МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ

УЧРЕЖДЕНИЕ ОБРАЗОВАНИЯ

«ПОЛЕССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ»

Кафедра биотехнологии

Допущено к защите Заведующий кафедрой ___________О.Н. Жук ______________ 2017 г.

ДИПЛОМНАЯ РАБОТА

на тему:

«Морфо-биологическая и генетическая характеристика вируса гепатита С и сравнительный анализ методов его выявления (ИФА и ПЦР «в режиме реального времени»)»

Специальность 1-3101 01 «Биология (по направлениям)»

Студент 5 курса группы 1241412 _________ Позняк Ангелина Анатольевна

Биология (по направлениям) (подпись) ______________20___

Научный руководитель: _________ Самойлова Тамара Ивановна

Профессор, (подпись) ______________20___

доктор биологических наук,

профессор

ПИНСК 2017

Реферат

Дипломная работа: страниц 48, рисунков 21, таблиц 2, источников 53

Ключевые слова: ИФА, ПЦР «В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ», ГЕПАТИТ С, ВИРУС ГЕПАТИТА С, РНК, АМПЛИФИКАТОР.

Цель работы: изучить морфо-биологическую и генетическую характеристику вирусного гепатита С, а также клиническую картину и пути инфицирования данным вирусом, освоить основные методы его диагностики (ИФА и ПЦР «в режиме реального времени») и провести их сравнительный анализ.

Объект исследования: вирус гепатита С и его генетический материал.

Методы исследований: анализ современной зарубежной и отечественной литературы, морфо-биологический и генетический анализ, определение вируса гепатита С и сравнительный анализ методов его диагностики (ИФА и ПЦР «в режиме реального времени»), использование программы ПЦР в «режиме реального времени» на амплификаторе StratagenMx3000P.

Полученные результаты и их новизна. Результаты: 1) определены методы диагностики вирусного гепатита С и его клиническая картина; 2) произведен качественный и количественный учет результатов при выявлении вирусного заболевания; 3) проведен сравнительный анализ ИФА и ПЦР «в режиме реального времени» как основных методов при диагностировании вируса.

Степень использования: результаты исследований могут быть использованы организациями Министерства здравоохранения, а также специалистами научно-исследовательских лабораторий, как на региональном, так и на республиканском уровне в целях совершенствования прогнозирования и диагностирования вирусного заболевания как гепатит С, включающие развитие системы доклинического медико-генетического консультирования

Область применения: медицина, вирусология, генетика.

Оглавление

Перечень условных обозначений …………………………………………….... 4

ВВЕДЕНИЕ ……………………………………………………………………..	5
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ …………………………………………..	7
РАЗДЕЛ 1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВИРУСА ГЕПАТИТА С ….	7
1.1.1 Морфо-биологическая характеристика вируса гепатита С ………….	7
1.1.2 Структурная организация генома вируса гепатита С и кодированные им белки ………………………………………………………...	8
1.1.3 Классификация и распространение вируса гепатита С ………………	13
1.1.4 Морфогенез вирусных частиц гепатита С …………………………….	15
1.1.5 Основы генетической изменчивости вирусного генома гепатита С ...	16
РАЗДЕЛ 2. ДИАГНОСТИКА ГЕПАТИТА С ……………………………....	19
1.2.1 Основные пути инфицирования вирусом гепатита С ………………..	19
1.2.2 Биохимические маркеры и симптомы гепатита С ……………………	20
1.2.3 Методы лабораторной диагностики гепатита С ……………………...	21
1.2.3.1 Иммунологические методы исследования вируса гепатита….	21
1.2.3.2 Генетические методы исследования вируса гепатита С ……..	22
1.2.4 Значение определения генотипического разнообразия изолятов вируса гепатита С ………………………………………………………………..	26
ВЫВОДЫ ……………………………………………………………………...	28
ГЛАВА 2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ …………………………………..	29
2.1 Забор материала …………………………………………………………..	29
2.2 Выделение РНК вируса гепатита С ……………………………………...	30
2.3 Выявление РНК вируса гепатита С ПЦР «в режиме реального времени» …………………………………………………………………………	32
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ ………	41
3.1 Результаты исследования сывороток крови на наличие ВГС методом ПЦР «в режиме реального времени» …………………………………………..	41
3.2 Результаты исследований сывороток крови на наличие ВГС методом ИФА ………………………………………………………………………………	44
3.3 Сравнительный анализ методов ИФА и ПЦР «в режиме реального времени» при выявлении вируса гепатита С …………………………………..	44
ЗАКЛЮЧЕНИЕ ………………………………………………………………...	48
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК ……………………………………....	49
ПРИЛОЖЕНИЕ А ……………………………………………………………..	53

ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

IgG – иммуноглобулин класса G;

IgМ – иммуноглобулин класса М;

ВГС – вирус гепатита С;

ВКО – внутренний контроль образца;

ВОЗ – Всемирная организация здравоохранения;

ГС – гепатит С;

ИФА – иммунно-ферментный анализ;

ОКО – отрицательный контроль образца;

ПКО – положительный контроль образца;

ПЦР – полимеразная цепная реакция;

СПКО – слабоположительный контроль образца;