Глава 2 Объекты и методы исследования

2.1 Объекты исследования

Объектами исследования являлись культуры грамотрицательных бактерий Escherichia coli, и плесневый гриб Mucor Mucedo.

Рисунок 1 – Схема проведения исследований

Исследования проводились по схеме, представленной на рисунке 1.

2.2 Используемые материалы и реактивы

CuCl₂ 2H₂O – по ГОСТ 4167-74

CdCl₂ 2,5H₂O – по ГОСТ 4330-76

PbCl₂ ∙2H₂O – по ГОСТ 4210-77

KMnO₄ – по ГОСТ 20490-75

MnCl₂∙ 4H₂O – по ГОСТ 612-75

ZnCl₂ 2H₂O – по ГОСТ 4529-78

AgNO₃ – по ГОСТ 1277-75

SnCl₄ – по ТУ 2623-02-40897595-99

Спирт этиловый 96 % – по ГОСТ Р 51999-2002

Чашки Петри – по ГОСТ 25336-82

Предметные стекла – по ГОСТ 9284-75

Натрий хлористый – по ГОСТ 4233-77

Гидрохлоркислая кислота – по ГОСТ 3118-77

Агар – по ТУ 6-09-50-2510

Гидроксид натрия – по ГОСТ 11078-78

Дигидроортофосфат калия – по ГОСТ 4198-75

Гидроортофосфат калия – по ГОСТ 2493-75

Пептон – по ГОСТ 13805

Дистиллированная вода – по ГОСТ 6709-72

Глюкоза – по ГОСТ 6038-79

Лецитин – по ГОСТ 32052-2013

2.3 Метод получения бактерицидного покрытия

Суть метода заключается в получении оксидного покрытия из растворов солей при температуре выше температуры разложения солей, но ниже температуры размягчения твердого неорганического материалы. Желаемым результатом будет получение твердого прозрачного покрытия с заданными свойствами.

Таблица 2 – Состав и температура нанесения покрытий

№, п/п	Состав наносимого раствора для получения покрытия	Температура нанесения
1	SnCl4	500°C
2	CuCl2+ SnCl4	500°C
3	AgNO3	500°C
4	PbCl2 + SnCl4	500°C
5	CdCl2+ SnCl4	500°C
6	KMnO4+ SnCl4	500°С
7	ZnCl2+ SnCl4	500°С
8	MnCl2 + SnCl4	500°С

Приготовление покрытия происходит по следующим пунктам:

1. Готовим спиртовой раствор SnCl₄.

2. Оставляем данный раствор на 1 сутки для прохождения гидролиза.

3. Готовим растворы SnCl₄∙5H₂О, CuCl₂+SnCl₄, AgNO₃, CdCl₂+SnCl₄, PbCl₂+SnCl₄, KMnO₄+SnCl₄, MnCl₂+SnCl₄, ZnCl₂+SnCl₄, для этого берем 0,5 г соли и растворяем в 50 мл SnCl₄, 0,5 г AgNO₃ растворяем в этиловом спирте. Оставляем растворы на день.

4. Подготавливаем огнеупорный (шамотный) кирпич для работы. Вырезаем отверстия для чашки Петри и предметных стекол. В отверстия насыпаем глинозем.

5. Вставляем в муфельную печь кирпич с чашкой Петри и предметным стеклом, разогреваем ее и осуществляем температурную обработку при температурах выше температуры разложения солей металлов, но ниже температуры плавления или размягчения твердого неорганического материала (см. таблица 2). С помощью щипцов для муфельной печи слегка вытаскиваем кирпич и наклоняем для напыления раствором соли. Вставляем кирпич обратно в печь и через 10 минут повторяем операцию с напылением.  Технический результат заключается в получении прозрачного прочного покрытия с усиленными бактерицидными свойствами. Выключаем муфельную печь и ждем охлаждения. Вынимаем кирпич из печи с готовым покрытием.

6. Делаем повторности для обеспечения точности результатов.

7. В результате получаем 16 чашек Петри и 16 предметных стекол с бактерицидными покрытиями толщиной несколько нанометров. Толщину покрытия можно регулировать.