Демидюк
Илья
Валерьевич
(499) 196-1853 duk@img.ras.ru
ПРИНЦИПЫ ОЧИСТКИ БЕЛКОВ
ХНОЛОГИЯ БЕЛКОВЫХ ПРЕПАРАТ
МЕДИЦИНСКОГО НАЗНАЧЕНИЯ
КЛОНИРОВАНИЕ И ЭКСПРЕССИЯ ЦЕЛЕВОГО ГЕНА
РЕКОМБИНАНТН |
ПРИРОДНЫЙ |
ЫЙ ПРОДУЦЕНТ |
ПРОДУЦЕНТ |
КУЛЬТИВИРОВАН |
СИНТЕ |
ИЕ |
|
БИОЛОГИЧЕСКИЙ |
З |
МАТЕРИАЛ: |
БЕЛО |
РАСТИТЕЛЬНАЯ, ЖИВОТНАЯ |
|
ТКАНЬ; КУЛЬТИВИРУЕМЫЕ |
|
КЛЕТКИ БАКТЕРИЙ, ГРИБОВ, |
К |
РАСТЕНИЙ, ЖИВОТНЫХ |
БЕЛКОВЫЙ ПРЕПАРАТ МЕДИЦИНСКОГО
НАЗНАЧЕНИЯ
ОЧИСТ 
КА
ЛИТЕРАТУРА
•Скоупс Р. Методы очистки белков. // М.: Мир, 1985.
•Остерман Л.А. Хроматография белков и нуклеиновых кислот. // М.: Наука, 1985.
•Остерман Л.А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. // М.: МЦНМО, 2002
БЕЛКИ СОСТОЯТ ИЗ АМИНОКИСЛОТ
Неполярные, алифатические R
G A P V Отрицательно заряженные
Полярные незаряженные R
L I M D E
|
|
|
Положительно заряженные |
S |
T |
C |
Ароматические R |
|
N Q F Y W K R
ЙСТВА АМИНОКИСЛОТ ОЧЕНЬ РАЗНООБРАЗ
ГИДРОФОБНЫЕ
ЛИФАТИЧЕСКИЕ
АРОМАТИЧЕСКИЕ
|
|
CSS |
P |
|
|
|
|
||
V |
G A |
|||
T CSH |
||||
IL |
|
|||
M |
F |
Y |
K |
|
|
W H |
R |
||
ОЧЕНЬ МАЛЕНЬКИ МАЛЕНЬКИЕ
S |
N |
ЬНО |
D |
Q |
|
|
|
ОТРИЦАТЕЛ |
E |
|
ЗАРЯЖЕНН |
|
ЗАРЯЖЕННЫЕ |
|
|
|
ЫЕ |
|
|
ПОЛОЖИТЕЛЬНО |
|
|
ЗАРЯЖЕННЫЕ |
|
|
ПОЛЯРНЫЕ |
Диаграмма Венна свойств аминокислот адаптирована из
W.R. Taylor, The Classification of Amino Acid Conservation, J. Theor. Biol
119 (1986): 205-218.
ПРОСТРАНСТВЕННАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ БЕЛКОВ
Первичная структура – последовательность аминокислотных остатков в полипептидной цепи.
Вторичная структура – пространственная форма локальных участков белка. Определяется паттерном водородных связей между амидными и карбонильными группами основной цепи. Основные регулярные элементы вторичной структуры α-спирали и β- складчатые листы. Не описывает
Третичнаясп ц фическогоструктураположения– расположениеатомов в в пространстве.всех атомов одной
полипептидной цепи (включая боковые радикалы).
Четвертичная структура – организация мультисубъединичных белковых комплексов.
ОВЫЕ МОЛЕКУЛЫ АМФИФИЛЬНЫ И АМФОТ
2vq x
Распределение зарядов и гидрофобных областей на поверхности молекулы типичного глобулярного белка
ИЗОЭЛЕКТРИЧЕСКАЯ ТОЧКА БЕЛКОВ
Суммарный заряд
Изоэлектрическая точка – значение рН, при котором суммарный заряд молекулы (частицы) полиэлектролита равен нулю и она 
не движется в электрическом поле.
Изоэлектрическая точк
И СИЛЬНО РАЗЛИЧАЮТСЯ ПО РАЗМЕРУ И Ф
Молекулярная масса большинства белков находится в пределах от
Титин камбаловидной000мышцыдо 1 000человека000 Да—. самый большой из известных одиночных полипептидов, состоит из 38138 а.о.