-8 мл физиологического раствора и перемешивают их содержимое путем двукратного переворачивания пробирок.
Результат учитывают, просматривая пробирки на свет невооруженным глазом или через лупу. Появление реакции агглютинации в пробирке с цоликлоном анти-D и отсутствие ее в другой пробирке свидетельствует о том, что исследуемая кровь резус-положительная. Отсутствие реакции агглютинации в обеих пробирках указывает на отсутствие в исследуемой крови Rh-антигена – кровь резус-отрицательная.
Кроме того, в гематологической лаборатории исследуемая кровь будет проверена на групповую принадлежность. Если окажется, что группа крови определена неправильно, об этом будет сообщено врачу для повторного определения группы крови больного.
В настоящее время в гематологической лаборатории определение групп крови и Rh-фактора производят перекрестным способом с помощью стандартных эритроцитов а и в (рис.25).
Цоликлон
анти-А Цоликлон анти-В
Цоликлон
D-super
Эритроциты крови
больного
Сыворотка
крови больного
Эритроциты крови больного
Стандартные
эритроциты
А
Стандартные
эритроциты
В
Рис. 25. Определение
групп и Rh-фактора
крови
перекрестным
способом
Определение Келл-фактора крови
Определение Келл-фактора крови основано на принципе агглютинации агглютиногена Келл, расположенного на эри-троците исследуемой крови, агглютининами, содержащимися в специальном реактиве (моноклональные реактивы системы Ortho Bio Vue). Эти реактивы находятся в специальных пробирках в контейнере для проведения исследования у шести пациентов (рис. 26).
В системе Ortho Bio Vue используется метод агглютинации в колонке (пробирке), содержащей стеклянные шарики и реактив (забуферный раствор бычьего альбумина, макромолекулярные усилители, а также весо-объемные консерванты 0,1% азид натрия и 0,01 М этилендиаминтетрауксусную кислоту). После агглютинации эритроцитов пробирку центрифугируют. Агглютинированные эритроциты задерживаются на стеклянных шариках, а неагглютинированные перемещаются в нижнюю часть пробирки.
Оценка результатов определения Келл-фактора:
– положительный результат (+) – агглютинация эритроцитов, которые в верхней части пробирке со стеклянными шариками образуют полоску, свидетельствует о наличии соответствующего антигена (Келл-фактора);
– отрицательный результат (–) – отсутствие агглютинации эритроцитов, которые со стеклянными шариками оседают на дно пробирки, свидетельствует об отсутствии выявляемого антигена (Келл-фактора).
Определение крови на наличие Келл-фактора производится только в гематологической лаборатории лечебного учреждения.