15.6 Реакция адамкевича
Качественная реакция на триптофан: при добавлении к раствору белка небольших количеств глиоксиловой кислоты в присутствии серной кислоты образуется красно-фиолетовое окрашивание
15.7 Защитные агенты амино- (а) и карбоксильных (б) групп в ходе пептидного синтеза
№ |
Группа |
Формула
|
Сокра щение |
Условия отщепления |
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
|
Формильная (А)
Трифторацетильная (А)
Фталильная (А)
п-Толуолсульфо-нильная (тозильная) (А)
Бензилоксикарбо- нильная(карбобензокси-) (А)
Третбутилоксикарбо-нильная (А)
9-флуоренилметилок-сикарбонильная (А)
Бензиловый эфир (Б)
Третбутиловый эфир (Б)
Фениловый эфир (Б) |
НСО-
|
Form
Tfa
Pht
Tos
Z
Boc
Fmoc
OBzl
OButt
OPhe |
1 н. HCl / СH3OH; гидразинди-ацетат в СH3OH; 0,2 н. NaOH; разб. NH4OH;
гидрозинолиз
Na / NH3
H2 (Pd); HF; HBr / CF3COOH; CF3COOH; HF; HCOOH;
2 н.HCl / диоксан; BF3. (C2H5)2O / CH3COOH ; морфолин или пиперидин в ДМФА;
H2 (Pd), -OH ;
CF3COOH ; HCl / CH2Cl2 ;
-OH / H2O2, pH 10,5 |
15.8 Пептидный синтез
Образование пептидной связи между СООН-группой одной аминокислоты и a-NН2-группой другой.
Пептидная цепь наращивается присоединением аминокислоты одной за другой с временной защитой функциональных групп, не участвующих в образовании пептидной связи, и активацией других.
После окончания синтеза защитные группы удаляют. Образование пептидных связей осуществляют между N-защищенной (защищенная аминогруппа) аминокислотой или ее производным и аминокислотой в виде соли или сложного эфира (О-защищенная аминокислота):
NH2-группу защищают введением алкоксикарбонильной группы [Y= C6H5CH2OCO-, (СН3)3СОСО-] (реакция аминокислоты с хлоругольными эфирами R-OCOC1), ацильной группы [формильная (НСО-), трифторацетильная (СF3СО-) и др.] или алкильной группы [тритильная (СбН5)3С- и др.].
Для реакции образования пептидной связи N-защищенную a-аминокислоту активируют, превращая в хлор-ангидрид (X = С1) или активированный эфир (например, п-нитрофениловый, X = -О-С6Н4-NO2-n). Снятие защиты проводят с использованием специфических реагентов и методов. Для снятия третбутил- и бензилоксикарбонильных групп применяют гидролиз в присутствии CF3COOH, для снятия тритильной защиты ─ гидрирование в мягких условиях.