62.Иммунохимические методы анализа в химико-токсикологических исследованиях. Общая характеристика, принцип метода. Применение в химико-токсикологическом анализе.
ИХМА, осн-ые на специфическом связывании определяемого соединения соответствующими антителами.ИМХА высокочувс-ны, имеют групповую специфичность, просты в исполении, позвл.одновремено исследовать большое число проб без специальной подготовки и потому удобны для скрининг-диагностики. Классификация основных ИХМА: 1)радиоиммунный анализ- РИА( Способ детек.-радиоакт-ть),2)иммуноферментный анализ- ИФА( ферментативная акт-сть),3)поляризационный флуороиммуноанализ-ПФИА (интенсивность флуоресцентной поляризации),4)иммунохроматографический анализ (образ-ние окрашенного комплекса в тест-зоне),5)металлоиммуноанализ(атомные спектры поглощения),7) рефрактометрический иммуноанализ (преломление света). Наибольшее распр-ние в химико-токс.ан-зе наркот-их и лек.в-в получили ПФИА, ИФА и РИА. Для ПФИА мочи с пом.TD[-анализатора исп.набор реагентов-стандартов:опиаты, барбитураты,бензодиазепины, каннабиноидв,амфетамин-метамфетамин,амфетамин,кокаин,метадон,эфедрин,фенобарбитал,барбамил. Методика проведения анализа вкл.нес-ко этапов- калибровку, собственно анализ, подтверждающий анализ. Для анализа образцов мочи в карусель для анализа помещ.необх.число измерит-х кювет и картриджей, соотв-щее числу образцов.Прибор атомат-ки проводит анализ в теч.15-20 мин и выдает распечатку с указанием сод-и анал-го в-ва в образцах мочи.При получении положительного рез-та, требуется провести дальнейшее исслед-ние образца мочи подтверж-ми методами: хромато-масс-спектрометрий, ГЖХ,ВЭЖХ. При отриц-ном рез-те дельнейшее исслед.не проводят.
63.Спектрофотометрия (прямая, дифференциальная). Общая характеристика. Применение в химико-токсикологическом анализе
Спектрофотометрия - метод исследования и анализа веществ, основанный на измерении спектров поглощения в оптической области электромагнитного излучения. В большинстве спектрофотометров, применяемых в аналитической практике, монохроматизация светового потока осуществляется за счет использования диспергирующих (разлагающих свет в спектр) элементов — призм или дифракционных решеток. Разработаны различные конструкции спектрофотометров, работающих как по однолучевой (одноканальной), так и по двухлучевой (двухканальной) схеме. Принципиальная блок-схема, включающая основные узлы, обеспечивающие работу спектрофотометра.
1 – источник излучения; 2 — монохроматор; 3 — кюветное отделение; 4 — приемник излучения (фотоэлементы); 5 – усилитель; 6 – регистратор (отсчетное или записывающее устройство).
Свет от источника излучения 1 попадает в монохроматор 2, в котором он разлагается в спектр. Монохроматизованный световой поток проходит после этого через кюветное отделение 3, в котором устанавливаются кюветы с анализируемым раствором и раствором сравнения («нулевым» раствором). Пройдя через кюветы с растворами, световой поток попадает на фотоэлементы приемника излучения 4, в котором энергия светового потока преобразуется в фототок, усиливаемый в блоке усилителя 5, после чего усиленный электрический сигнал регистрируется в блоке регистратора 6 либо в виде спектральной кривой, либо по показанию отсчитывающего устройства. В качестве источника излучения в спектрофотометрах используют лампы накаливания при работе в видимой области спектра, в которой они обеспечивают непрерывный световой поток (а не линейчатый, даваемый ртутной лампой), и водородные либо дейтериевые лампы — при работе в УФ диапазоне спектра (-200—350 нм). Для разложения светового луча в спектр в монохроматоре чаще всего используют призмы или дифракционные решетки. При работе в видимой и в ближней ИК области используют стеклянные призмы, а также стеклянные конденсоры (линзы) и кюветы. При работе в УФ диапазоне 200-400 нм применяют кварцевую оптику (призмы, конденсоры, кюветы), так как стекло поглощает УФ лучи.